Xây dựng quy trình nuôi muỗi Aedes agypti trong phòng thí nghiệm và đánh giá khả năng diệt bọ gậy Aedes agypti của tinh dầu sả chanh (cymbopogon citratus) và bạch dàn chanh (eucalyptus citriodora)

Tài liệu Xây dựng quy trình nuôi muỗi Aedes agypti trong phòng thí nghiệm và đánh giá khả năng diệt bọ gậy Aedes agypti của tinh dầu sả chanh (cymbopogon citratus) và bạch dàn chanh (eucalyptus citriodora): Tp chí Khoa hc Lc Hng 57 JS JSLHU JOURNAL OF SCIENCE OF LAC HONG UNIVERSITY Tp chí Khoa hc Lc Hng 2019, 7, 001-001 XÂY DNG QUY TRÌNH NUÔI MUI AEDES AGYPTI TRONG PHÒNG THÍ NGHIM VÀ ÁNH GIÁ KH NNG DIT B GY AEDES AGYPTI CA TINH DU S CHANH (CYMBOPOGON CITRATUS) VÀ BCH ÀN CHANH (EUCALYPTUS CITRIODORA) Rearing of aedes agypti mosquitoes in the laboratory and assessing the larvicide of lemongrass oil (Cymbopogon citratus) and lemon eucalyptus oil (Eucalyptus citriodora) against Aedes agypti larvae H Dng Mnh1a*, inh Ngc Xuân Hng1,b , Lê Th Hng Hnh1,c, Nguyn Th Thu Dng1,d 1Khoa Dc, Trng i hc Lc Hng, Biên Hòa, ng Nai, Vit Nam amanhhodung@gmail.com;bdinhngocxuanhuong1311@gmail.com;chonghanhle1012@gmail.com;dd.113000107@gmail.com TÓM TT. Vi mc tiêu tìm kim các hp cht t nhiên có kh nng bo v con ngi khi s lan truyn ca bnh st xut huyt (SXH) do mui Aedes agypti và ch ng ánh giá hiu qu ca các ...

pdf5 trang | Chia sẻ: quangot475 | Lượt xem: 346 | Lượt tải: 0download
Bạn đang xem nội dung tài liệu Xây dựng quy trình nuôi muỗi Aedes agypti trong phòng thí nghiệm và đánh giá khả năng diệt bọ gậy Aedes agypti của tinh dầu sả chanh (cymbopogon citratus) và bạch dàn chanh (eucalyptus citriodora), để tải tài liệu về máy bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
Tp chí Khoa hc Lc Hng 57 JS JSLHU JOURNAL OF SCIENCE OF LAC HONG UNIVERSITY Tp chí Khoa hc Lc Hng 2019, 7, 001-001 XÂY DNG QUY TRÌNH NUÔI MUI AEDES AGYPTI TRONG PHÒNG THÍ NGHIM VÀ ÁNH GIÁ KH NNG DIT B GY AEDES AGYPTI CA TINH DU S CHANH (CYMBOPOGON CITRATUS) VÀ BCH ÀN CHANH (EUCALYPTUS CITRIODORA) Rearing of aedes agypti mosquitoes in the laboratory and assessing the larvicide of lemongrass oil (Cymbopogon citratus) and lemon eucalyptus oil (Eucalyptus citriodora) against Aedes agypti larvae H Dng Mnh1a*, inh Ngc Xuân Hng1,b , Lê Th Hng Hnh1,c, Nguyn Th Thu Dng1,d 1Khoa Dc, Trng i hc Lc Hng, Biên Hòa, ng Nai, Vit Nam amanhhodung@gmail.com;bdinhngocxuanhuong1311@gmail.com;chonghanhle1012@gmail.com;dd.113000107@gmail.com TÓM TT. Vi mc tiêu tìm kim các hp cht t nhiên có kh nng bo v con ngi khi s lan truyn ca bnh st xut huyt (SXH) do mui Aedes agypti và ch ng ánh giá hiu qu ca các dung dch dit b gy Aedes aegypti, chúng tôi ã xây dng quy trình nuôi mui trong phòng thí nghim và ánh giá kh nng dit b gy ca tinh du s chanh (Cymbopogon citratus) và tinh du