Phương thức lây truyền của ký sinh trùng Perkinsus olseni (LESTER & DAVIS, 1981) và thử nghiệm trị bệnh trong điều kiện thí nghiệm

KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 90 PHJNG THC LÂY TRUYN C<A KÝ SINH TRÙNG Perkinsus olseni (LESTER & DAVIS, 1981) VÀ TH) NGHI*M TRT B*NH TRONG IU KI*N THÍ NGHI*M Phm Qu.c Hùng1, Ngơ Th Ng2c Th"y2, Nguyn Th H@ng Nhung1 TĨM TT Ký sinh trùng $n bào Perkinsus olseni là m)t tác nhân gây ch<t hàng lot và nghiêm tr2ng cho nhi u lồi $)ng v;t thân m m hai m6nh v ti nhi u qu.c gia trên th< gi#i. Vi8c tìm ra các phng thbc lây truy n crng nh bi8n pháp phịng ngXa và $i u tr là c^n thi<t $3 gi6m thi3u thi8t hi do chúng gây ra. Nghiên cbu này $ã ti<n hành $ánh giá kh6 nng lây truy n P. olseni gi?a các lồi $)ng v;t thân m m hai m6nh v và kh6 nng $i u tr ký sinh trùng P. olseni bwng Desferrioxamine (m)t loi thu.c dùng ch?a ng) $)c m t). K<t qu6 các thí nghi8m $ã cho th5y P. olseni cĩ th3 lây truy n gi?a các cá th3 cùng lồi (nghêu B<n Tre — Meretrix lyrata) và các cá th3 khác lồi (nghêu B<n Tre sang sị huy<t - Anadara granosa và hàu cLa sơng - Crassostrea rivularis). Desferrioxamine C li u l%ng 15 và 30 mg/L b#c $^u cho th5y cĩ kh6 nng làm gi6m cUng $) nhim P. olseni C nghêu B<n Tre. TX khĩa: Desferrioxamine, lây truy n, nghêu B<n Tre, Perkinsus olseni. 1. T VN  4 Nuơi thng phmm $)ng v;t thân m m C Vi8t Nam $ang tXng b#c mC r)ng v di8n tích crng nh quy mơ. Tuy nhiên, cùng v#i sF phát tri3n c"a ngh nuơi, dch b8nh trên $.i t%ng này crng xu5t hi8n và bùng phát mnh hn. Hi8n t%ng $)ng v;t hai m6nh v nĩi chung và nghêu nĩi riêng liên tKc ch<t hàng lot trên di8n r)ng ti nhi u $a phng nhng cha rõ nguyên nhân $ang trC thành v5n $ quan tâm c"a ngUi nuơi, nhà khoa h2c và nhà qu6n lý. Hi8n cĩ nhi u nguyên nhân $%c cho là $ã gây ra dch b8nh trên nghêu B<n Tre (Meretrix lyrata), trong $ĩ cĩ ký sinh trùng $n bào thu)c gi.ng Perkinsus. M)t s. cơng trình nghiên cbu ti các n#c cĩ ngh nuơi $)ng v;t hai m6nh v phát tri3n cho th5y sinh trCng ch;m, mC v và ch<t hàng lot c"a nghêu (Ruditapes philippinarum) và hàu (Crassostrea virginica) là nh?ng d5u hi8u $i3n hình cho vi8c nhim ký sinh trùng Perkinsus C các qu^n th3 này (Mackin & Hopkins, 1962; Park & Choi, 2001). B8nh ký sinh trùng Perkinosis cĩ th3 $%c phát hi8n dFa vào các phng pháp nh: nuơi ký sinh trùng theo phng pháp c"a Ray (1952) trong mơi trUng Fluid Thioglycollate Medium (FTM), mơ b8nh h2c, kính hi3n vi $i8n tL hay phng pháp sinh h2c phân tL 1 Viện Nuơi trồng thủy sản, Trường Đại học Nha Trang 2 Viện Nghiên cứu Nuơi trồng thủy sản II polymeraza Chain Reaction, ph6n bng chuŠi trùng h%p (PCR) (OIE, 2012). M)t s. thL nghi8m in vitro và in vivo $ã $%c thFc hi8n $3 ki3m tra hi8u qu6 c"a li8u