Luận văn Ảnh hưởng của các loài tảo khác nhau nannochloropsis sp., chaetoceros sp., isochrysis sp. đến sự sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Sương crassostrea gigas (thunberg, 1793)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA NUƠI TRỒNG THỦY SẢN ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC LỒI TẢO KHÁC NHAU Nannochloropsis sp., Chaetoceros sp., Isochrysis sp. ĐẾN SỰ SINH TRƯỞNG VÀ TỈ LỆ SỐNG CỦA ẤU TRÙNG HẦU THÁI BÌNH DƯƠNG Crassostrea gigas (Thunberg, 1793) Luận văn tốt nghiệp Chuyên ngành nuơi trồng thuỷ sản, khố 2004 – 2009 Sinh viên thực hiện Nguyễn Thị Nguyệt Ánh MSSV: 46135242 Giáo viên hướng dẫn Th.S Phùng Bảy Th.S Cái Ngọc Bảo Anh Nha Trang, tháng 11 năm 2008 LỜI CẢM ƠN Sau hơn ba tháng thực hiện và hồn thành đề tài tốt nghiệp, ngồi sự cố gắng nỗ lực của bản thân, tơi cịn nhận được sự giúp đỡ tận tình của các thầy cơ trong Khoa Nuơi Trồng Thủy Sản, các cơ chú, anh chị tại Viện Nghiên Cứu Nuơi Trồng Thủy Sản III, thư viện trường Đại Học Nha Trang, thư viện Viện Nghiên Cứu Nuơi Trồng Thủy Sản III. Tơi xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ quý báu đĩ. Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ThS. Phùng Bảy, ThS. Cái Ngọc Bảo Anh, KS. Phan Thị Thương Huyền đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo tơi trong quá trình thực hiện đề tài tốt nghiệp. Cuối cùng tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới gia đình và những người bạn luơn động viên, giúp đỡ tơi hồn thành đề tài này. Tơi xin chân thành cảm ơn! Nha Trang, ngày 04 tháng 11 năm 2008 Sinh viên Nguyễn Thị Nguyệt Ánh MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn i Mục lục ii Chữ viết tắt và ký hiệu iv Danh mục các bảng v Danh mục các hình vi Phần I: MỞ ĐẦU 1 Phần II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1. Tình hình nghiên cứu hầu Thái Bình Dương 3 1.1. Trên thế giới 3 1.2. Việt Nam 8 2. Nghiên cứu sử dụng tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thủy sản 10 2.1. Nghiên cứu thành phần dinh dưỡng của một số lồi vi tảo 11 2.2. Nghiên cứu nuơi và sử dụng vi tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thủy sản 13 2.3 Nghiên cứu sử dụng vi tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thân mềm 14 Phần III: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 1. Đối tượng địa điểm và thời gian nghiên cứu 16 2. Phương pháp nghiên cứu và kỹ thuật sử dụng 16 2.1. Phương pháp gây nuơi tảo 16 2.2. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của các lồi tảo đơn bào đến tốc độ sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình dương 17 2.3. Phương pháp thu thập và xử lý số liệu 18 Phần IV: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 22 1. Gây nuơi sinh khối tảo 22 2. Ảnh hưởng của các lồi tảo đơn bào đến tốc độ sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương 24 Phần V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 27 1. Kết luận 27 2. Đề xuất ý kiến 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO 28 Phụ lục A Phần I: MỞ ĐẦU Trong những năm gần đây, nghề nuơi trồng thủy sản đã phát triển nhanh chĩng, đa dạng hĩa cả về hình thức cũng như đối tượng nuơi. Trong đĩ, động vật thân mềm được xem như là những đối tượng rất cĩ tiềm năng trong nuơi trồng thủy sản và đang thu hút sự quan tâm của nhiều người. Hầu Thái Bình Dương Crassostrea gigas là loại động vật thân mềm hai mảnh vỏ phân bố và được ứng dụng vào nuơi rộng rãi trên khắp thế giới, bắt đầu phát triển nuơi tại Việt Nam vì giá trị kinh tế và giá trị dinh dưỡng rất cao. Thịt hầu thơm ngon và bổ, giá trị dinh dưỡng cao (chứa 45 – 75% protein, 7 -11% lipid, 19 – 38% glucid, nhiều chất khống và vi-ta-min), cĩ thể bổ sung nguồn dinh dưỡng cần thiết cho người cao tuổi, chống béo phì và nâng cao tầm vĩc nên hầu là lồi cĩ giá trị kinh tế lớn. Thịt hầu cĩ thể ăn sống (với wasabi và chanh đang được hầu hết các nước ưa chuộng), nấu chín, phơi khơ hay đĩng hộp. Ngồi giá trị làm thức ăn, nĩ cịn cĩ giá trị y học; vỏ hầu dùng để nung vơi, làm bột phấn, làm vật bám để nuơi hầu hay các lồi hải sản khác. Do những giá trị trên nên mặc dù nguồn lợi hầu này rất lớn nhưng vẫn khơng đáp ứng được nhu cầu tiêu thụ ngày càng tăng. Để đáp ứng được nhu cầu đĩ, nghề nuơi hầu đang được phát triển ở nhiều nước trên thế giới như: Pháp, Italia, Trung Quốc, Triều Tiên, Nhật Bản…với quy mơ rất lớn để phục vụ tiêu thụ trong nước và xuất khẩu. Ở Việt Nam, phong trào nuơi hầu phát triển mạnh ở Quảng Ninh, Thừa Thiên Huế, Khánh Hịa, Bà Rịa – Vũng Tàu từ năm 2004 trở lại đây nhưng chưa đủ số lượng lớn để đáp ứng nhu cầu tiêu dùng nội địa và xuất khẩu. Một trong những nguyên nhân chủ yếu là chưa chủ động tạo ra được nguồn giống nhân tạo đủ về số lượng và chất lượng cho nuơi. Chính vì vậy việc sản xuất giống nhân tạo là điều cần thiết và cấp bách ngay bây giờ. Trong sản xuất giống nhân tạo, thức ăn là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển, tỉ lệ sống, chất lượng con giống của hầu trong giai đoạn ấu trùng và sự mở rộng quy mơ sản xuất. Nhiều nghiên cứu cho thấy rằng vi tảo là loại thức ăn tươi sống đặc biệt tốt cho ấu trùng thủy sinh vật, đặc biệt cĩ kích thước nhỏ phù hợp với hầu hết giai đoạn phù du của động vật thân mềm hai mảnh vỏ. Ngồi việc cung cấp đầy đủ các chất dinh dưỡng cĩ giá trị như protein, hydrat carbon, vi tảo cịn là nguồn cung cấp các loại vi-ta-min B1, B6, B12, C và muối khống. Với ý nghĩa kinh tế và nhu cầu thực tiễn như vậy, tơi đã được sự đồng ý của Khoa nuơi trồng thủy sản để thực hiện đề tài: “Ảnh hưởng của các lồi tảo khác nhau Nannochloropsis sp., Chaetoceros sp., Isochrysis sp. đến sự sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương Crassostrea gigas (Thunberg, 1793) ”. Với các nội dung sau: 1. Nuơi cấy sinh khối các lồi tảo đơn bào Nannochloropsis sp., Chaetoceros sp., Isochrysis sp. làm thức ăn cho ấu trùng hầu. 2. Nghiên cứu ảnh hưởng của các lồi tảo khác nhau Nannochloropsis sp., Chaetoceros sp., Isochrysis sp. đến tốc độ sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương. Đề tài được thực hiện nhằm mục đích: nuơi cấy tảo làm thức ăn cho ấu trùng hầu Thái Bình Dương; tìm hiểu được sự kết hợp các lồi tảo đơn bào nào thích hợp nhất cho sự sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu. Do kiến thức, hiểu biết của bản thân cịn hạn hẹp, thời gian thực hiện đề tài ngắn, bắt đầu làm quen với phương pháp viết báo cáo khoa học, nên đề tài khơng tránh khỏi những thiếu sĩt. Kính mong các thầy cơ và các bạn gĩp ý kiến để đề tài được hồn chỉnh hơn. Phần II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Tình