Tài liệu Đề tài Phương pháp nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-Vitro: GIÔÙI THIEÄU VEÀ TAØI LIEÄU
Tài liệu bạn đang xem được download từ website
WWW.AGRIVIET.COM
WWW.MAUTHOIGIAN.ORG
»Agriviet.com là website chuyên đề về nông nghiệp nơi liên kết mọi thành viên
hoạt động trong lĩnh vực nông nghiệp, chúng tôi thường xuyên tổng hợp tài liệu về tất cả
các lĩnh vực có liên quan đến nông nghiệp để chia sẽ cùng tất cả mọi người. Nếu tài liệu
bạn cần không tìm thấy trong website xin vui lòng gửi yêu cầu về ban biên tập website để
chúng tôi cố gắng bổ sung trong thời gian sớm nhất.
»Chúng tôi xin chân thành cám ơn các bạn thành viên đã gửi tài liệu về cho chúng tôi.
Thay lời cám ơn đến tác giả bằng cách chia sẽ lại những tài liệu mà bạn đang có cùng
mọi người. Bạn có thể trực tiếp gửi tài liệu của bạn lên website hoặc gửi về cho chúng tôi
theo địa chỉ email Webmaster@Agriviet.Com
Lưu ý: Mọi tài liệu, hình ảnh bạn download từ website đều thuộc bản quyền của tác giả,
do đó chúng tôi không chịu trách nhiệm về bất kỳ khía cạnh nào có liên q...
42 trang |
Chia sẻ: hunglv | Lượt xem: 1179 | Lượt tải: 0
Bạn đang xem trước 20 trang mẫu tài liệu Đề tài Phương pháp nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-Vitro, để tải tài liệu gốc về máy bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
GIÔÙI THIEÄU VEÀ TAØI LIEÄU
Tài liệu bạn đang xem được download từ website
WWW.AGRIVIET.COM
WWW.MAUTHOIGIAN.ORG
»Agriviet.com là website chuyên đề về nông nghiệp nơi liên kết mọi thành viên
hoạt động trong lĩnh vực nông nghiệp, chúng tôi thường xuyên tổng hợp tài liệu về tất cả
các lĩnh vực có liên quan đến nông nghiệp để chia sẽ cùng tất cả mọi người. Nếu tài liệu
bạn cần không tìm thấy trong website xin vui lòng gửi yêu cầu về ban biên tập website để
chúng tôi cố gắng bổ sung trong thời gian sớm nhất.
»Chúng tôi xin chân thành cám ơn các bạn thành viên đã gửi tài liệu về cho chúng tôi.
Thay lời cám ơn đến tác giả bằng cách chia sẽ lại những tài liệu mà bạn đang có cùng
mọi người. Bạn có thể trực tiếp gửi tài liệu của bạn lên website hoặc gửi về cho chúng tôi
theo địa chỉ email Webmaster@Agriviet.Com
Lưu ý: Mọi tài liệu, hình ảnh bạn download từ website đều thuộc bản quyền của tác giả,
do đó chúng tôi không chịu trách nhiệm về bất kỳ khía cạnh nào có liên quan đến nội
dung của tập tài liệu này. Xin vui lòng ghi rỏ nguồn gốc “Agriviet.Com” nếu bạn phát
hành lại thông tin từ website để tránh những rắc rối về sau.
Một số tài liệu do thành viên gửi về cho chúng tôi không ghi rỏ nguồn gốc tác giả,
một số tài liệu có thể có nội dung không chính xác so với bản tài liệu gốc, vì vậy nếu bạn
là tác giả của tập tài liệu này hãy liên hệ ngay với chúng tôi nếu có một trong các yêu cầu
sau :
• Xóa bỏ tất cả tài liệu của bạn tại website Agriviet.com.