bch àn chanh (Corymbia citriodora). Nghiên cu ã xây dng các quy trình nuôi mui Aedes aegypti bao gm các bc: cho trng n thành b gy; nuôi b gy thành nhng; nuôi mui; ly và bo qun trng mui. Lá s chanh và bch àn chanh c chng ct bng phng pháp lôi cun theo hi nc thu c tinh du ln lt có hàm lng là 0.33% và 2.13%. Phân tích thành phn hoá hc tinh du bng phng pháp GC-MS, tinh du s chanh có các hp cht chính là là cis-citral (36.19%) và trans-citral (49.32%). Tinh du bch àn chanh vi các hp cht chính là (R)-(+)-citronellal (78.55%) và (R)-(+)--citronelol (12.08%). ánh giá kh nng dit b gy Aedes agypti tui 3 hoc 4 cho thy i vi s chanh nng gây cht trung bình LC50 = 117,93 ppm và LC90 = 196,57 ppm, trong khi ó i vi bch àn chanh LC50 là 98.46 ppm, và LC90 là 165.84 ppm. Trong tng lai, chúng tôi có th ch ng nghiên cu và tìm kim nhiu hp cht t nhiên mi có tim nng dit b gy Aedes agypti. T KHOÁ: b gy aedes agypti, tinh du, cymbopogon citratus, eucalyptus citriodora, c tính dit b gy ABSTRACT. We aim to find natural compounds that can protect people from the spread of dengue by Aedes agypti mosquitoes and proactively evaluate the effectiveness of Aedes aegypti larvicide. Here, we present a protocol for the rearing of Aedes agypti mosquitoes in the laboratory and evaluate the larvicide of lemongrass oil (Cymbopogon citratus) and lemon eucalyptus oil (Eucalyptus citriodora) against Aedes agypti larvae. Four steps to rear Aedes aegypti mosquitoes, including: hatching eggs into larvae; feeding larve into pupae; raising mosquitoes; take and preserve mosquito eggs. Lemongrass leaves and lemon eucalyptus leaves are extracted by steam distillation obtaining an oil yield of 0.33% and 2.13%, respectively. The two essential oils were analyzed by GC-MS method. The main compounds in lemongrass oil are cis-citral (36.19%) and trans-citral (49.32%). The main compounds in lemon eucalyptus essential oil are (R)-(+)-citronellal (78.55%) and (R)-(+)-- citronelol (12.08%). Larvicide of lemongrass oil agaists Aedes agypti larvae showed that the average lethal concentration LC50 = 117.93 ppm and LC90 = 196.57 ppm. Meanwhite, LC50 is 98.46 ppm, and the LC90 is 165.84 ppm for lemon eucalyptus oil. In the future, we can actively search for many natural compounds that have the potential to kill Aedes agypti larvae. KEYWORDS: Aedes agypti larve, essential oils, cymbopogon citratus, eucalyptus citriodora, larvicide 1. GII THIU St xut huyt Dengue là bnh truyn nhim cp tính, bnh lan truyn ch yu qua trung gian mui Aedes aegypti vi hn 50 triu ngi b mc hàng nm trên th gii [1]. Vit Nam là ni có t l mc bnh st xut huyt (SXH) cao, lu hành hu ht các tnh/thành ph trên c nc, nhng ph bin hn khu vc phía Nam và thng bùng phát thành dch ln vào mùa ma, nht là t