hình nghiên cứu hầu Thái Bình Dương. Trên thế giới: Vị trí phân loại: Ngành Mollusca Lớp Bivalvia Bộ Ostreoida Họ Ostreidae Giống Crassostrea Lồi Crassostrea gigas (Thunberg, 1793) Đặc điểm hình thái: Cũng như các động vật thân mềm hai mảnh vỏ khác, hầu Thái Bình Dương cĩ hai vỏ úp lại với nhau và khép mở nhờ cơ khép vỏ. Hai vỏ này rất cứng, thơ, khác nhau hình dạng và kích thước: vỏ phải thì nhỏ, nơng nằm ở trên cịn vỏ trái thì cứng, lớn, sâu dùng để bám chặt vào vật bám và nằm ở dưới. Hầu Thái Bình Dương khơng cĩ răng bản lề ở bên trong, cơ khép vỏ cĩ màu tím hay nâu trong khi rìa của màng áo cĩ màu đen. Để phân biệt với các loại hầu khác, đặc điểm dễ nhận biết là hầu Thái Bình Dương khi trưởng thành cĩ tỉ lệ chiều dài và chiều rộng vỏ tương đối lớn (khoảng 3/1 so với 2/1 ở hầu cửa sơng hay 1,5/1 so với nhiều loại hầu khác). Chính đặc điểm này nên người ta thường gọi hầu Thái Bình Dương là hầu ống hay hầu dài. Ngồi ra hai mép lưng bụng của hầu gần như song song với nhau cũng là một đặc điểm nhận dạng khác (Gosling, 2003). Đặc điểm phân bố: Theo chiều ngang: hầu Thái Bình Dương là động vật thân mềm hai mảnh vỏ thuộc họ Ostreidae thích nghi với phạm vi dao động rộng của các yếu ố mơi trường. Chúng là lồi bản địa của Đơng Bắc châu Á như Nhật Bản nhưng được di chuyển và lan rộng ra nhiều quốc gia như Pháp, Trung Quốc (du nhập vào đầu và cuối những năm 70 của thế kỉ 20), Anh, Mỹ (vào những năm 1950), Ca-na-đa, Bra-xin, Hàn Quốc, Úc (những năm 1960) và Niu-Di-Lân vì mục đích nuơi. Ngồi ra sự phát tán của hầu Thái Bình Dương cịn do nguyên nhân khách quan đĩ là trường hợp hầu bám trên những chiếc tàu lớn và được vận chuyển đi đến khắp nơi. Cho nên cĩ thể nĩi hầu Thái Bình Dương phân bố tồn cầu. Theo phương thẳng đứng: hầu Thái Bình Dương trưởng thành khơng cĩ tơ chân và bám chặt trên những vật bám cứng như đá hay vỏ động vật thân mềm khác trong vùng trung triều và vùng hạ triều đến độ sâu khoảng 3 mét nước. Chúng thiên về những vùng nước lợ cửa sơng hay những vùng duyên hải gần bờ mặc dù chúng cĩ thể thích nghi với biên độ dao động mạnh của nồng độ muối và các yếu tố mơi trường nước nên cĩ thể xuất hiện ở ngồi khơi ở độ sâu khoảng 40 mét nước nhưng mật độ ít và sinh trưởng kém (Gosling, 2003). Đặc điểm sinh học và sinh thái: Nhiệt độ và độ mặn: Nhiệt độ cĩ ảnh hưởng đến tồn bộ quá trình sống của hầu. Mỗi lồi hầu cĩ một phạm vi nhiệt độ thích hợp nhất định, vượt quá phạm vi này thì sự sống của chúng bị giảm sút, thậm chí cĩ khi bị chết. Hầu Thái Bình Dương thích nghi rộng với sự dao động nhiệt độ từ -1,8°C đến +35°C . Nhiệt độ đẻ trứng thường trên 20°C nhưng cũng cĩ ít trường hợp từ 15 - 18°C. Ranh giới độ mặn cực thuận của lồi này từ 20 - 25‰ mặc dù chúng cĩ thể xuất hiện tại những vùng nước cĩ độ muối dưới 10‰ và cĩ thể sống sĩt tại độ muối trên 35‰ nhưng sinh trướng chậm và thường khơng cĩ khả năng sinh sản Thức ăn và phương thức bắt mồi: Thức ăn của hầu Thái Bình Dương khi trưởng thành là những hạt nhỏ lơ lửng trong nước như vi khuẩn, các loại tảo đáy, ấu trùng của những động vật khác, mùn bã hữu cơ và những chất hịa tan trong nước như amino acid, muối khống (đặc biệt là muối calci rất cần thiết cho sự hình thành vỏ). Khi cịn trong giai đoạn sống trơi nổi, ấu trùng hầu ăn chủ yếu các loại tảo đơn bào nổi như Isochrysis sp., Chaetoceros sp., Nannochloropsis sp…. Đến giai đoạn sống bám, thức ăn của hầu là các lồi tảo đáy và mùn bã hữu cơ. Hầu khơng cĩ phương thức bắt mồi chủ động, thức ăn nhờ dịng nước đưa đến mang, qua chọn lọc của mang và xúc biện được đưa tới miệng. Chúng chỉ cĩ khả năng chọn lọc thức ăn theo độ lớn: hạt nhỏ thích hợp thì được tiêu thu, hạt lớn khơng thích hợp thì bị thải ra ngồi. Do đĩ trong dạ dày của hầu ta cịn bắt gặp những hạt khơng tiêu hĩa được. Chi tiết này cho chúng ta biết rằng khi chọn bãi nuơi hay khi ương giống hầu điều quan trọng là chúng ta nên chọn vùng cĩ nước chảy hay nước thủy triều ra vào để đảm bảo thức ăn được mang đến cho hầu thường xuyên. Sinh trưởng: Hầu Thái Bình Dương cĩ tốc độ sinh trưởng nhanh (cĩ thể sinh trưởng hơn 75mm trong vịng 12 tháng đầu tiên). Tuy nhiên tại vùng nước Wadden Sea (Đan Mạch) hầu cĩ thể sinh trưởng đạt 100mm sau 12 tháng nuơi đầu tiên. Hầu Thái Bình Dương cĩ thể sống tới 10 năm và đạt cỡ trung bình khoảng 150 – 200mm (Spenser, 2002) Đặc điểm sinh sản Giống như hầu hết các loại hầu khác, hầu Thái Bình Dương thay đổi giới tính trong vịng đời. Chúng thường tham gia sinh sản đầu tiên như là con đực và sau đĩ chuyển thành con cái. Các yếu tố mơi trường đặc biệt là thức ăn cĩ thể ảnh hưởng tới giới tính của hầu. Trong điều kiện dồi dào thức ăn, hầu đực cĩ xu hướng chuyển giới tính thành con cái và ngược lại trong điều kiện thức ăn hạn chế hay chúng thành lập những quần thể với mật độ quá lớn, tồn bộ là hầu đực. Một số ít cá thể thì lưỡng tính. Việc đẻ trứng phụ thuộc vào nhiệt độ mơi trường và thường diễn ra vào những tháng mùa xuân và mùa hè. Theo Spenser (2002) thì nhiệt độ đẻ trứng của hầu Thái Bình Dương dao động trong khoảng 22 – 250C. Hầu Thái Bình Dương tham gia sinh sản lần đầu sau khoảng một năm (kích thước hầu khoảng 70 – 100mm) và một hầu cái cĩ thể sản sinh ra khoảng 30 – 40 triệu trứng trong một lần đẻ. Việc đẻ trứng thường được tác động bởi các yếu tố mơi trường như sự dồi dào của thức ăn và sự nâng lên của nhiệt độ. Quá trình thụ tinh diễn ra trong mơi trường nước. Trong điều kiện nhân tạo, thụ tinh chỉ diễn ra trong vịng một giờ hay ngắn hơn sau khi hầu đẻ ở nhiệt độ khoảng 25°C khi trộn trứng và tinh lại với nhau, nếu ngồi thời gian này trứng và tinh trùng thường là bất động khơng cĩ khả năng thụ tinh. Các giai đoạn phát triển của ấu trùng: - Ấu trùng Trochophore (ấu trùng bánh xe): xuất hiện sau khi trứng thụ tinh khoảng 8 -12 giờ. Ấu trùng cĩ dạng hình bầu dục cĩ gắn đĩa bơi, xung quanh đĩa bơi cĩ tiêm mao bao phủ. Ấu trùng vận động xoay trịn xoắn ốc và thường ngược chiều kim đồng hồ. Ấu trùng Verliger: xuất hiện khoảng 18 – 22 giờ sau khi thụ tinh, ấu trùng cĩ dạng hình chữ D, cĩ hai vỏ và vành tiêm mao nằm ở giữa hai vỏ. Ấu trùng vận động nhanh nhờ sự vận động của vành tiêm mao miệng. Kích thước vỏ ấu trùng cĩ chiều dải khoảng 80µm. Ấu trùng Umbo: đặc trưng của giai đoạn này là sự hình thành các cơ quan bao gồm : giai đoạn sơ kì (tiền Umbo) xuất hiện mầm cơ khép vỏ, giai đoạn trung kì xuất hiện đỉnh vỏ, giai đoạn hậu kì xuất hiện điểm mắt ở dưới trung tâm của cơ quan. Cuối giai đoạn này ấu trùng hình thành chân bị. Đây là dấu hiệu kết thúc giai đoạn sống trơi nổi chuyển sang giai đoạn sống