• Thêm thông tin về tác giả vào tài liệu
• Cập nhật mới nội dung tài liệu
www.agriviet.com
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Môû ñaàu
PHAÀN I: GIÔÙI THIEÄU
Trong nhöõng naêm gaàn ñaây vôùi chính saùch môû roäng ñaàu tö veà moïi maët cuûa Nhaø
nöôùc, ñôøi soáng vaät chaát vaø tinh thaàn cuûa ngöôøi daân ngaøy caøng ñöôïc caûi thieän vaø naâng
cao. Song song vôùi nhu caàu veà vaät chaát thì nhu caàu tinh thaàn ñaëc bieät khoâng theå thieáu
ñöôïc. Töø laâu con ngöôøi ñaõ thích troàng hoa, caây caûnh vöøa ñeå trang trí cho ñeïp, vöøa ñeå
giaûi trí tinh thaàn. Moãi ngöôøi thích troàng moät loaøi hoa khaùc nhau, vieäc löïa choïn loaøi hoa
naøo thöôøng tuyø thuoäc vaøo ñieàu kieän khí haäu cuûa vuøng ñoù, veû ñeïp cuûa hoa, cuõng nhö laø
hoa ñoù coù deã troàng vaø chaêm soùc hay khoâng. Hoa lan ñöôïc nhieàu ngöôøi öa thích, bôûi leõ
hoa lan coù caáu truùc kieâu kì vaø phöùc taïp, nhaát laø boä phaän moâi coù nhöõng neùt chaïm troå raát
tinh vi, laïi raát phuø hôïp vôùi ñieàu kieän khí haäu cuûa Vieät Nam, deã chaêm soùc vaø moãi ngöôøi
coù theå choïn loaïi hoa lan mình thích tuyø theo tuùi tieàn cuûa mình maø vaãn thoaû maõn ñöôïc
thuù vui tao nhaõ.
Phong lan ôû nöôùc ta raát phong phuù vaø ña daïng, coù nhieàu gioáng khaùc nhau nhö:
Cattleya, Phalaenopsis, Oncidium, Mokara, Vanda, Dendrobium… chuùng ñeàu cho hoa
raát ñeïp vaø mang nhieàu maøu saéc khaùc nhau. Noù coù theå duøng ñeå trang trí, tröng baøy, laøm
ñeïp, duøng trong caùc buoåi leã… hay ngöôøi ta coù theå baùn hoa caét caønh-kinh doanh. Trong
soá ñoù coù leõ Dendrobium laø gioáng ñaëc saéc nhaát töø maøu saéc, daïng hoa cho ñeán gioáng loaøi.
Maëc khaùc, Dendrobium cuõng raát deã troàng, raát sieâng hoa vaø laâu taøn. Do ñoù noù raát ñöôïc
öa chuoäng vaø ñöôïc troàng phoå bieán nhaát nöôùc ta hieän nay nhaèm phuïc vuï cho nhu caàu
cuoäc soáng.
Caùc nhaø troàng lan khoâng ngöøng tìm kieám caùc gioáng lan môùi ñeå thoõa maõn söï
hieáu kì cuûa mình hoaëc coù theå ñem baùn. Coù hai caùch ñeå coù ñöôïc gioáng lan môùi. Moät laø,
söu taäp nhöõng gioáng lan hoang daïi trong röøng ñem veà thuaàn hoùa, taïo caùc ñieàu kieän
nhaân taïo gioáng töï nhieân ñeå caây lan coù theå ra hoùa. Phöông phaùp naøy gaëp nhieàu ruûi ro do
ñieàu kieän moâi tröôøng khoâng thuaän lôïi cho caây lan phaùt trieån. Hai laø, taïo ra nhöõng gioáng
lan lai môùi, caây lan lai seõ mang nhöõng ñaëc tính toát vöïôt troäi cuûa caû boá meï, coù theå thoûa
maõn ñöôïc nhu caàu cuûa ngöôøi thöôûng thöùc lan. Tuy nhieân khi hai caây lan lai vôùi nhau
ñaït keát quaû vaø taïo traùi caàn phaûi keát hôïp vôùi phöông phaùp gieo haït trong oáng nghieäm ñeå
haït lan coù theå naåy maàm deã daøng. Coù nhö vaäy môùi coù theå kieåm tra keát quaû cuûa vieäc lai
hai caây lan.
Xuaát phaùt töø nhu caàu thöïc tieãn, trong phaïm vi ñeà taøi naøy chuùng toâi tieán haønh
nghieân cöùu:
Nhaân gioáng lan Dendrobium baèng phöông phaùp gieo haït in-vitro.