tháng 7 n tháng 10 [2-3]. Hin cha có thuc iu tr c hiu bnh SXH và cng cha có vc-xin phòng nga bnh SXH nào c cp phép s dng ti Vit Nam. Cho n nay các bin pháp ch yu hn ch s lan truyn bnh SXH vn là dit b gy, dit mui và phòng tránh mui t. Hin nay, vic s dng các hoá cht tng hp nh organophosphate, pyrethroid tiêu dit mui và b gy vi mc thng xuyên qui mô ln, ang dn n nguy c kháng thuc [4-6] , cng nh nh hng ti môi trng và sc kho con ngi. Vic tìm kim các ch phm t nhiên thay th cho các hoá cht tng hp ang c nhiu nhà khoa hc quan tâm. c bit là các tinh du thiên nhiên cha các thành phn có hot tính sinh hc chng li vect mui [7]. Các nghiên cu v kh nng dit b gy ca các tinh du Vit nam rt hn ch, và có rt ít công b khoa hc theo tác gi c bit. Các th nghim kim tra hiu qu ca các dung dch còn hn ch, ch yu c thc hin các vin St rét - K sinh trùng - Côn trùng [8]. Do ó, vic ch ng ánh giá hiu qu ca các sn phm dit b gy, mui là ht sc cn thit, nhanh chóng tìm ra nhng sn phm có hiu qu tt và an toàn cho ngi s dng. Received: May, 31st, 2019 Accepted: July, 24th, 2019 *Corresponding Author Email: manhhodung@gmail.com JOU L OF SCIENCE OF LAC HONG UNIVERSITY JSLHU https://tapchikhdt.lhu.edu.vn Tp chí Khoa hc Lc Hng Tp chí Khoa hc Lc Hng58 H Dng Mnh, inh Ngc Xuân Hng, Lê Th Hng Hnh, Nguyn Th Thu Dng Vi nhng l do và tính cp thit ã nêu trên, chúng tôi tin hành tài nghiên cu “Xây dng quy trình nuôi mui Aedes aegypti trong phòng thí nghim và ánh giá kh nng dit b gy Aedes agypti ca tinh du s chanh, bch àn chanh”. 2. I TNG, VT LIU VÀ PHNG PHÁP 2.1 i tng nghiên cu Mui Aedes aegypti c thu thp ti Biên Hòa, ng Nai nh sau: thu thp b gy trong các chai l cha nc tù trong nhà. Nuôi b gy phát trin thành mui, cho ly trng. Trng mui c dùng thc hin xây dng quy trình nuôi mui Aedes aegypti trong iu kin phòng thí nghim. Mui c nh danh bi B môn K sinh trùng, Khoa Dc, i hc Lc Hng. Nguyên liu lá s chanh thu hái Qun 9, Thành ph H Chí Minh và lá bch àn chanh c thu hái Trung tâm Bo tn ngun gen cây thuc ng Tháp Mi, huyn Mc Hóa, tnh Long An vào tháng 12/2018. Mu c lu li Trung tâm Khoa hc và ng dng, i hc Lc Hng. 2.2 Vt liu nghiên cu Hoá cht và dng c nuôi mui: - Khay nha nuôi b gy có kích thc = 11 cm và chiu cao 8 cm, ng pipet dùng hút b gy, a petri, becher 100 mL, chai thy tinh 500 mL, ng ong 100 mL, giy lc, bng keo en, hp nha ng trng có np y, nhit k, m k. - Lng nuôi mui bng inox có kích thc 20 cm x 30 cm x 20 cm bên ngoài c bao ph bi lp vi tuyn -Thc n cho b gy là thc n cho mo whiskas (M) -Thc n cho mui là dung dch ng sucrose 10% Dng c chit xut tinh du: b chng ct tinh du Clevenger, Na2SO4 khan, màng lc Milipore 0.45m Thit b phân tích thành phn hoá hc ca tinh du: Máy sc kí khí- khi ph (Gas Chromatography/ Mass Spectrometry - GC/MS) vi máy GC Agilent 6890N, MSD 5973 inert, s dng ct HP5 – MS (30 m; 0,25 mm; 0,25 m film), khí mang là Helium. 