bám cố định. Lúc này kích thước ấu trùng dài nhất đạt 300µm, giai đoạn này thường từ 18 – 22 ngày sau khi trứng thụ tinh. Ấu trùng bám: tính từ ngày thứ 22 – 25 sau khi trứng thụ tinh, hoạt động bơi của ấu trùng giảm dần, ấu trùng chuyển xuống bị dưới đáy, vành tiêm mao và điểm mắt thối hĩa dần. Đặc trưng của giai đoạn này là sự hình thành các tơ chân, màng áo, cơ khép vỏ và một số cơ quan khác. Ấu trùng chuyển hồn tồn sang giai đoạn sống bám, giai đoạn này kích thước của ấu trùng tăng nhanh. - Hầu giống: khi ấu trùng hồn tồn biến thái và bám chắc vào vật bám, ấu trùng trở thành hầu con cĩ hình dáng ngồi giống với hầu trưởng thành. Tuy nhiên tùy thuộc vào loại vật bám mà hầu cĩ hình dạng khác nhau. Kích thước đạt từ 1mm. Tình hình sản xuất giống: Mặc dù nuơi hầu đã cĩ lịch sử xuất phát từ lâu đời nhưng sản xuất giống hầu chỉ bắt đầu 40 năm trở lại đây ở một số nước như Nhật (Pacific oyster, Crassostrea gigas), Úc (Sydney Rock oyster, Saccostrea glomerata), Mỹ (Crassostrea virginica) và Pháp. Từ đĩ tới nay, qui trình sản xuất giống đã dần được hồn thiện và phát triển ở trình độ cao. Cụ thể là trong những năm đầu của thập niên 90 của thế kỉ XX, sản lượng con giống từ sinh sản nhân tạo chiếm gần 90% của tổng sản lượng hầu giống ở Anh, Ca-na-đa và Mỹ (Wong, 1993). Việc sản xuất giống ở mọi nơi đều theo một trình tự chung là chọn lọc, thu thập hầu bố mẹ và nuơi vỗ, cấy tảo làm thức ăn, kích thích cho đẻ hay cho thụ tinh nhân tạo, ương nuơi ấu trùng và con giống. Hiện nay, xung quanh vịnh Dabob và vịnh Willipa (thuộc bang Washington, Mỹ) cĩ khoảng 11 trại sản xuất giống, họ chia làm 3 phần: một phần sản xuất con giống bán sang các nước châu Âu, một phần để nuơi thành con giống, một phần nữa bán trong giai đoạn ấu trùng điểm mắt. Lượng con giống sản xuất đã tăng lên đáng kể, cĩ khoảng 50.000 thùng giống (1 thùng = 13.000 – 20.000 con) mỗi năm từ vùng ven biển Thái Bình Dương. Một trong những kĩ thuật mới trong cơng nghệ sản xuất giống là kĩ thuật cho bám đơn đã mang lại một viễn cảnh mới cho nghề nuơi hầu ở Colombia – Anh. Họ cĩ thể sản xuất hàng triệu con giống đơn phục vụ cho nghề nuơi hầu bằng khay và bằng túi của vùng (Cross and Kingzett, 1992, trích theo Hà Đức Thắng, 2005). Ngồi ra, tại một số cơ sở nghiên cứu sản xuất hầu giống tam bội hay tứ bội ở Mỹ và Ca-na-đa, người ta đã dùng hĩa chất Epinephrine để tiêu hủy tuyến tiết chất bám vào vật bám cứng của hầu tạo thành những con hầu giống đơn giúp ích nhiều cho nuơi thương phẩm (Gregory, 2008) Tình hình nuơi thương phẩm: Vì hầu là đối tượng rất cĩ giá trị về mặt dinh dưỡng, nên nuơi hầu đã cĩ lịch sử rất lâu đời tại nhiều quốc gia. Trung Quốc là nước đầu tiên đã nuơi hầu vì hầu cĩ giá trị thực phẩm và về y học, nguồn giống ngồi tự nhiên phong phú mà chi phí nuơi thấp. Tại Pháp nuơi hầu đã bắt đầu vào những năm giữa của thế kỉ XVII với lồi hầu bản địa Ostrea edulis, nguồn giống cho nuơi được thu từ tự nhiên sử dụng sạp bằng gỗ hay nhựa PVC đặt dưới đáy và được nuơi trong những ao vùng duyên hải. Mãi đến năm 1960, nguồn giống hầu này bị cạn kiệt do khai thác quá mức nên người ta mới nhập khẩu lồi hầu Crassostrea angulata từ Bồ Đào Nha để nuơi. Trong những năm 1973, 1974, triệu chứng bệnh mang đã gây chết hầu hàng loạt nên hầu Thái Bình Dương đã được thay thế. Đến năm 2002, sản lượng hầu này chiếm khoảng 98% trong tổng sản lượng hầu nuơi. Với nguồn giống từ tự nhiên hay nhân tạo, nuơi thương phẩm hầu ở Pháp hay các nước châu Âu dựa vào 3 phương pháp chính đĩ là nuơi đáy, nuơi trong những khung cố định dưới nước và nuơi treo trên những bè trơi nổi (Grizel và Heral, 1991). Tại Úc, nuơi hầu cĩ lịch sử lâu đời với đối tượng nuơi là hầu đá Saccostrea glomerata với phương pháp nuơi truyền thống là cho hầu giống bám vào viên đá hay vỏ sị trưởng thành rồi đặt xuống đáy vùng triều để nuơi. Đến những năm 1950, từ nhận thức rằng nuơi hầu theo kiểu trên dễ bị bùn lấp hay những địch hại khác nên hình thức nuơi được tập trung vào nuơi bằng rổ, lồng hay trên những cọc cắm đất. Nuơi hầu Thái Bình Dương (nhập từ Nhật Bản) được bắt đầu những năm 1970 chủ yếu từ con giống sinh sản nhân tạo và đang là đối tượng nuơi chính của Úc (Spencer, 2002) Việt Nam: Ở Việt Nam, hầu Thái Bình Dương phân bố ở những vùng bãi triều thấp tới độ sâu 10 mét nước ở những vùng nước thuộc tỉnh Quảng Ninh, Hải Phịng (Hà Quang Hiến, 1983). Nguyễn Văn Chung (2001) khi điều tra đánh giá tình hình phân bố của động vật thân mềm hai vỏ trong đầm phá Nam Trung Bộ Việt Nam đã tìm thấy hầu Thái Bình Dương phân bố ở đầm Cù Mơng và đầm Ơ Loan nhưng với tần số bắt gặp rất thấp. Việt Nam là một nước cĩ nghề nuơi hầu chậm phát triển, các nghiên cứu về phát triển nghề nuơi hầu chỉ mới thực hiện trong những năm cuối của thế kỉ XX với con giống chủ yếu thu vớt từ tự nhiên. Năm 2001 – 2003, Viện Nghiên Cứu Nuơi Trồng Thủy Sản I tiến hành thử nghiệm thành cơng sản xuất giống nhân tạo hầu Thái Bình Dương Crassostrea gigas bằng cơng nghệ của Úc. Tuy nhiên việc nuơi hầu giống thành hầu thương phẩm cịn gặp nhiều khĩ khăn do hầu cĩ hiện tượng chết hàng loạt (Đồng Xuân Vĩnh, 2004). Từ năm 2001 – 2004, trong khuơn khổ nguồn kinh phí của Bộ Khoa Học & Cơng Nghệ, đề tài “Nghiên cứu cơng nghệ sản xuất hầu giống và nuơi hầu Crassostrea sp. thương phẩm” do kĩ sư Hà Đức Thắng làm chủ nhiệm đã được thực hiện nghiên cứu sản xuất giống trên 3 đối tượng hầu phân bố khắp cả nước: hầu Crassostrea rivularis vùng cửa sơng ở miền Bắc, hầu C. lugubris ở miền Trung, hầu C. belcheri ở miền Nam (Lê Trọng Phấn và Cao Văn Nguyện, 2003). Đề tài đã xây dựng thành cơng quy trình sản xuất giống, hồn tồn chủ động trong các khâu của quy trình, thu được hàng triệu con giống cĩ chất lượng tốt và số lượng lớn hầu thương phẩm, tạo tiền đề cho cơng cuộc phát triển nghề nuơi hầu ở nước ta. Từ đĩ trở đi mỗi vùng phát triển theo những hướng khác nhau: đa số các hộ dân miền Bắc (Quảng Ninh, Hải Phịng) nhập con giống hầu C. gigas từ Trung Quốc và Đài Loan về nuơi cịn miền Nam cĩ Cơng ty Nuơi Trồng Thủy Sản và Thương Mại Viễn Thành tiếp tục sản xuất giống các lồi hầu C. belcheri, C. rivularis, C. eridalei để cung cấp cho hoạt động nuơi hầu của cơng ty và bán cho người dân. Với tốc độ phát triển như hiện nay, trong các năm tiếp theo việc nuơi hầu thương phẩm trên cả nước cĩ thể được thực hiện nhờ vào con giống sản xuất nhân tạo. Ở nước ta tuy chưa cĩ văn kiện nào ghi chép rõ ràng nhưng ở nhiều nơi nhân dân đã biết nuơi hầu từ rất lâu đời như bãi hầu ở sơng Gianh – Quảng Bình. Ở Lạch Trường , do đê vỡ phải kè đá hàn khẩu, ít lâu sau cĩ hầu đến bám nên hình