pháp sL dKng hĩa ch5t $3 $i u tr b8nh do Perkinsus gây ra (Elandalloussi et al., 2003). M)t s. ch5t nh Cycloheximide và Desferrioxamine cho th5y cĩ hi8u qu6 trong vi8c hn ch< sF c6m nhim Perkinsus C hàu và khơng cĩ tác hi cho v;t ch" mBc dù khơng th3 tiêu di8t hồn tồn Perkinsus. Các thL nghi8m v#i clo (Casas et al., 2002), N-halamine (Delaney et al., 2003), n#c ng2t (Casas et al., 2002; La Peyre et al., 2003) và màng l2c k<t h%p v#i chi<u x bwng tia UV (Ford et al., 2001) $%c chbng minh cĩ th3 di8t các t< bào tF do c"a Perkinsus. – Vi8t Nam, các nghiên cbu v b8nh trên nghêu, $Bc bi8t là b8nh do Perkinsus olseni cịn hn ch<. H^u h<t các k<t qu6 nghiên cbu m#i dXng li C mbc $) mơ t6 sF hi8n di8n c"a ký sinh trùng và $ánh giá mbc $) nhim c"a chúng trên các $.i t%ng $)ng v;t thân m m (nghêu B<n Tre, hàu, tu hài, trai ng2c). Nh?ng nghiên cbu v kh6 nng lây truy n c"a P. olseni và tr b8nh P. olseni bwng Desferrioxamine (DFO) h^u nh cha $%c nh c $<n. 2. V!T LI#U VÀ PHNG PHÁP NGHIÊN CU 2.1. V;t li8u nghiên cbu Các nhĩm $)ng v;t hai m6nh v dùng trong thí nghi8m $ã $%c thu tX nhi u $a $i3m khác nhau. Nghêu (Meretrix lyrata), sị huy<t (Anadara KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 91 granosa) và hàu cLa sơng (Crassostrea rivularis) sch b8nh $%c thu tX nh?ng vùng nuơi khơng b b8nh Perkinosis ti Bc Liêu. Nhĩm nghêu b8nh $%c thu tX huy8n C^n GiU, thành ph. H@ Chí Minh ni nghêu $%c báo cáo cĩ tP l8 nhim Perkinsus cao. o kích th#c và cân kh.i l%ng tXng cá th3 tr#c khi thFc hi8n thí nghi8m bwng th#c k‰p Caliper $) chính xác 0,1 mm và cân phân tích Sartorius CP224S $) chính xác 0,1 mg. Các nhĩm cá th3 khác nhau $%c v;n chuy3n $)c l;p v phịng thí nghi8m và $%c nuơi thu^n d‚ng riêng bi8t trong 3 - 4 ngày tr#c khi thí nghi8m. Sau thUi gian thu^n d‚ng, 20% s. l%ng cá th3 c"a mŠi nhĩm $%c thu $3 phân tích tP l8 và cUng $) nhim ký sinh trùng P. olseni theo phng pháp c"a Ray (1952) (nuơi c5y trong mơi trUng FTM). Qu^n th3 sch b8nh $t yêu c^u $3 thí nghi8m khi cĩ cUng $) nhim P. olseni là 0 bào tL/cá th3 và tP l8 nhim là 0%. Ng%c li, qu^n th3 nghêu b8nh $%c sL dKng làm ngu@n gây nhim khi cĩ tP l8 nhim là 100% và cUng $) nhim trung bình l#n hn 1.000 bào tL/cá th3. Các cá th3 thí nghi8m $%c cho n hŠn h%p t6o Nannochloropsis oculata và Isochrysis galbana v#i tP l8 1 : 1 v th3 tích. T^n su5t cho n là 2 — 3 l^n/ngày v#i m;t $) t6o là 7 — 10.105 t< bào/mL. 2.2. Phng pháp nghiên cbu 2.2.1. B. trí thí nghi8m Phng thbc lây truy n c"a Perkinsus olseni. MUi cá th3 tX mŠi nhĩm nghêu, sị huy<t và hàu cLa sơng khơng nhim b8nh $%c lFa ch2n ng9u nhiên và $%c $ánh d5u tr#c khi $%c b. trí vào b3 (kích th#c 30 x 20 x 25 cm) chba 10 L n#c bi3n ($) mBn 25‰) và 5 cá th3 nghêu nhim Perkinsus (cUng $) nhim trung bình là 1403 ± 642 bào tL/cá th3). MŠi nghi8m thbc $%c lBp li 3 l^n. Kh.i l%ng và chi u dài tXng cá th3 thí nghi8m $%c cân $o tr#c khi thí nghi8m b t $^u, khi thu m9u và khi thí nghi8m k<t thúc. Các cá th3 xu5t hi8n d5u hi8u c"a b8nh Perkinosis $%c thu m9u hwng ngày $3 phân tích cUng $) nhim và tP l8 nhim P. olseni. i u tr Perkinsus olseni bwng DFO. Nghiên cbu $%c ti<n hành v#i 3 nghi8m thbc thí nghi8m tng bng v#i 3 mbc n@ng $) DFO là 10, 15, 30 mg/L và nghi8m thbc $.i chbng. Nghêu nhim P. olseni v#i cUng $) nhim trung bình là 1.660 ± 593,8 bào tL/cá th3 $%c b. trí ng9u nhiên 20 cá th3/thùng x.p (th3 tích n#c là 10 L/thùng, kích th#c 30 x 25 x 25 cm) C nhi8t $) là 28 - 300°C, $) mBn 25‰. MŠi nghi8m thbc $%c lBp li 3 l^n. MŠi $n v thí nghi8m $%c b. trí 20 cá th3 nghêu. Cá th3 nghêu ch<t tX mŠi $n v thí nghi8m $%c thu $3 ki3m tra P. olseni, k<t thúc thí nghi8m sau 6 ngày $i u tr, thu tồn b) nghêu cịn li $3 phân tích cUng $) nhim P. olseni $3 $ánh giá hi8u qu6 tr b8nh. 2.2.2. Theo dõi các y<u t. mơi trUng Các y<u t. mơi trUng g@m nhi8t $), pH $%c theo dõi vào 7 — 8 h và 14 — 15 h hwng ngày. Trong $ĩ, nhi8t $) $%c $o bwng nhi8t k< v#i $) chính xác 10°C, pH $%c $o bwng máy $o pH Consort - C3010, $) mBn (‰) sL dKng tP tr2ng k< v#i $) chính xác 1‰ $3 $o tr#c khi c5p n#c vào b3 tr#c khi ti<n hành thí nghi8m và khi thay n#c (n#c $%c thay hàng ngày 20 — 100% tùy thu)c vào $i u ki8n mơi trUng nuơi). 2.2.3. phân tích m9u Phng pháp nuơi phân l;p ki3m tra cUng $) nhim Perkinsus olseni. Phng pháp nuơi Perkinsus bwng mơi trUng FTM sL dKng tồn thân nghêu $%c áp dKng $3 ki3m tra cUng $) nhim P. olseni. Kh.i mơ c"a mŠi cá th3 $%c nuơi c5y bwng cách c t nh và " trong các .ng falcon chba 20 ml mơi trUng FTM cĩ bp sung cloramphenicol (200 µg/mL) và Nystatin (200 IU/mL). M9u $%c " C nhi8t $) phịng, trong bĩng t.i và y<m khí trong 7 ngày. Sau thUi gian ", các .ng $%c ly tâm C t.c $) 3.000 vịng/phút trong 10 phút nhwm loi b mơi trUng FTM. 3 tách bào tL ngh/ khi tp chbc mơ c"a nghêu, ph^n tht nghêu sau ly tâm $%c phân h"y bwng NaOH 2 M C 60oC. Quá trình $%c thFc hi8n vài l^n cho $<n khi ph^n c $%c tiêu h"y hồn tồn. Các bào tL $%c $<m s. l%ng $3 tính cUng $) nhim bwng kính hi3n vi quang h2c. 2.2.4. Phng pháp tính s. li8u TP l8 nhim (TLN) là ph^n trm s. cá th3 nhim Perkinsus so v#i s. cá th3 ki3m tra. CUng $) nhim (bào tL/cá th3) là s. l%ng bào tL Perkinsus olseni trên m)t cá th3 ki3m tra. 3. KT QU VÀ THO LU!N 3.1. Phng thbc lây truy n c"a Perkinsus olseni KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 92 Hình 1. TP l8 ch<t c)ng d@n c"a các lồi v;t ch" trong thí nghi8m phng thbc lây truy n Sị huy<t, nghêu và hàu cLa sơng khi nuơi cùng v#i nghêu nhim Perkinsus $ u cho th5y cĩ sF lây nhim chéo và gây ch<t v#i tP l8 ch<t tích lry c"a các nhĩm $)ng v;t thân m m trong các nghi8m thbc thí nghi8m $%c th3 hi8n qua hình 1. Sị huy<t trong thí nghi8m nuơi chung v#i nghêu b nhim ký sinh trùng Perkinsus cĩ tP l8 ch<t tích lry $t 100% ch/ sau 12 ngày thí nghi8m. TP l8 sị ch<t cao $%c ghi nh;n tX ngày thb 2 c"a thí nghi8m c6m nhim. TP l8 ch<t tích lry C nghêu và hàu cLa sơng khá th5p so v#i sị huy<t C 4 ngày $^u c6m nhim nhng crng $t 100% sau l^n l%t 16 ngày và 20 ngày nuơi. B6ng 1 th3 hi8n cUng $) nhim và tP l8 nhim khi nuơi chung nghêu $ã nhim ký sinh trùng cùng v#i nghêu, sị huy<t, hàu cLa sơng khơng b nhim ký sinh trùng Perkinsus. B6ng 1. TP l8 nhim và cUng $) nhim Perkinsus Ghi chú: S. li8u din gi6i giá tr trung bình ± sai s. chumn, X — thí nghi8m $ã k<t thúc K<t qu6 nghiên cbu cho th5y, P. olseni cĩ th3 lây truy n b8nh cho các v;t ch" khơng b b8nh trong cùng m)t lồi hoBc khác lồi. – nghi8m thbc nghêu, sau thUi gian thí nghi8m 16 ngày, nghêu cĩ cUng $) nhim trong kho6ng 0 - 1.300 bào tL/cá th3, cUng $) nhim và tP l8 nhim tng theo thUi gian thí nghi8m. – thí nghi8m v#i hàu cLa sơng và sị huy<t, cUng $) nhim l^n l%t là 0 - 475 bào tL/cá th3 và 0 - 367 bào tL/cá th3 sau 20 và 12 ngày ti<n hành thí nghi8m. K<t qu6 thí nghi8m này crng tng $@ng v#i các nghiên cbu tr#c $ây. Kh6 nng lây truy n P. olseni x6y ra thơng qua ti<p xúc trFc ti<p gi?a cá th3 khe mnh (v;t ch") v#i n#c cĩ chba các t< bào ký sinh trùng phát tán tX các cá th3 b nhim b8nh (Patricia et al., 2016). Quá trình nhim b8nh $%c cho là x6y ra thơng qua ít nh5t hai c ch<: m)t là thơng qua con $Ung tiêu hĩa (Tasumi & Vasta, 2007); hai là C l#p v khi thbc n b viên và nén v#i ch5t nh^y ti vùng xúc tu và th6i ra khi c th3 gi.ng nh “phân gi6” (Allam et al., 2013). Quá trình phân h"y xác ch<t c"a $)ng v;t thân m m $ã nhim Perkinsus và nh?ng $)ng v;t thân m m b nhim nhng cịn s.ng phĩng thích s. l%ng nh ký sinh trùng này thơng qua phân c"a chúng. P. olseni phân l;p tX bào ng Haliotis laevigata cĩ th3 lây truy n cho $)ng v;t hai m6nh v khác và ng%c li (Goggin et al., 1989). Ký sinh trùng P. marinus cĩ th3 lây truy n tX hàu b nhim b8nh sang hàu khơng b nhim b8nh khi nuơi cùng v#i nhau (Ray, 1954). Vì kh6 nng lây truy n P. olseni $.i v#i các cá th3 cùng lồi và khác lồi nên khi phát hi8n th5y $)ng v;t hai m6nh v b nhim P. olseni thì khơng nên di chuy3n $<n ni khác, nhwm tránh lây lan dch b8nh gây ch<t trên di8n r)ng và gây thi8t hi kinh t< cho ngUi nuơi. 3.2. ThL nghi8m tr b8nh Perkinsus olseni bwng DFO K<t qu6 tr b8nh cho th5y cUng $) nhim P. olseni cĩ xu h#ng gi6m d^n qua 6 ngày thí nghi8m. Khơng cĩ sF sai khác cĩ ý ngh’a th.ng kê gi?a các li u DFO 10 mg/L, 15 mg/L và 30 