2.3 Phng pháp nghiên cu Quy trnh nuôi mui Aedes aegypti Xây dng các quy trình nuôi mui Aedes aegypti trong iu kin phòng thí nghim, da vào các công trình ã c công b [8-10]: - Quy trình cho trng n - Quy trình nuôi b gy - Quy trình nuôi mui - Quy trình ly trng và bo qun trng mui. Chit xut tinh du Lá s, bch àn ti sau khi thu hái v, cân 150 gram lá cho vào bình cu 1000 ml vi 500 ml nc ct, tin hành chng ct trong 2h bng b chng ct tinh du Clevenger. Tinh du sau khi chng ct, c loi nc bng Na2SO4 khan, ri lc qua màng lc Milipore, sau ó c cho vào l kín có màu, bo qun trong ngn mát t lnh. Hàm lng tinh du c tính theo công thc: Hàm lng tinh du Th tích ml Khi lng g Xác nh thành phn hóa hc ca tinh du bng phng pháp sc ký khí – khi ph Tinh du sau khi chng ct c phân tích thành phn hoá hc bng h thng sc kí khí - khi ph (Gas Chromatography/ Mass Spectrometry - GC/MS) ti Vin Khoa hc Vt liu ng dng Thành ph H Chí Minh. Chng trình nhit o mu: 500C gi trong 2 phút, sau ó tng 20C/ phút n 800C, tng 50C/ phút n 1500C, tip tc tng 100C/ phút n 2000C, tng 200C/ phút n 3000C gi trong 5 phút. Mu tinh du (25 l) pha trong 1.0 ml n- hexan. Th tích bm mu là 1.0 l. S dng th vin ph NIST nhn bit các thành phn tinh du. ánh giá kh nng dit b gy ca các tinh du Da vào tài liu hng dn ca WHO (2005) [11], mi lô th nghim s dng 25 b gy tui 3 hoc 4 cha trong các cc 100ml, sâu nc trong cc khong 5-10 cm. Nng cho th nghim t 0-200 ppm. S b gy cht c quan sát sau 24 gi. Nu s lng b gy chuyn thành nhng sau 24 gi ln hn 2 con trong các cc, thì th nghim ó b loi b. Lp li 3 ln cho mi th nghim. Giá tr LC50, LC90 c xác nh bng phng pháp phân tích Probit analysis [12] s dng phn mm Microsoft Excel 2013. 3. KT QU VÀ BÀN LUN 3.1 Quy trình nuôi mui Hình 1 mô t chi tit quy trình nuôi mui trong phòng thí nghim, bao gm bn quy trình chính sau: Quy trnh cho trng n: Trng mui Aedes aegypti thu c t các lng nuôi mui (sau 2-3 ngày) s c cho n thành b gy. Trng s n nhanh trong nc có nng oxy thp. un nc cho n sôi ri cho ngay vào chai thy tinh 500mL, vn kín np và nc ngui n nhit phòng. Cho trng mui Aedes aegypti vào chai nc ã ngui, vn np kín, và yên trong khong 1-2 gi cho trng mui n thành b gy. Quy trnh nuôi b gy: Khi trng mui ã n thành b gy tui 1, ht b gy vào khay nuôi b gy. Mi khay khong 100 con vi mt 1 con/1 ml nc. Thc n b gy c cho tu theo giai on phát trin ca b gy. B gy tui 1-2 khong 30mg/khay, b gy tui 3 khong 80mg/khay, b gy tui 4 khong 160mg/khay. Thc hin thay nc sch hàng ngày cho b gy tui 3, 4 tránh làm ô nhim nc nuôi b gy. Quy trnh nuôi mui: T ngày th 6 tr i b gy s bt u lt xác thành nhng. Dùng pipet paster hút nhng vào cc nc sch. Giai on nhng phát trin không cn cho thc n. Nhng cái thng có kích