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 1
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 2
PHAÀN II: TOÅNG QUAN TAØI LIEÄU
I. Giôùi thieäu hoï lan:
1.1 Ñaëc ñieåm chung:
Caùc hoï lan ñöôïc ñaùnh giaù laø moät trong nhöõng loaøi hoa cao caáp trong vöông quoác
thaûo moäc, bao goàm hôn 25.000 ngaøn loaøi khaùc nhau, cuøng vôùi nhöõng loaøi môùi ñöôïc
khaùm phaù vaø moâ taû theo töøng naêm. Do bôûi chuùng ñöôïc phaân boá vuøng roäng lôùn, traûi
daøi töø ñöôøng xích ñaïo cho ñeán Baéc cöïc, töø ñoàng baèng cho ñeán caùc vuøng nuùi baêng
tuyeát, caùc loaøi lan raát khaùc bieät nhau: Lan ñaát (phaùt trieån moïc trong ñaát khaùng
nöôùc); thöïc vaät bieåu sinh hoaëc thöïc vaät phuï sinh (phaùt trieån phía treân maët ñaát hoaëc
soáng baùm treân caùc loaïi thaûo moäc khaùc, thu huùt chaát dinh döôõng vaø nöôùc töø moâi
tröôøng xung quanh); thöïc vaät phaùt trieån treân maët ñaù hoaëc ngay caû döôùi maët ñaát
(phaùt trieån döôùi beà maët cuûa moâi tröôøng caáy troàng).
Nhöõng nhaø saùng laäp ngaønh Lan hoïc ñaùng keå laø trieát gia ngöôøi Hy Laïp
Theophrastus (372-287 tröôùc Coâng nguyeân) vaø sau naøy laø nhaø thöïc vaät hoïc ngöôøi
Thuïy Ñieån Linnaeus (1707-1778). Chính Theophrastus laø ngöôøi ñaàu tieân söû duïng töø
Hy Laïp “Orchis” ñeå chæ nhoùm Lan [4].
1.2 Ñaëc ñieåm hình thaùi:
1.2.1 Cô quan dinh döôõng:
Giaû haønh (thaân giaû): chæ xuaát hieän treân caùc loaøi lan ña thaân. Giaû haønh laø
boä phaän raát caàn thieát cho söï sinh tröôûng vaø phaùt trieån cuûa lan. Giaû haønh
tuy laø thaân nhöng laïi chöùa dieäp luïc, ñaây laø boä phaän döï tröõ nhieàu chaát
dinh döôõng raát caàn thieát cho söï phaùt trieån cuûa giaû haønh môùi. Giaû haønh
cuõng laø cô quan döï tröõ nöôùc[11].
Thaân: Thaân vaåy giaû coù nhieàu hình daùng khaùc nhau tuøy theo gioáng lan.
Treân thaân coù ñoát, treân moãi ñoát moïc moät nhaùnh laù hoaëc laù bao. Thaân laø cô
quan döï tröõ nöôùc vaø chaát dinh döôõng, maàm hoa vaø maàm laù ñeàu moïc töø
phaàn goác cuûa boä phaän thaân reã[12]. Chæ coù caùc loaøi ñôn thaân vaø moät soá
loaøi cuûa gioáng Dendrobium vaø Epidendrum vöøa coù giaû haønh, vöøa coù thaân.
Caùc loaøi lan coù thaân thöôøng khoâng coù cô quan döï tröõ nöôùc vaø chaát dinh
döôõng[11].
Laù: laø cô quan dinh döôõng cuûa hoa lan, laø xöôûng cheá taïo chaát dinh döôõng
baèng quang hôïp. Phieán laù thöôøng coù hình löôõi kieám daøi, soá löôïng vaø hình
daïng laù khaùc nhau tuøy chuûng loaïi lan khaùc nhau [12]. Laù coù theå moïc ñoái
xöùng qua gaân chính hay khoâng, laù saùt nhau ôû goác hay xeáp caùch coù beï uùp
leân nhau, chia ñoát ñeàu ñaën, coù khi thoaùi hoùa thaønh vaåy hay phình leân,
moïng nöôùc, hình daïng raát khaùc nhau [11].