mg/L. Tuy nhiên, khi ki3m tra theo tXng nghi8m thbc qua các ngày $i u tr, nh;n th5y cĩ sF sai khác gi?a ngày $^u và ngày cu.i C hai nghi8m thbc cĩ li u DFO cao hn là 15 mg/L và 30 mg/L. i u này chbng t, DFO cĩ kh6 nng làm gi6m s. l%ng bào tL P. olseni trên nghêu. CUng $) nhim (bào tL/cá th3) Nghi8m thbc TP l8 nhim (%) Ngày 6 Ngày 12 Ngày 16 Ngày 20 Nghêu 80 ± 20 0 ± 0 567 ± 385,8 725 ± 376,7 X Hàu 80 ± 0 0 ± 0 283 ± 23,6 375 ± 25,0 405 ± 40,0 Sị huy<t 40 ± 10 0 ± 0 225 ± 35,3 X X KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 93 B6ng 2. CUng $) nhim Perkinsus olseni khi $i u tr bwng Desferrioxamine CUng $) nhim (bào tL/cá th3) ThUi gian $i u tr (ngày) 10 mg/L 15 mg/L 30 mg/L .i chbng 1 1.688 ± 128 2.033 ± 51 2.031 ± 34 1.613 ± 220 2 1.858 ± 139 1.800 ± 95 1.653 ± 114 1.687 ± 150 3 1.713 ± 97 1.612 ± 91 1.840 ± 63 1.760 ± 126 4 1.379 ± 150 1.677 ± 78 1.840 ± 129 1.627 ± 282 5 1.475 ± 62 1.400 ± 65 1.550 ± 318 1.693 ± 165 6 1.519 ± 110 1.483 ± 46 1.325 ± 86 1.762 ± 199 Ghi chú: S. li8u din gi6i giá tr trung bình ± sai s. chumn Tuy thUi gian $i u tr trong thí nghi8m ng n (6 ngày) nhng b#c $^u crng $ã cho th5y $%c hi8u qu6 c"a DFO trong vi8c làm gi6m s. l%ng P. olseni trên nghêu. M)t hn ch< c"a thí nghi8m này là sF khác bi8t trong mbc $) c6m nhim P. olseni tF nhiên C nghêu nên $ã gây nên nh?ng khĩ khn $3 $ánh giá hi8u qu6 c"a vi8c $i u tr bwng thu.c. Desferrioxamine (DFO) là thu.c $%c dùng $3 $i u tr ng) $)c s t và thXa s t mãn tính. DFO to thành các phbc h%p ch" y<u v#i các ion s t hĩa tr ba. Do $Bc tính Chelate hĩa (Chelate - phbc ch5t vịng gi?a các h%p ch5t h?u c d9n xu5t tX amino polycacboxylic axit v#i các ion kim loi), DFO cĩ kh6 nng thu nh;n s t tF do trong huy<t tng hoBc trong t< bào, tX $ĩ to thành phbc h%p Ferrioxamine (FO). Gauthier & Vasta (1994) cho bi<t DFO C n@ng $) cao làm gi6m $áng k3 sF phát tri3n ký sinh trùng vì Transferrin (m)t Chelate s t tF nhiên) $ã d9n $<n sF bc ch< tng trCng P. marinus. DFO crng $%c chbng minh cĩ hi8u qu6 $.i v#i P. olseni khi thí nghi8m trên nghêu Ruditapes decussatus mà khơng gây 6nh hCng $<n sbc khe nghêu v#i IC50 (n@ng $) bc ch< 50%) là 14 ± 0,7 µg/mL (Elandalloussi et al., 2005). Vì các ch5t h5p thK s t - DFO v#i kh6 nng to phbc h%p khác bi8t, cĩ th3 bc ch< P. olseni gia tng trong .ng nghi8m. – m)t li u l%ng nh5t $nh, DFO $ã hn ch< tng trCng và loi b các ch5t h5p thK s t cho th5y $) nhy c6m cao c"a P. olseni khi thi<u hKt các ch5t h5p thK s t gây ra (Elandalloussi et al., 2003). Smolowitz (2013) cho bi<t, s t cĩ C c6 hai mBt là tác $)ng thúc $my hoBc bc ch< sF phát tri3n ký sinh trùng thơng qua c ch< phát tán hoBc phân gi6i s t trong t< bào máu. Ký sinh trùng c^n m)t l%ng s t hịa tan nh5t $nh trong c th3 v;t