thc ln hn nhng c. Cho nhng cc nhng vào các lng nuôi mui. Các lng mui t trong phòng có nhit 28±20C, m 70±10%. Sau khong 2 ngày t khi bt u giai on nhng, nhng s bt u lt xác thành mui. Thc n cho mui là dung dch ng sucrose 10% c thm t vào các ming bông trong các a petri c t trong lng nuôi mui. Quy trnh ly trng và bo qun trng Sau khi mui n và c cho n bng dung dch sucrose 10% trong 3 ngày, tin hành cho mui hút máu ngi tình nguyn, mui trng. S dng becher 100 mL c qun bng keo en bc kín quanh mt ngoài ca cc to ni thích hp cho mui trng. Ct giy lc thành ming hình ch nht dài qun tròn và t bên trong becher. khong 50 mL nc vào cc cha giy lc cho thm t u toàn b giy lc và t becher vào lng mui. cc nc trong lng mui và thay cc nc thu ly trng hng ngày. Sau khi ly giy lc trong cc nc, giy lc ni thoáng gió giy lc khô ráo. Tp chí Khoa hc Lc Hng 59 Xây dng quy trnh nuôi mui Aedes Agypti trong phòng thí nghim và ánh giá kh nng dit b gy Aedes Agypti ca tinh du s chanh 1. Cho trng n thành b gy 2. Cho b gy n 3. S phát trin b gy 4. B gy thành nhng 5. Nhng thành mui 6. Mui n ng 7. Chun b cc cho mui trng 8. Ly trng và bo qun Hình 1. Quy trnh nuôi mui trong phòng thí nghim Tp chí Khoa hc Lc Hng60 H Dng Mnh, inh Ngc Xuân Hng, Lê Th Hng Hnh, Nguyn Th Thu Dng Giy lc cha trng sau khi khô vào cc ng. Trên cc có ghi chú ngày tháng ly trng, và bo qun các cc trong hp nha y kín. 3.2 Hàm lng và thành phn hoá hc chính ca các tinh du Hàm lng tinh du s chanh (Cymbopogon citratus) và tinh du bch àn chanh (Eucalyptus citriodora) thu c bng phng pháp chng ct lôi cun hi nc theo khi lng lá ti ln lt là 0.33% và 2.13%. Bng 1 cho thy kt qu phân tích GC-MS ca tinh du s chanh (Cymbopogon citratus) có 7 thành phn chính vi tng hàm lng là 99.96%. Trong ó 2 thành phn có hàm lng ln nht là là cis-citral (36.19%) và trans-citral (49.32%). Kt qu này khá phù hp vi nghiên cu tinh du s chanh Cymbopogon citratus ca Hoàng Th Kim Vân, 2017 [13]. Nghiên cu này có kt qu vi thành phn chính là cis-citral (30.8%) và trans-citral (38.5%). Bng 1. Thành phn hoá hc chính ca tinh du ca Cymbopogon citratus STT Tên cht Thi gian lu (phút) Hàm lng (%) 1 -Myrcene 10.14 7.80 2 Isoneral 20.04 0.72 3 Isogeranial 20.90 0.93 4 cis-Citral 23.38 36.18 5 trans-Geraniol 23.92 4.10 6 trans-Citral 24.54 49.31 7 Geraniol acetate 28.20 0.92 Bng 2. Thành phn hoá hc chính ca tinh du bch àn chanh (Corymbia citriodora) STT Tên cht Thi gian lu (phút) Hàm lng (%) 1 Isopulegol 18.87 7.19 2 (R)-(+)-Citronellal 19.59 78.55 3 (R)-(+)--Citronellol 22.90 12.08 4 Citronellol acetate 27.25 1.72 Bng 2 ch kt qu phân tích GC-MS ca tinh du bch àn chanh (Eucalyptus citriodora). Có 4 thành phn chính trong tinh du bch àn chanh vi tng hàm lng là 99.54%. Tinh du cha các thành phn chính nh citronellal (78.55%), citronelol (12.08%), isopulegol (7.19%) và citronellol acetate (1.72%). Các thành phn hóa hc ca nghien cu này cho thy kt qu phù hp vi nghien cu ca Hanna, 2017 [14], tinh du bch ành chanh cng c phan tích bng ph GC-MS cho thy các thành phn chính có hm lung cao nht là citronellal (53.1%) và citronelol (13.7%), isopulegol (6.6%). 