thành nghề nuơi hầu ở địa phương (Hà Quang Hiến, 1983). Tuy nhiên trong suốt nhiều thập niên nghề nuơi hầu ở Việt Nam khơng cĩ sự chú ý và phát triển đáng kể. Vào năm 1972 trong chương trình hỗ trợ phi chính phủ, một tổ chức của Nhật Bản đã cử chuyên gia sang giúp Việt Nam tiến hành dự án nuơi lồi hầu cửa sơng Crassostrea rivularis theo phương pháp vớt giống ngồi tự nhiên ở vùng nước Quảng Yên (Bắc Việt Nam), song do dự án tiến hành trong hồn cảnh chiến tranh nên dự án kết thúc khơng đạt được những kết quả như dự định. Theo Hà Lê Thị Lộc và ctv (2001), nghề nuơi hầu C. lugubris thương phẩm ở đầm Lăng Cơ đã phát triển tự phát từ năm 1997 và đến năm 2001 cĩ 130 hộ nuơi. Dựa vào đặc điểm bám của hầu, các hình thức nuơi chủ yếu là bằng các trụ xi măng, các lồng hay lốp xe cao su treo trên giàn, hay sử dụng những viên đá đặt nơi cĩ hầu giống xuất hiện. Diện tích và sản lượng hầu nuơi ở đây tăng theo thời gian từ 100m2 và 160kg (1997) đến 129.749m2 và 171.285kg (2001) Ở miền Nam Việt Nam, nghề nuơi hầu phát triển nhất là vùng nước Long Sơn thuộc tỉnh Bà Rịa – Vũng Tàu. Trong tổng sản lượng ước tính 2.000 tấn hầu của cả nước hiện nay thì nghề nuơi hầu của Long Sơn chiếm khoảng 1.500 tấn. Dụng cụ nuơi hầu khá đơn giản và đa dạng, giá thể cho hầu bám từ lốp xe phế thải, fibro xi măng, vỏ hầu xâu chuỗi nuơi trên bè di động cho đến hầu bám đơn nhân tạo nuơi lồng lưới nhiều tầng dạng vuơng, dạng trịn treo bè hoặc thả đáy bãi triều. Hiện nay nghề nuơi hầu đã và đang phát triển mạnh và rộng khắp tại các tỉnh ven biển Việt Nam như Bà Rịa – Vũng Tàu, Ninh Thuận, Bình Thuận, Bình Định, Khánh Hịa, Nghệ An, Trà Vinh. Đặc điểm này cho thấy được tiềm năng cũng như nhu cầu để phát triển nghề nuơi hầu là rất lớn. Nghiên cứu sử dụng tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thủy sản. 2.1. Nghiên cứu thành phần dinh dưỡng của một số lồi vi tảo. Đặc điểm nổi bật của vi tảo là sinh khối cĩ hàm lượng protein cao, trung bình chiếm 50 – 60% trọng lượng khơ. Trong thành phần chung của vi tảo thì protein luơn là thành phần hữu cơ chủ yếu, tiếp đĩ là lipid và hydrat carbon. Hàm lượng protein trong mỗi tế bào vẫn được coi là một trong những yếu tố quan trọng quyết định đến giá trị dinh dưỡng của các vi tảo dùng làm thức ăn cho các đối tượng thủy sản. Giá trị dinh dưỡng lớn nhất của tảo liên quan đến thành phần và hàm lượng các acid béo khơng no đa nối đơi mạch dài (HUFA) khơng thay thế, đặc biệt hai thành phần thuộc nhĩm “w3” là: acid eicosapentaenoic (EPA) – 20:5n-3 và acid decosahexaenoic (DHA) – 22:6n-3 (Jeffrey và ctv, 1994; trích theo Lục Minh Diệp, 2006). Nhiều kết quả nghiên cứu cho thấy thành phần và hàm lượng các chất dinh dưỡng quan trọng như HUFA cĩ trong tảo cĩ thể thay đổi theo nồng độ, thành phần của phân bĩn, các nguyên tố vi lượng và vitamin trong mơi trường nuơi. Vì vậy cần bổ sung thành phần khống và vitamine khi nuơi sinh khối nhằm đạt giá trị dinh dưỡng cao nhất. Ngồi yếu tố dinh dưỡng, cường độ ánh sáng cũng là một tác nhân làm thay đổi giá trị dinh dưỡng của tảo. Bảng 1: Yêu cầu sinh thái cho nuơi tảo biển (trích theo Lục Minh Diệp, 2006). Vị trí/khâu nuơi Độ mặn (ppt) Nhiệt độ (0C) pH Cường độ sáng Chu kỳ chiếu sáng (sáng : tối) Trong phịng (lưu giữ, nhân giống) 20 – 30 20 – 25 7–8 2.500–5.000 lux (đèn neon) 24 : 0 Ngồi trời (nuơi thu sinh khối) < 32 7–9 1.000-10.000 lux (ánh sáng mặt trời) 16:8 Hàm lượng quan trọng của EPA đều cĩ mặt ở các lồi tảo khuê Chaetoceros calcitrans…và tảo Platymonas lutheri, trong khi đĩ hàm lượng cao của DHA được thấy ở lồi tảo Pavlova sp. và Isochrysis spp. Ngồi ra người ta cịn chiết xuất từ vi tảo các hoạt chất như: vitamine, lipid, sắc tố, hydrat carbon, chất chống oxy hĩa… Bảng 2: Thành phần dinh dưỡng của một số lồi tảo (trích theo Hà Đức Thắng, 2005). Lớp và lồi tảo Chlorophylla (%) Protein (%) Hydrat carbon (%) Lipid (%) Chaetoceros calcitrans 3.04 34 6.0 16.0 Chaetoceros gracilis 1.04 15 4.7 7.2 Nannochloropsis oculata 0.89 3.5 7.8 18 Isochrysis galbana 0.98 29 12.9 23 Bảng 3: Mật độ tế bào và thành phần các chất dinh dưỡng trong tảo Isochrysis galbana nuơi ở các mơi trường khác nhau (trích theo Hà Đức Thắng, 2005). Mơi trường Mật độ tế bào x 106 Protein (%) Hydrat carbon (%) Lipid (%) Walne 10.11 5.17 4.28 25.95 ES 12.09 7.23 5.21 28.38 F2 10.81 8.18 5.59 26.82 Algal-1 16.15 9.57 4.28 20.68 2.2. Nghiên cứu nuơi và sử dụng vi tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thủy sản. Nuơi vi tảo dùng làm thức ăn trong nuơi trồng thủy sản đã được phát triển từ lâu đời. Năm 1871, Phamintsin đã tiến hành nuơi tảo lục Protococales (Hồng Thị Bích Mai, 1995). Từ năm 1910, Allen và Nelson đã tiến hành nuơi đơn lồi dùng làm thức ăn cho động vật khơng xương sống (Ryther Nên bỏ chỗ tên này đi vì đã viết trích theo HLTloc rôi. và Goldman, 1975; (trích theo Hà Lê Thị Lộc, 2000). Bruce và cộng sự (1939; trích theo Hà Lê Thị ĐƯA XUỐNG PHÍA CUÔI ĐOẠN Lộc, 2000) lần đầu tiên đã phân lập và nuơi giữ hai lồi tảo đơn bào Isochrysis galbana và Pyramimonas grossii làm thức ăn cho ấu trùng hầu. “Phương pháp của Glancy” (1965) đã được ơng sử dụng để nuơi ấu trùng hai mảnh vỏ. Nước biển tự nhiên được lọc qua than hoạt tính rồi đi qua một túi lưới cĩ mắt lưới nhỏ. Sau đĩ được đặt trong nhà gương kín, khơng bĩn phân. Phương pháp này vừa dễ làm vừa ít tốn kém hơn phương pháp nuơi đơn lồi nhưng do khơng điều khiển được thành phần lồi nên hiệu quả cũng khơng cao. Do vậy, phương pháp nuơi tảo đơn lồi vẫn được sử dụng phổ biến hơnĐƯA TÊN TAI LIẸU THAM KHAO XUONG ĐAY . Tại Trung Quốc, nghiên cứu nuơi tảo đã đươc bắt đầu từ những năm 1940. Guo và cộng sự (1959) (trích theo BỎ TỪ TRÍCH THEO ĐỂ BỚT ĐI SỰ LĂP LẠI PHÍA TRÊN, VÀ đưa tên HLTLoc ra cuối câu Hà Lê Thị Lộc, 2000) đã phân lập và nuơi hai lồi tảo đơn bào Tetraselmis sp. và Dunnaliella sp. Từ những năm 1980, nhiều lồi tảo đã được tiến hành phân lập và phát triển nuơi đại trà như Tetraselmis subcordifornis, Chaetoceros muelleri, Tetraselmis sp., Isochrysis galbana, Pavlova viridis… Tất cả những lồi tảo này cĩ thể phát triển rất tốt ở nhiệt độ 25°C. Ở Việt Nam các cơng trình nghiên cứu nuơi vi tảo biển làm thức ăn cho các động vật thủy sản nuơi chỉ mới được tiến hành gần đây cùng với sự phát triển của nghề nuơi biển, mục đích cung cấp nguồn thức ăn và mơi trường nước xanh cho nhu cầu sản xuất con giống một số đối tượng như: tơm, cua, điệp quạt, bào ngư, trai ngọc, ốc hương… Từ những năm 1974, trường Đại học thủy sản Nha Trang đã thử nghiệm nuơi Skeletonema costatum trong phịng thí nghiệm (Hồng Thị Bích Mai, 1995). Viện Nghiên cứu