ch" $3 phát tri3n. SF tích lry s t d thXa trong hàu Crassostrea virginica $ã thúc $my ký sinh trùng sinh trCng và phát tri3n. P. marinus cĩ th3 tránh $%c oxy hĩa gây 6nh hCng $<n t< bào c"a nĩ bwng cách sL dKng s t c"a v;t ch" cho superoxit và to thành g.c hydroxyl (Gauthier & Vasta, 1994). DFO C li u l%ng 15 và 30 mg/L cĩ hi8u qu6 trong vi8c làm gi6m cUng $) nhim P. olseni nghêu trong $i u ki8n thí nghi8m, nhng v9n c^n ti<p tKc nghiên cbu C các li u l%ng khác. 4. KT LU!N VÀ KIN NGH( Perkinsus olseni cĩ kh6 nng lây truy n tX cá th3 cùng lồi (nghêu sang nghêu) và khác lồi (nghêu sang sị huy<t, hàu cLa sơng). Vi8c sL dKng DFO C li u 15 và 30 mg/L cĩ th3 làm gi6m $%c cUng $) nhim P. olseni trên nghêu. Tuy nhiên, c^n ti<p tKc các nghiên cbu C các li u DFO và các loi thu.c kháng ký sinh trùng khác n?a nhwm $ánh giá $^y $" hn kh6 nng tiêu di8t ký sinh trùng P. olseni trên nghêu và m)t s. $)ng v;t hai m6nh v khác. TÀI LI#U THAM KHO 1. Allam, B., Carden, W. E., Evan, W. J., Gina, R. & Sarah, W., 2013. Early host-pathogen interactions in marine bivalves: Evidence that the alveolate parasite Perkinsus marinus infects through the oyster mantle during rejection of pseudofeces. Journal of Invertebrate Pathology, 113, 26-34. 2. Casas, S. M., Antonio, V. & Reece, K. S., 2002. Study of perkinsosis in the carpet shell clam Tapes decussatus in Galicia (NW Spain). I. Identification of the aetiological agent and in vitro modulation of zoosporulation by temperature and salinity. Diseases of aquatic organisms, 50, 51-65. 3. Elandalloussi, L. M., Afonso, R., Nunes, P. A. & Cancela, M. L., 2003. Effect of desferrioxamine and 2,2'-bipyridyl on the proliferation of Perkinsus atlanticus. Biomol. Eng., 20(4-6), 349-354. KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 94 4. Elandalloussi, L. M., Leite, R. B., Rodrigues, P. M., Afonso, R., Nunes, P. A. & Cancela, M. L., 2005a. Effect of antiprotozoal drugs on the proliferation of the bivalve parasite Perkinsus olseni. Aquaculture, 243(1-4), 9-17. 5. Ford, S. E., Zhe, Xu & Debrosse, G., 2001. Use of particle filtration and UV irradiation to prevent infection by Haplosporidium nelsoni (MSX) and Perkinsus marinus (Dermo) in hatchery-reared larval and juvenile oysters. Aquaculture, 194, 37-49. 6. Gauthier, J. D. & Vasta, G. R., 1994. Inhibition of in vitro replication of the oyster parasite Perkinsus marinus by the natural iron chelators transferrin, lactoferrin, and desferrioxamine. Dev. Comp. Immunol. 18(4), 277-286. 7. Goggin, C. L., Sewell, K. B. & Lester, R. J. G., 1989. Cross-infection experiments with Australian Perkinsus species. Diseases of Aquatic Organisms, 7, 55-59. 