3.3 ánh giá kh nng dit b gy ca các tinh du Bng 3 cho thy t l phn trm b gy cht sau 24h vi mi tinh du các nng t 50-200ppm, vi nng 0 ppm i chng. nng ln hn 200ppm thì 100% b gy u cht sau 24h. Kt qu cho thy cùng nng thì tinh du bch àn chanh có kh nng dit b gy tt hn so vi s chanh. Bng 3. T l b gy cht sau 24h Nng (ppm) T l cht sau 24 h (%) Bch àn chanh S chanh (Trung bình ±SD) (Trung bình ±SD) 0 0 0 50 9.3±4.6 5.3±4.6 75 20.0±0 10.7±6.1 100 46.7±2.3 32.0±8.0 125 58.7±2.3 49.3±6.1 150 90.7±2.3 62.7±12.2 175 96.0±0 86.0±8.5 200 100.0±0 96.0±0 Bng 4 xác nh c nng gây cht trung bình LC50 = 117,9 ppm và LC90 = 196 ppm ca tinh du s chanh i vi b gy. Trong khi ó kh nng dit b gy ca tinh du bch àn chanh tt hn vi nng LC50 là 102.2 ppm và LC90 là 175.3ppm. Kt qu này khá phù hp vi nghiên cu ca Vera, 2014 [7], trong nghiên cu này LC50 ca tinh du s chanh và bch àn chanh có LC50 ln lt là 120ppm và 70ppm. Bng 4. Giá tr LC50, LC90 gia các thí nghim Tinh du LC50 LC90 (Trung bình ± SD) (Trung bình ± SD) S chanh 117.5 ± 11.8 196.0 ± 8.2 Bch àn chanh 102.2 ± 4.8 175.3 ± 2.6 ây là nghiên cu u tiên Vit nam xác nh nng gây cht ca tinh du s chanh và bch àn chanh i vi b gy theo tác gi c bit. tài này a ra vic xác nh nng tinh du gây cht i vi b gy, ngn chn phát trin thành mui. Dùng tinh du thiên nhiên không gây tn d, không gây c hi, cng nh tránh c nguy c kháng thuc thay vì dùng các hoá cht tng hp có tác dng không có li nh hin nay. Tinh du ngoài kh nng dit b gy, còn c bit n là các hp cht có tác dng xua mui rt tt. Trong tng lai chúng tôi s tip tc xây dng phng pháp th kh nng xua mui ca nhng tinh du này trên mui Aedes agypti c nuôi trong phòng thí nghim. 4. KT LUN Nghiên cu ã xây dng các quy trình nuôi mui Aedes aegypti trong phòng thí nghim bao gm các quy trình cho trng n, quy trình nuôi b gy, quy trình nuôi mui, quy trình ly và bo qun trng mui. Tinh du S chanh và Bch àn chanh ã c chit xut bng phng pháp lôi cun hi nc, t ó ánh giá c tim nng dit b gy Aedes agypti ca hai tinh du này nng thp. Trong tng lai chúng tôi có th ch ng nghiên cu c nhiu tinh du hn, có tim nng trong ng dng dit b gy, phòng chng s lan truyn ca bnh st xut huyt. 5. CM N Các tác gi xin chân thành cm n Trng i hc Lc Hng ã tài tr kinh phí cho nghiên cu này theo mã s tài LHU-RF-MP-18-01-12. Tp chí Khoa hc Lc Hng 61 Xây dng quy trnh nuôi mui Aedes Agypti trong phòng thí nghim và ánh giá kh nng dit b gy Aedes Agypti ca tinh du s chanh 6. TÀI LIU THAM