Nuơi trồng Thủy sản III đã tiến hành nuơi các lồi tảo như: Isochrysis galbana, Nannochloropsis oculata, Chaetoceros muelleri sử dụng làm thức ăn để nuơi ấu trùng điệp quạt, bào ngư, ốc hương và đã đạt được những kết quả khả quan. Lục Minh Diệp (1999) khi nghiên cứu ảnh hưởng của các tỷ lệ phân bĩn khác nhau và các tỷ lệ thu hoạch khác nhau lên sự phát triển của hỗn hợp tảo biển tự nhiên cho thấy rằng thành phần lồi ưu thế của tảo biển tự nhiên thay đổi theo tỷ lệ pha lỗng và thay đổi theo tỷ lệ phân bĩn. 2.3. Nghiên cứu sử dụng vi tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thân mềm. Trong những năm gần đây, nghiên cứu và sản xuất giống nhân tạo các lồi động vật thân mềm đặc biệt là động vật thân mềm hai mảnh vỏ đã phát triển sâu rộng đạt được những thành tựu rất đáng được khích lệ phục vụ cho nhu cầu nuơi ngày càng tăng của đối tượng này. Đặc điểm khác biệt của ấu trùng động vật thân mềm là kích thước thường rất nhỏ, thức ăn cho chúng chỉ là những hạt lơ lửng và các vi tảo cĩ kích thước hiển vi. Ngồi ra, giai đoạn ấu trùng của động vật thân mềm vận động kém, các cơ quan chưa hồn thiện, nên dinh dưỡng của ấu trùng đã trở thành một trong những trở ngại chính trong việc sản xuất đại trà. Do đĩ nghiên cứu thức ăn trong sản xuất giống động vật thân mềm là điều khơng thể thiếu trong hồn thiện quy trình sản xuất giống nhân tạo. Hà Đức Thắng (2005) nghiên cứu ảnh hưởng của thức ăn đến tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng hầu cho thấy việc sử dụng thức ăn là tảo đơn lồi ấu trùng hầu phát triển kém, tốc độ tăng trưởng chậm, tỷ lệ sống thấp. Việc kết hợp các lồi thức ăn khác nhau theo từng giai đoạn phát triển của ấu trùng trong quá trình chuyển giai đoạn là rất quan trọng. Vi tảo đã gĩp phần quan trọng trong sự thành cơng của các đề tài sản xuất giống hải sản tại Viện Nghiên cứu Nuơi trồng Thủy sản III trong nhiều năm qua như làm tăng tỷ lệ sống lên 3,95% của vẹm xanh Perna viridis ở giai đoạn ấu trùng chữ D đến con giống 3 – 5mm khi sử dụng hỗn hợp tảo tươi Nannochloropsis oculata, Chaetoceros đơn bào, Isochrysis, Platymonas (5000 – 60000 tb/ml). Ốc hương Babylonia areolata giai đoạn Verliger lên 60 – 65% với hỗn hợp tảo đơn bào Nannochloropsis oculata, Chaetoceros, Isochrysis, Platymonas (5000 – 10000 tb/ml) kết hợp với thức ăn tổng hợp. Sị huyết Anadara granosa ở giai đoạn ấu trùng nổi lên 70% với Nannochloropsis oculata, Chaetoceros, Platymonas (3000 – 10000 tb/ml). Trai ngọc Pinctada maxima giai đoạn ấu trùng chữ D – Umbo là 23%. Tu hài Lutraria rhychaena ấu trùng nổi đến con giống 7 – 10mm lên 1,42% với Nannochloropsis oculata, Chaetoceros, Isochrysis, Platymonas (3000 – 15000 tb/ml) so với thức ăn tổng hợp Lansy, Fripak là 0,34%. Điệp quạt giai đoạn ấu trùng chữ D đến ấu trùng spat lên 7,5 – 9,5% với hỗn hợp Chaetoceros muelleri, Isochrysis, Platymonas (3000 – 10000 tb/ml) so với thức ăn tổng hợp AP, BP là 0 – 2,5%. Hải sâm Holothuria scabra giai đoạn ấu trùng nổi Auricularia lên 10,4 – 37,3% với hỗn hợp Nannochloropsis oculata Chaetoceros muelleri (20000 – 40000 tb/ml) so với thức ăn hỗn hợp là Spirunila khơ với Fripak là 10,4%. Nguyễn Thị Xuân Thu (1995) sử dụng hỗn hợp các lồi tảo đơn bào Chlorella, Chaetoceros, Platymonas để ương ấu trùng điệp quạt Chlamys nobilis cho tỷ lệ sống và khả năng tăng trưởng của ấu trùng cao hơn sử dụng tảo đơn lồi. Châu Văn Thanh (1998) cho ấu trùng vẹm vỏ xanh Chloromytilus viridis ăn hỗn hợp tảo đơn bào Platymonas sp., Nannochloropsis oculata, Chaetoceros sp. giai đoạn chữ D đến hậu kì đỉnh vỏ cĩ tỷ lệ sống trên 73.53%. Ngơ Anh Tuấn (2005) cho ấu trùng điệp seo Comptopallium radula ăn hỗn hợp tảo tươi Nannochloropsis oculata và Tetraselmis sp. với tỷ lệ 1:1 cho kết quả tốt hơn so với dùng tảo tươi đơn lồi: thời gian biến thái từ ấu trùng chữ D đến ấu thể Spat nhanh hơn, tốc độ tăng trưởng bình quân ngày cao hơn, tỷ lệ sống cao hơn. Nguyễn Thị Xuân Thu và ctv (2002) sử dụng kết hợp các lồi tảo Nannochloropsis oculata, Chaetoceros muelleri, Chlorella sp. cho ấu trùng ốc hương đạt kết quả cao hơn dùng tảo đơn lồi. Từ những kết quả nghiên cứu trên cho thấy: Nghiên cứu sản xuất giống hầu bằng phương pháp sinh sản nhân tạo nhằm tạo ra những con giống đồng kích cỡ và số lượng nhiều để đáp ứng nhu cầu nuơi thương phẩm thì việc sử dụng hỗn hợp tảo đơn bào làm thức ăn cho ấu trùng là rất cần thiết. Phần III: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu. Đối tượng nghiên cứu: Hầu Thái Bình Dương Crassostrea gigas. 3 lồi tảo đơn bào: Nannochloropsis sp., Isochrysis sp., Chaetoceros sp. Địa điểm nghiên cứu: Phịng thực nghiệm Viện Nghiên cứu Nuơi trồng Thủy sản III tại số 33 Đặng Tất - Nha Trang - Khánh Hịa Thời gian nghiên cứu: từ tháng 08/2008 đến tháng 10/2008. Phương pháp nghiên cứu và kỹ thuật sử dụng. Phương pháp gây nuơi tảo. - Nguồn tảo giống: từ phịng lưu giữ tảo Viện Nghiên cứu Nuơi trồng Thủy sản III. - Dụng cụ nuơi cấy: gồm những thùng đựng nước suối 14 Thùng 20 lít lít, thùng nhựa trắng 10 10 lít nên ghi là bình thủy tinh, không ai cấy trong xô 10 lít cả ,160, 200 lít, và bể composit 1m3. Dụng cụ nuơi để theo dõi biến thiên mật độ tảo là thùng nước suối 14 lít. - Nguồn nước: nước biển tự nhiên được bơm lên bể chứa để lắng, lọc cát sau đĩ bơm vào bể 1m3 xử lý chlorine nồng độ 20 ppm, sục khí và phơi nắng; khử chlorine trước khi cấy tảo. - Mơi trường dinh dưỡng: F/2 (Guillard và Ryther, 1962). Thành phần dinh dưỡng Nồng độ bĩn (ppm) Thành phần dinh dưỡng Nồng độ bĩn (ppm) NaNO3 KH2PO4.H2O Na2EDTA FeCl3.6H2O Na2SiO3.9H2O CuSO4.5H2O ZnSO4.7H2O 75 5 4,36 3,15 30 0,01 0,022 CoCl2.6H2O MnCl2.4H2O Na2MoO4.2H2O B1 (Thiamin) Biotin B12 (Cyanocobalamin) 0,01 0,18 0,0006 0,1 0,5 0,5 - Theo dõi các giai đoạn phát triển của tảo (các pha sinh trưởng, tốc độ sinh trưởng tương đối của quần thể tảo). Mật độ tảo theo dõi ngày 1 lần vào buổi sáng. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của các lồi tảo đơn bào đến tốc độ sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương. - Dụng cụ nuơi ấu trùng: bể composite 1m3 đặt trong nhà. Phương pháp bố trí thí nghiệm: 4 lơ thí nghiệm, thí nghiệm được lặp lại 3 lần. Nên ghi thêm: Ấu trùng đem thí nghiệm: Hầu TBD Mật đội ấu trùng: ( con/ml) Lơ 1: cung cấp 2 lồi tảo Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. cho ấu trùng hầu TBD. Bỏ đi Lơ 2:cung cấp 2 lồi tảo Nannochloropsis sp. + Chaetoceros muelleri cho ấu trùng hầu TBD. Bỏ đi Lơ 3: cung cấp 2 lồi tảo Isochrysis sp. + Chaetoceros muelleri cho ấu trùng hầu TBD. Lơ 4: cung cấp 3 lồi tảo Isochrysis sp. + Chaetoceros muelleri + Nannochloropsis sp. cho ấu trùng hầu TBD Bỏ đi, ko cần thiết . Mật độ cho ăn: 6.000 – 40.000 tb/ml. Giai đoạn đầu cho ăn từ 6.000 – 7.000 tb/ml sau đĩ tăng dần lên theo sự phát triển của ấu trùng hầu. Cho ăn 2 lần/ngày. Thay nước: 30%, 2 ngày/lần. Theo dõi các yếu tố mơi trường (nhiệt độ, pH, độ mặn) ngày 2 lần: sáng 7h30, chiều 14h30 bằng các dụng cụ đo chuyên dùng. pH: sử dụng máy đo pH điện tử cĩ độ chính xác 0,01. Độ mặn: đo bằng tỷ trọng kế cĩ độ chính xác 1‰. Nhiệt độ: đo bằng nhiệt kế thủy ngân cĩ độ chính xác 10C. Theo dõi mật độ của ấu trùng hầu 2 ngày 1 lần vào buổi sáng. Phương pháp thu thập và xử lý số liệu. Phương pháp thu thập số liệu: Phương pháp tính mật độ tảo: Sử dụng buồng đếm hồng cầu. Hình 1: Buồng đếm hồng cầu. + Cách đếm: lắc đều mẫu tảo đã cố định bằng formol 4%, dùng pipet nhỏ một ít dung dịch tảo vào vị trí buồng đếm, đặt nhẹ lamen lên trên, để ổn định 3-4 phút cho tảo lắng xuống và đếm dưới kính hiển vi. + Cơng thức tính mật độ tảo: X = xi x 400 x 104 (tế bào/ml) Trong đĩ: X: mật độ tảo (tế bào/ml). xi: số tế bào tảo đếm được trong một ơ nhỏ của buồng đếm. + Cơng thức tính tốc độ tăng trưởng tương đối của quần thể tảo: µ Nt: mật độ tảo ngày hơm sau. N0: mật độ tảo ngày hơm trước. Theo dõi các yếu tố mơi trường (nhiệt độ, độ mặn, pH) ngày 2 lần: sáng 7h00, chiều 14h00. Phương pháp xác định mật độ ấu trùng: Dùng cốc đốt lấy 10ml nước mẫu, lấy pipet nhỏ một ít formol và xoay theo chiều kim đồng hồ cho ấu trùng lắng xuống đáy. Dùng pipet hút ấu trùng cho vào buồng đếm động vật rồi đếm tồn bộ ấu trùng trong mẫu trên kính hiển vi. Hình 2: Buồng đếm động vật. Tỉ lệ sống của ấu trùng = (%) N1: Tổng số ấu trùng lần kiểm tra trước. N2: Tổng số ấu trùng lần kiểm tra sau. Theo dõi sự sinh trưởng của ấu trùng 2 ngày/lần bằng cách dùng thước đo kính hiển vi. Kích thước ấu trùng = x x 1000 (µm) Trong đĩ: n: số vạch trên thước đo kính hiển vi. a: độ bội của kính. Tốc độ tăng trưởng tuyệt đối trung bình ngày về chiều dài của ấu trùng (µm/con/ngày). DGL = Trong đĩ: L1 là chiều dài đo ở thời điểm t1 L2 là chiều dài đo ở thời điểm t2 Xử lí số liệu Áp dụng phương pháp thống kê sinh học, sử dụng phần mềm MS-Excel 2003. Giá trị trung bình: Giá trị trung bình: = Sử dụng chương trình ANOVA một yếu tốThêm tên đầy đủ của Anova) (…) Độ lệch chuẩn (σ) sử dụng hàm STDEV Độ lệch chuẩn: = Trong đĩ: N là tổng số cá thể trong mẫu xi là giá trị cá thể thứ i là giá trị trung bình Nước biển lọc sạch Nuơi sinh khối tảo Nguồn bố mẹ từ các trại nuơi hầu ở Vũng Tàu Ảnh hưởng của tảo đến sự sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu (giai đoạn ấu trùng chữ D đến ấu trùng điểm mắt) Kích thích sinh sản Lơ 4 Lơ 3 Lơ 1 Lơ 2 So sánh sự sinh trưởng và tỉ lệ sống Lồi (1) Lồi (3) Lồi (2) Sơ đồ khối nội dung của đề tài Phần IV: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Gây nuơi sinh khối tảo. Bảng 4: Tốc độ tăng trưởng tương đối của 3 lồi tảo Nannochloropsis sp., Isochrysis sp., Chaetoceros sp. Ngày nuơi Nannochloropsis sp. Isochrysis sp. Chaetoceros sp. 2 0.223 0.693 0.875 3 0.247 0.916 0.773 4 0.669 1.099 0.901 5 0.732 0.182 0.090 6 0.160 0.166 -0.560 7 0.064 -0.382 -0.288 Bảng 4 cho chúng ta thấy được tảo Nannochloropsis sp. cĩ tốc độ tăng trưởng tương đối nhanh và lâu dàiVà thời gian phát triển dài hơn hơn so với hai lồi tảo Isochrysis sp. và Chaetoceros sp. Tốc độ tăng trưởng của tảo Nannochloropsis sp. cao nhất vào ngày nuơi thứ 5 (µ = 0.732) và giảm dần ở các ngày nuơi tiếp theo. Tốc độ tăng trưởng cao nhất của tảo Isochrysis sp. vào ngày nuơi thứ tư (µ = 1.099) và thấp nhất vào ngày nuơi thứ 7 với tốc độ tăng trưởng âm (µ = -0.382) sau khi tảo đạt mật độ cực đại. Trong khi đĩ, tảo Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng cao nhất vào ngày nuơi thứ tư (µ = 0.901) và thấp nhất vào ngày nuơi thứ 6 với tốc độ tăng trưởng âm (µ = -0.560). Hình 3: Đường cong sinh trưởng của các quần thể tảo gây nuơi sinh khối. Qua hình 3 thể hiện rõ: tảo Nannochloropsis sp. cĩ mật độ luơn cao hơn hai lồi tảo Isochrysis sp. và Chaetoceros sp.. và tăng mạnh bắt đầu từ ngày thứ 4 của quá trình nuơi. Tốc độ phát triển của hai lồi tảo Isochrysis sp. và Chaetoceros sp. tăng chậm từ ngày thứ nhất đến ngày thừ năm và đồng đều hơn so với tảo Nannochloropsis sp. Sang ngày thứ năm thì mật độ của tảo Chaetoceros sp. cĩ xu hướng giảm trong khi tảo Isochrysis sp. thì vẫn tăng nhẹ cho đến ngày thứ 6. Tảo Isochrysis sp. đạt mật độ cực đại 680x103 tb/ml vào ngày nuơi thứ 6, tuy nhiên tảo Chaetoceros sp. đạt mật độ cực đại 560x103 tb/ml vào ngày nuơi thứ 5. Kết quả thí nghiệm này phù hợp với kết quả nghiên cứu của Hà Đức Thắng (2005) và một số tác giả khác khi nghiên cứu sự sinh trưởng của tảo sử dụng mơi trường F2. Bảng 5: Sự biến động mơi trường trong các ngày nuơi tảo. Ngày nuơi Nhiệt độ (0C) pH Sáng Chiều Biên độ Sáng Chiều Biên độ 1 26 29 3 7.80 7.93 0.13 2 26 30 4 8.13 8.43 0.30 3 26 31 5 8.18 8.65 0.47 4 26 28 2 8.23 8.57 0.34 5 25 26 1 8.12 8.47 0.35 6 25 26 1 8.02 8.38 0.36 7 24 29 5 8.01 8.45 0.44 Qua bảng 5 cho thấy: sự biến động mơi trường trong ngày khi nuơi sinh khối tảo ngồi trời là khá lớn. Tảo Nannochloropsis sp. là lồi rộng nhiệt nên tảo vẫn cĩ thể sinh trưởng và phát triểnở nhiệt độ nào? . Nhưng khoảng nhiệt độ này lại khơng thích hợp lắmBỏ từ này đi cho hai lồi tảo Isochrysis sp. và Chaetoceros sp. Theo nhiều nghiên cứu về ảnh hưởng của nhiệt độ đối với sự phát triển của tảo thì hai lồi tảo Isochrysis sp. và Chaetoceros sp là lồi hẹp nhiệt Hẹp hhiệt phải ghi phù hợp trong khoảng nào? . pH sáng luơn thấp hơn pH chiều, do buổi chiều nhiệt độ tăng, ánh sáng mạnh, tảo hấp thụ CO2 mạnh. Ảnh hưởng của các lồi tảo đơn bào đến tốc độ sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương. Trong bể xuất hiện ấu trùng chữ D, ba ngày sau Nên ghi: sau khi xuất hiện ấu trùng chữ D được 3 ngày thì. tiến hành bố trí…. bắt đầu bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của các lồi tảo đơn bào đến tốc độ sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương. Bảng 6: Sự biến động mơi trường trong các ngày nuơi ấu trùng. Ngày nuơi Nhiệt độ (0C) Độ mặn (‰) pH Sáng Chiều Biên độ Sáng Chiều Biên độ Sáng Chiều Biên độ 1 27.0 28.0 1.0 30 30 8.01 8.20 0.19 2 27.5 28.0 0.5 30 30 8.02 8.21 0.19 3 27.5 28.0 0.5 30 30 8.02 8.23 0.21 4 27.0 28.0 1.0 30 30 8.01 8.25 0.24 5 27.5 28.0 0.5 30 30 8.02 8.26 0.24 6 27.0 28.0 1.0 29 29 8.00 8.25 0.25 7 28.0 28.5 0.5 29 29 8.04 8.30 0.26 8 28.0 28.5 0.5 30 30 8.05 8.32 0.27 9 28.0 28.5 0.5 30 30 8.06 8.35 0.29 10 27.0 27.5 0.5 30 30 8.04 8.30 0.26 Do các bể