8. La Peyre, M. K., Nickens, A. D., Volety, A. K., Tolley, G. S. & La Peyer, J. F., 2003. Environmental significance of freshets in reducing Perkinsus marinus infection in eastern oysters Crassostrea virginica: potential management applications. Marine Ecology Progress Series 248, 165-176. 9. Mackin, J. G. & Hopkins, S. H., 1962. Studies on oyster mortality in relation to natural environments and to oil fields in Louisiana. University of Texas Institute of Marine Science. 10. OIE, 2012. Manual of Diagnostic Tests for Aquatic Animals. 11. Park, K. I. & Choi, K. S., 2001. Spatial distribution of the protozoan parasite Perkinsus sp. found in the Manila clams, Ruditapes philippinarum, in Korea. Aquaculture, 203, 9-22. 12. Patricia, da S. M., Carolina, P. C., Jaíse, de A. P. B., Fernando, R. Q. & Alexandre, A. W., 2016. Epizootiology of Perkinsus sp. in Crassostrea gasar oysters in polyculture with shrimps in northeastern Brazil. Brazilian Journal of Veterinary Parasitology, 25, 37-45. 13. Ray, S. M., 1952. A culture technique for the diagnosis of infections with Dermocystidium marinum, Mackin, Owen and Collier, in oysters. Science, 116, 360-361. 14. Ray, S. M., 1954. Biological studies of Dermocystidium marinus, a fungus parasite of oysters. Rice University, Houston, TX. 15. Smolowitz, R., 2013. A Review of Current State of Knowledge Concerning Perkinsus marinus. Effects on Crassostrea virginica (Gmelin) (the Eastern Oyster). Veterinary Pathology, 50(3), 404- 411. 16. Tasumi, S. & Vasta, G. R., 2007. A galectin of unique domain organization from hemocytes of the eastern oyster (Crassostrea virginica) is a receptor for the protistan parasite Perkinsus marinus. J. Immunol, 179, 3086-3098. TRANSMISSION OF Perkinsus olseni AND TREATMENT IN LABORATORY CONDITIONS Pham Quoc Hung, Ngo Thi Ngoc Thuy, Nguyen Thi Hong Nhung Summary The protozoan parasite Perkinsus olseni is a pathogen causing mass and severe mortalities in bivalve mollusc species in many countries in the world. In order to reduce the loss caused by this pathogen, it is vital to determine the preventive and therapeutic measures. The current study investigated the transmission of P. olseni among bivalve species and therapeutic efficiency of deferoxamine against perkinsus infection. The result indicated that P. olseni can be transmitted directly between individuals of Ben Tre clams and from infected Meretrix lyrata to cockle Anadara granosa and estuarine oyster Crassostrea rivularis. Using deferoxamine at doses of 15 and 30 mg/L was shown to reduce intensity of P. olseni infection. Keywords: Ben Tre clam, Deferoxamine, Perkinsus olseni, transmission. NgUi ph6n bi8n: TS. Võ Th< Drng Ngày nh;n bài: 26/5/2017 Ngày thơng qua ph6n bi8n: 29/6/2017 Ngày duy8t $ng: 6/7/2017