Luận văn Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa và tác dụng theo hướng tăng cường miễn dịch thực nghiệm của một số loài nấm dược liệu

MỤC LỤC Trang MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1 - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Giới thiệu về nấm Linh chi Ganoderma lucidum .......................................... 1 1.1.1. Giới thiệu tổng quát ............................................................................... 1 1.1.2. Những nghiên cứu về nấm Linh chi....................................................... 3 1.2. Giới thiệu về nấm Vân chi Trametes versicolor ............................................ 8 1.2.1. Giới thiệu tổng quát ............................................................................... 8 1.2.2. Những nghiên cứu về nấm Vân chi ..................................................... 10 1.3. Khái niệm về gốc tự do và các bệnh lý liên quan......................................... 14 1.3.1. Gốc tự do và stress oxy hóa ................................................................. 14 1.3.2. Các bệnh lý liên quan đến gốc tự do.................................................... 15 1.3.3. Các phương pháp xác định tác dụng chống oxy hóa ........................... 17 1.4. Độc tính của cyclophosphamid .................................................................... 18 1.5. Tóm tắt một số nghiên cứu liên quan đến đề tài........................................... 20 1.5.1. Trong nước ........................................................................................... 20 1.5.2 Ngoài nước ........................................................................................... 21 CHƯƠNG 2 - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Nguyên liệu và đối tượng nghiên cứu .......................................................... 23 2.1.1. Nguyên liệu nghiên cứu ....................................................................... 23 2.1.2. Động vật nghiên cứu ............................................................................ 24 2.1.3. Hóa chất ............................................................................................... 24 2.1.4. Máy móc-Thiết bị ................................................................................ 25 2.2. Khảo sát thực vật .......................................................................................... 25 2.2.1. Khảo sát hình thái bên ngoài................................................................ 25 2.2.2. Khảo sát vi học.................................................................................... 25 2.3. Thử tinh khiết ............................................................................................... 26 2.3.1. Xác định độ mất khối lượng do làm khô ............................................. 26 2.3.2. Độ tro ................................................................................................... 26 2.4. Phân tích sơ bộ thành phần hóa thực vật ...................................................... 28 2.4.1. Nguyên tắc ........................................................................................... 28 2.4.2. Chiết xuất ............................................................................................. 28 2.4.3. Định tính bằng phản ứng hóa học ........................................................ 29 2.5. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro................................................... 31 2.5.1. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro bằng thử nghiệm DPPH (test DPPH) ...................................................................................................................... 31 2.5.2. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro bằng thử nghiệm malonyl dialdehyd (MDA)........................................................................................... 32 2.5.3. Tính kết quả ......................................................................................... 33 2.6. Nghiên cứu in vivo........................................................................................ 33 2.6.1. Gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophophamid.................................. 33 2.6.2. Khảo sát trọng lượng cơ thể trên chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid.................................................................. 34 2.6.3. Khảo sát huyết học trên chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid ............................................................................................ 35 2.6.4. Khảo sát trọng lượng tương đối của các cơ quan trên chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid ....................................... 35 2.6.5. Khảo sát hàm lượng malonyl dialdehyd (MDA) trong gan sau khi gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid .................................................. 35 2.6.6. Khảo sát tác dụng bảo vệ gan theo hướng chống gốc tự do qua việc định lượng malonyl dialdehyd (MDA) trong gan.......................................... 36 2.6.7. Tính kết quả ......................................................................................... 36 2.7. Đánh giá kết quả ..................................................................................... 36 CHƯƠNG 3 - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Khảo sát thực vật ........................................................................................... 37 3.1.1. Khảo sát hình thái bên ngoài................................................................ 37 3.1.2. Khảo sát vi học.................................................................................... 38 3.2. Thử tinh khiết ............................................................................................... 42 3.2.1. Độ ẩm................................................................................................... 42 3.2.2. Độ tro ................................................................................................... 43 3.3. Kết quả phân tích thành phần hóa học.......................................................... 44 3.4. Kết quả nghiên cứu in vitro .......................................................................... 48 3.4.1. Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro bằng thử nghiệm DPPH ............................................................................................................. 48 3.4.2. Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro bằng thử nghiệm MDA ................................................................................................ 53 3.5. Kết quả nghiên cứu in vivo ........................................................................... 59 3.5.1. Kết quả khảo sát trọng lượng cơ thể trên chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid......................................................... 59 3.5.2. Kết quả khảo sát huyết học trên chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid ............................................................................ 62 3.5.3. Kết quả khảo sát trọng lượng nội quan trên chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid......................................................... 67 3.5.4. Kết quả khảo sát hàm lượng malonyl dialdehyd (MDA) trong gan sau khi gây suy giảm miễn dịch bằng cyclophosphamid. .................................... 72 3.5.5. Kết quả khảo sát tác dụng bảo vệ gan theo hướng chống gốc tự do qua việc định lượng malonyl dialdehyd (MDA) trong gan .................................. 73 CHƯƠNG 4 - KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1. Kết luận ....................................................................................................................80 4.2. Đề nghị .....................................................................................................................81 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1 Xử lý thống kê của phép kiểm One – way ANOVA của hàm lượng MDA trong gan của nhóm chuột bình thường PHỤ LỤC 1 Xử lý thống kê của phép kiểm One – way ANOVA của hàm lượng MDA trong gan của nhóm chuột gây suy giảm miễn dịch.