nuơi ấu trùng được đặt trong nhà nên sự biến động của nhiệt độ trong các lần đo là khơng đáng kể, phù hợp với sự sinh trưởng và phát triển của ấu trùng. Độ mặn và giá trị pH khơng cĩ sự biến động do nuơi trong bể ít thay nước để hạn chế sự hao hụt của ấu trùng, cho ăn và xiphong đáy bể được kiểm tra điều chỉnh thường xuyên. Bảng 7: Chiều dài trung bình của ấu trùng qua các ngày thí nghiệm. Ngày nuơi Chiều dài trung bình (µm) Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 2 87,00 ± 9,523 87,33 ± 8,277 84,00 ± 6,747 85,33 ± 8,193 4 98,33 ± 13,153 91,67 ± 12,888 98,67 ± 10,080 100,67 ± 13,374 6 116,00 ± 10,372 104,67 ± 18,144 119,67 ± 14,259 123,67 ± 15,196 8 139,33 ± 22,273 119,67 ± 18,659 148,33 ± 20,525 156,67 ± 15,830 10 151,67 ± 22,450 128,33 ± 16,833 167,33 ± 17,798 180,67 ± 11,725 Bảng 8: Tốc độ tăng trưởng trung bình theo ngày và tỷ lệ sống của ấu trùng. Ngày nuơi Tốc độ tăng trưởng trung bình (µm/con/ngày) Tỷ lệ sống của ấu trùng (%) Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 4 5.67 2.17 7.33 7.67 91.1 90.0 92.2 94.4 6 8.83 6.50 10.50 11.50 79.3 76.5 79.5 78.8 8 11.67 7.50 14.33 16.50 73.8 72.6 74.2 76.1 10 6.17 4.33 9.50 12.00 60.4 60.0 63.3 66.7 Ghi chú: Lơ 1: Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. Lơ 2: Nannochloropsis sp. + Chaetoceros sp. Lơ 3: Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. Lơ 4: Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. ( Chú ý sửa lại: Ngày thí nghiệm của hình 4 nên đặt ở vị trí như hình 5, và cĩ thể sửa lại cột đứng là tốc độc tăng trưởng chứ khơng phải tốc độ sinh trưởng), đơn vị là µm/ngày/ấu trùng) Hình 4: Biểu đồ tốc độ tăng trưởng của ấu trùng hầu ở các lơ thí nghiệm. Hình 5: Biểu đồ tỷ lệ sống của ấu trùng hầu ở các lơ thí nghiệm. Chúng ta biết rằng giá trị dinh dưỡng của các lồi tảo làm thức ăn cho ấu trùng động vật thủy sản phụ thuộc vào hàm lượng dinh dưỡng cĩ trong tảo (đặc biệt nhất là hàm lượng các chất dinh dưỡng thiết yếu chủ yếu là các acid béo chưa no mạch dài, vitamin, và khống vi lượng), kích thước tế bào cĩ phù hợp với cỡ miệng ấu trùng hay khơng, và độ dày của thành tế bào tảo (liên quan đến khả năng tiêu hĩa) (Lucas và Southgate, 2003) Qua bảng 7, bảng 8 và hình 4 ta thấy: Lơ 1- cho ăn tảo Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. và lơ 2 – cho ăn tảo Nannochloropsis sp. + Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng và tỷ lệ sống thấp hơn lơ 3 – cho ăn tảo Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. và lơ 4 cho ăn cả ba lồi tảo Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. Khi sử dụng ANOVA một yếu tố( để so sanh cái gì vĩi cái gì?), kết quả là lơ 2 tốc độ tăng trưởng thấp hơn so với lơ 3 (sự sai khác cĩ ý nghĩa P<0,05Nên ghi thêm: Kết quả thí nghiệm phù hợp với…. ). phù hợp với kết quả nghiên cứu của Hà Đức Thắng. Tác giả cho rằng Bỏ phần này và ghi: là: tảo Nannochloropsis sp. do thành tế bào dày, khĩ tiêu hĩa và dinh dưỡng thấp nên ảnh hưởng đến khả năng tiêu hĩa của ấu trùng, ấu trùng sinh trưởng chậm hơn lơ 3 khi cho ăn hai lồi tảo Isochrysis sp. và Chaetoceros sp.. Trong 3 lồi tảo này thì Isochrysis sp. cĩ hàm lượng dinh dưỡng cao nhất. Lơ 4 sử dụng hỗn hợp tảo cho tốc độ tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng cao nhất phù hợp với các kết quả nghiên cứu của Ngơ Anh Tuấn (2005), Nguyễn Thị Xuân Thu (1995), Châu Văn Thanh (1998) khi sử dụng hỗn hợp tảo tươi cho ấu trùng động vật thân mềm. Điều đĩ được giải thích như sau: việc cho ăn hỗn hợp ba lồi tảo chắc chắn sẽ cung cấp đầy đủ hơn các thành phần dinh dưỡng thiết yếu nên kết quả ấu trùng lớn nhanh hơn. Phần V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN Kết luận: Qua quá trình thực tập tơi đưa ra một số kết luận như sau: Nuơi sinh khối tảo: Tốc độ tăng trưởng của tảo Nannochloropsis sp. cao nhất vào ngày nuơi thứ 5 (µ = 0.732) và giảm dần ở các ngày nuơi tiếp theo. Tốc độ tăng trưởng cao nhất của tảo Isochrysis sp. vào ngày nuơi thứ tư (µ = 1.099) và thấp nhất vào ngày nuơi thứ 7 với tốc độ tăng trưởng âm (µ = -0.382) sau khi tảo đạt mật độ cực đại. Tảo Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng cao nhất vào ngày nuơi thứ tư (µ = 0.901) và thấp nhất vào ngày nuơi thứ 6 với tốc độ tăng trưởng âm (µ = -0.560). Ảnh hưởng của thức ăn đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng hầu Thái Bình Dương: Lơ cho ăn cả ba lồi tảo Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng và tỷ lệ sống cao hơn khi sử dụng kết hợp hai lồi tảo. Tốc độ tăng trưởng và tỷ lệ sống của các lơ sau 10 ngày thí nghiệm: Lơ 1- cho ăn tảo Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. cĩ tốc độ tăng trưởng 6,47 (µm/con/ngày) và tỷ lệ sống 60,4%. Lơ 2 – cho ăn tảo Nannochloropsis sp. + Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng 4,10 (µm/con/ngày) và tỷ lệ sống 60,0%. Lơ 3 – cho ăn tảo Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng 8,33 (µm/con/ngày) và tỷ lệ sống 63,3%. Lơ 4 cho ăn cả ba lồi tảo Nannochloropsis sp. + Isochrysis sp. + Chaetoceros sp. cĩ tốc độ tăng trưởng 9,53 (µm/con/ngày) và tỷ lệ sống 66,7%. Đề xuất ý kiến: Cần cĩ các bể composite cĩ thể tích lớn hơn để nuơi tảo và ấu trùng để thu được kết quả tốt hơn.NÊN XEM LẠI ĐỀ XUẤT NÀY: CĨ LỄ NÊN ĐỀ XUẤT: Trong sản xuất giống nhuyễn thể để đạt kết quả tốt cân cĩ nhiều hệ thống nuơi cấy tảo hơn. Cĩ nhiều bể nuơi ấu trùng với thể tích lớn hơn để sản xuất ấu trùng với số lượng lớn. Cần phải xử lý nước thật kỹ trước khi cấy tảo để hạn chế tối đa nguyên sinh động vật. Nên sử dụng các dụng cụ thu mẫu, dụng cụ cấy tảo riêng để hạn chế khả năng nhiễm tạp. Khu vực nuơi sinh khối tảo ngồi trời cần phải cĩ nhiều ánh sáng nhưng nhiệt độ khơng quá cao để tảo cĩ thể sinh trưởng và phát triển tốt. Hệ thống cấp nước biển lọc sạch cần đầy đủ và thuận tiện để tiến hành nuơi ấu trùng đạt hiệu quả cao. TÀI LIỆU THAM KHẢO Châu Văn Thanh, 1998. Một số đặc điểm sinh học sinh sản và thử nghiệm sinh sản nhân tạo vẹm vỏ xanh Chloromytilus viridis (Linné, 1758). Luận văn thạc sĩ. Trường Đại học Thủy Sản. Đồng Xuân Vĩnh, 2004. Kết quả tiếp nhận cơng nghệ nuơi và sản xuất giống hầu biển Crassostrea gigas. Báo cáo dự án, Hải Phịng. Gosling, E., 2003. Bivalve Molluscs: Biology, Ecology and Culture. Blackwell Publishing. 