KHO [1] Cameron, P.S.; Jeremy J.F., Nguyen V.V.C.; Bridget W. Dengue. New England Journal of Medicine, 2012, 366 (15), 1423-1432. [2] Cuong, H.; Vu, N.; Cazelles, B.; Boni, M.F.; Thai, K.; Rabaa, M.A; Anders, K.L. Spatiotemporal Dynamics of Dengue Epidemics, Southern Vietnam. Emerging Infectious Diseases, 2013, 19(6), 945-953. [3] Anders, K.L.; Nguyet, N.M.; Chau, N.V.; Hung, N. T.; Thuy, T.T. et al. Epidemiological factors associated with dengue shock syndrome and mortality in hospitalized dengue patients in Ho Chi Minh City, Vietnam. Am J Trop Med Hyg. 2011, 84: 127-134. [4] Duong, T.T., Van, D.N. Mapping Insecticide Resistance in Dengue Vectors in the Northern Viet Nam, 2010-2013. Vector Biol J. 2016, 1(1):1-6. [5] Huong, V.D.; Nguyen, T.B.N.; Thi, H.D.; Thi B.L. N. Susceptibility of Aedes aegypti to insecticides in Viet Nam. Dengue Bull. 2014, 28:179-183. [6] Kawada, H.; Higa, Y.; Nguyen, Y.T.; Tran, S.H.; Nguyen, H.T.; Takagi, M. Nationwide investigation of the pyrethroid susceptibility of mosquito larvae collected from used tires in Vietnam. PLoS Negl Trop Dis. 2009, 3(3):1-8. [7] Vera, S.S.; Zambrano, D.F.; Méndez-Sanchez, S.C.; Rodríguez-Sanabria, F.; Stashenko, E.E.; Duque Luna, J.E. Essential oils with insecticidal activity against larvae of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae). Parasitol Res. 2014, 113(7):2647- 2654. [8] Le, T.D.; Hunh, K.T.H. "Xây dng quy trình k thut nuôi và bo qun mui phòng thí nghim", Nghiên cu Y hc. 2013, tp 17 (ph bn s 1), 240-245. [9] Elizabeth, K.; Anne, P.; Mary, A. F.; Michael, A. S.; Eva, H.; Laura, D.K. Rearing of Culex spp. and Aedes spp. Mosquitoes. Bio-protocol. 2017, 7 (17), e2542. [10]Danilo, O. C.; Derric, N.; Neil, N.; Andrew, R. M.; Pam, G.; André, B. B. W.; Mauro, T. M.; Jair, F. V.; Luke, A.; Margareth, L. C. Mass Production of Genetically Modified Aedes aegypti for Field Releases in Brazil. JoVE. 2014, 83, e3579. [11] WHO (2005) Guidelines for laboratory and field testing of mosquito larvicides. WHO/CDS/WHOPES/GCDPP/2005.13. [12]Finney, J.D. Probit analysis, 3rd ed.; Cambridge University Press: Cambridge, 1971. [13]Hoàng ,T.K.V.; Hoàng, T.L.; Trn, T. H.; Nguyn, M. Q.; Quách, T.T.V.; Nguyn, T. H.; Nguyn, T. .; Nguyn, H. V. Nghiên cu thành phn hóa hc và kho sát hot tính sinh hc ca tinh du s chanh Cymbopogon citratus. 2017. Tp chí phân tích Hóa, L và Sinh hc - Tp 22/ s 1. [14]Hanaa, S. H.; Ahmed, M. S. Repellent, attractive, and insecticidal effects of essential oils from Schinus terebinthifolius fruits and Corymbia citriodora leaves on two whitefly species, Bemisia tabaci, andmTrialeurodes ricini", Scientia Horticulturae. 2017, 216, 111-119.

Các file đính kèm theo tài liệu này:

  • pdf11_6304_2221418.pdf
Tài liệu liên quan