442pp. Gregory, A.D., 2008. Protocol for using Epinephrine to make cultchless spat. Haskin Shellfish Research Lab, Cape Shore Laboratory, New Jersey, US. GS.TS. Nguyễn Trọng Nho, TS. Tạ Khắc Thường, ThS. Lục Minh Diệp, 2006. Kỹ thuật nuơi giáp xác. Nhà xuất bản nơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh, tr. 92 – 95. Hà Đức Thắng, 2005. Nghiên cứu cơng nghệ sản xuất giống và nuơi hầu Crassostrea sp. thương phẩm. Báo cáo tổng kết đề tài nghiên cứu khoa học và cơng nghệ. Hải Phịng. Hà Lê Thị Lộc, 2000. Ảnh hưởng của một số yếu tố sinh thái lên sự phát triển của tảo Tetraselmis sp. và Nannochloropsis oculata (Droop), Hibber 1981 tại Nha Trang. Luận văn thạc sĩ. Trường Đại Học Thủy Sản. Hà Lê Thị Lộc, Trương Sĩ Kỳ, Lê Thị Hồng và Nguyễn Thanh Tùng, 2001. Tình hình nuơi động vật thân mềm vùng biển từ Thừa Thiên Huế đến Bình Thuận. Tuyển tập báo cáo khoa học hội thảo động vật thân mềm tồn quốc lần thứ hai tổ chức tại Nha Trang, tr. 155 – 166. Hà Quang Hiến, 1983. Kỹ thuật nuơi hải sản (phần nuơi nhuyễn thể). Nhà xuất bản nơng thơn. Hồng Thị Bích Mai, 1995. Sinh sản sinh trưởng và cơ sở khoa học của quy trình kỹ thuật nuơi sinh khối tảo silic Skeletonema costatum, Grevilleve, Chaetoceros sp. làm thức ăn cho ấu trùng tơm sú Penaeus monodon Fabricus. Luận văn thạc sĩ. Trường Đại Học Thủy Sản. Lê Đức Minh và Nguyễn Văn Chung., 2001. Kết quả nuơi thử nghiệm một số lồi động vật thân mềm và da gai ở vịnh Nha Trang. Tuyển tập báo cáo khoa học hội thảo động vật thân mềm tồn quốc lần thứ hai tổ chức tại Nha Trang, tr. 209 – 213. Lục Minh Diệp, 1999. Nghiên cứu ảnh hưởng của tỷ lệ phân bĩn (N, P, K), tỷ lệ thu hoạch lên sự phát triển của hỗn hợp tảo tự nhiên và thử nghiệm nuơi tảo Nannochloropsis oculata (Droop), Hibber 1981. Luận văn thạc sĩ. Trường Đại Học Thủy Sản. Lucas, S.J., Southgate, P.C., 2003. Aquaculture Farming Aquatic Animals and Plants. Blackwell Publishing, Oxford, 502 pp. Mai Thị Thùy Linh, 2004. Kỹ thuật nuơi thu sinh khối hai lồi tảo Nannochloropsis oculata và Isochrysis galbana ở quy mơ túi nylon 50l và 2m3. Luận văn tốt nghiệp. Trường Đại Học Thủy Sản. Ngơ Anh Tuấn, 2005. Đặc điểm sinh học sinh sản và thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo điệp seo Comptopallium radula (Linnaeus, 1758). Luận án tiến sĩ nơng nghiệp. Trường Đại học Thủy Sản. Nguyễn Chính, 1996. Một số động vật nhuyễn thể (Mollusca) cĩ giá trị kinh tế ở biển Việt Nam. NXB Khoa học kỹ thuật Việt Nam. Nguyễn Thị Xuân Thu và ctv (2002). Đặc điểm sinh học sinh kỹ thuật sản xuất giống và nuơi ốc hương. Nhà xuất bản nơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh. Nguyễn Thị Xuân Thu, 1995. Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và thí nghiệm sản xuất giống nhân tạo điệp quạt Chlamys nobilis (Reeve). Luận án cao học. Trường Đại học Thủy Sản. Nguyễn Văn Chung, 2001. Thành phần lồi và phân bố của động vật thân mềm hai vỏ (Bivalvia) trong đầm phá Nam Trung Bộ - Việt Nam. Trích trong tuyển tập báo cáo khoa học hội thảo động vật thân mềm tồn quốc lần thứ hai tổ chức tại Nha Trang, tr. 66 – 69. Spencer, B.E., 2002. Molluscan shellfish farming. Blackwell science publishing. Oxford. Pp: 123 – 147. PHỤ LỤC Bảng 1: Mật độ ba lồi tảo sau 7 ngày theo dõi. Ngày Nannochloropsis sp. Isochrysis sp. Chaetoceros sp. 1 320 32 40 2 400 64 96 3 512 160 208 4 1000 480 512 5 2080 576 560 6 2440 680 320 7 2600 464 240 Bảng 2: Mật độ ấu trùng qua các ngày thí nghiệm. Ngày thí nghiệm Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 2 9 9 9 9 4 8.2 8.1 8.3 8.5 6 6.5 6.2 6.6 6.7 8 4.8 4.5 4.9 5.1 10 2.9 2.7 3.1 3.4 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Lơ 1 4 32.34 8.085 7.635567 Lơ 2 4 20.5 5.125 5.631767 Lơ 3 4 41.66 10.415 8.562967 Lơ 4 4 47.67 11.9175 13.07389 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 105.2582 3 35.08607 4.020843 0.034088 3.490295 Within Groups 104.7126 12 8.726048 Total 209.9708 15 Bảng 3: Chiều dài ấu trùng đo ngày thí nghiệm 2; 4; 6 (µm). Ngày STT Ngày 2 Ngày 4 Ngày 6 Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 1 80 90 80 90 120 80 100 100 130 120 120 90 2 100 100 90 90 80 110 90 80 110 80 100 130 3 90 90 80 80 120 90 80 90 130 110 110 130 4 90 90 90 80 80 90 100 90 120 130 130 120 5 90 90 90 90 110 100 90 100 120 130 140 120 6 70 80 90 70 90 110 100 100 110 100 110 100 7 80 90 80 80 100 90 90 120 130 140 120 100 8 70 100 70 90 90 80 110 110 120 110 110 140 9 80 80 80 80 90 80 100 90 100 120 140 120 10 90 90 80 80 100 110 80 90 130 140 120 110 11 100 80 90 90 80 80 100 100 110 110 110 100 12 80 80 80 90 100 80 90 100 110 90 150 130 13 90 80 90 80 90 100 110 100 100 100 100 120 14 80 90 80 90 90 90 100 90 120 80 140 110 15 90 70 90 90 100 80 110 90 130 90 120 110 16 80 90 90 100 100 80 90 100 110 110 100 120 17 100 90 90 90 90 110 100 120 100 90 130 110 18 100 100 70 80 90 80 110 90 120 120 150 130 19 90 90 90 70 100 90 90 110 100 120 100 150 20 80 90 80 80 90 80 120 100 100 100 110 130 21 90 90 80 90 90 90 110 80 110 110 120 120 22 100 80 90 80 90 80 110 130 110 80 110 140 23 80 80 90 70 120 100 110 110 120 80 110 140 24 80 80 80 100 110 110 90 130 110 90 120 130 25 70 90 90 90 120 110 100 110 120 90 130 140 26 80 100 90 90 90 80 110 120 130 110 120 120 27 100 80 70 90 110 80 100 90 120 90 110 130 28 90 70 80 80 120 120 90 100 130 80 120 150 29 100 100 80 80 110 90 90 90 110 100 130 140 30 90 90 90 100 80 80 90 90 120 120 110 130 Ngày Ngày 8 Ngày 10 STT Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 Lơ 1 Lơ 2 Lơ 3 Lơ 4 1 100 100 120 140 150 110 130 180 2 140 110 130 150 110 100 180 170 3 130 120 150 130 100 120 160 190 4 110 110 170 150 150 110 170 200 5 200 130 130 170 140 140 140 190 6 140 120 120 150 120 150 160 180 7 130 130 140 160 110 100 150 160 8 120 120 130 150 140 160 180 170 9 120 140 170 140 130 120 140 180 10 150 130 120 150 150 110 170 190 11 150 100 130 130 170 130 150 170 12 140 90 120 150 160 110 170 180 13 170 100 160 140 150 100 160 200 14 120 110 140 160 140 120 170 190 15 170 120 160 150 150 130 140 170 16 150 110 160 160 160 140 170 180 17 170 130 150 180 170 120 200 190 18 130 140 130 170 180 140 190 170 19 140 180 140 160 160 130 170 190 20 130 130 150 150 170 150 190 170 21 180 110 140 140 180 140 170 180 22 150 100 130 160 150 130 180 160 23 110 110 160 180 160 150 150 190 24 120 120 170 150 180 120 160 200 25 140 150 160 200 150 130 170 180 26 130 130 170 150 170 120 200 170 27 140 110 150 180 200 150 160 170 28 150 120 200 170 160 130 180 180 29 130 130 180 160 140 140 190 170 30 120 90 170 170 150 150 170 200 Bảng 4: Chiều dài ấu trùng đo ngày thí nghiệm 8; 10 (µm) Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Lơ 2 4 20.5 5.125 5.631767 Lơ 3 4 41.66 10.415 8.562967 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 55.9682 1 55.9682 7.88577 0.030831 5.987378 Within Groups 42.5842 6 7.097367 Total 98.5524 7