Caên haønh (thaân-reã): chæ gaëp ôû lan ña thaân. Caên haønh laø nôi caáu taïo caùc
cô quan dinh döôõng môùi, treân caên haønh coù nhieàu maét soáng, cheát hoaëc
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 3
höu nieân. Maét laù nôi hình thaønh cuõng mang raát nhieàu reã ñeå nuoâi soáng
caây lan [11].
Reã: ôû lan ña thaân, reã thöôøng ñöôïc hình thaønh töø caên haønh. Ôû caùc loaøi ñôn
thaân thì reã moïc thaúng töø thaân vaø thöôøng xen keõ vôùi laù. Reã treân khoâng cuûa
caùc loaøi lan phuï sinh coù moät truïc chính bao quanh bôûi moâ khoâng chaët,
gioáng boït bieån bao quanh goïi laø maïc. Maïc coù theå haáp thuï hôi nöôùc cuûa
khoâng khí, cuõng nhö tích tröõ nöôùc möa vaø söông ñoïng [11].
1.2.2 Cô quan sinh saûn:
Hoa: taäp hôïp thaønh cuïm hoa chuøm hay boâng. Hoa löôõng tính, ñoái xöùng
hai beân. Bao hoa daïng caùnh, rôøi nhau, xeáp thaønh 2 voøng: 3 maûnh voøng
ngoaøi (ñaøi hoa) vaø 2 maûnh voøng trong (caùnh hoa) beù hôn maûnh thöù 3 ôû
voøng trong. Maûnh naøy coù hình daïng vaø maøu saéc khaùc haún, goïi laø caùnh
moâi [13].
Quaû: khi khoâ, môû thaønh 3-6 maûnh. Haït raát nhoû vaø nhieàu, thöôøng khoâng
coù noäi nhuõ. Do nheï neân haït deã phaùt taùn nhôø gioù. Ôû nhieàu loaøi, trong quaû
coù nhöõng loâng huùt nöôùc duøng ñeå baén haït ñi. Phoâi trong haït phaùt trieån yeáu,
khoâng phaân hoùa thaønh cô quan. Haït muoán naåy maàm caàn coù naám coäng
sinh [13].
1.3 Ñaëc ñieåm veà phaân loaïi.
Orchidaceae laø moät hoï raát lôùn thuoäc lôùp Ñôn töû dieäp, phaân boá khaép nôi treân theá
giôùi [16].
ÔÛ vuøng oân ñôùi, ta gaëp nhieàu loaøi soáng ôû ñaát nhö ñòa lan; moät soá loaøi hoaïi
sinh khoâng dieäp luïc vaø soáng nhôø vaøo chaát muïc naùt trong ñaát; coù loaøi ôû
UÙc Chaâu coù theå soáng ngaàm döôùi ñaát nhö naám.
Ôû vuøng nhieät ñôùi, ta seõ gaëp nhieàu loaøi phuï sinh soáng treân caây khaùc nhö
Cattleya, Oncidium, Laelia taäp trung nhieàu ôû vuøng Trung Myõ; ôû Ñoâng
Nam AÙ ñaëc saéc nhaát laø Dendrobium vaø coøn coù Cypripedium,
Phalaenopsis, Cymbidium coù nguoàn goác ôû Indonesia.
Moät soá loaøi lan soáng treân ñaù nhö thaïch lan.
Caây lan coù theå chia laøm hai nhoùm [11]:
Nhoùm ñôn thaân: ñaây laø nhoùm chæ taêng tröôûng veà chieàu cao laøm caây daøi
ra maõi. Nhoùm ñôn thaân chia laøm hai nhoùm phuï:
- Nhoùm phuï laù moïc ñoái (Sarcanthinae): nhoùm naøy laù ñöôïc xeáp
thaønh 2 haøng moïc ñoái nhau, laù treân moät haøng xen keû vôùi laù cuûa
haøng kia. Goàm caùc gioáng nhö: Vanda, Aerides, Phalaenopsis…
- Nhoùm phuï laù deïp thaúng hay troøn (Campylocentrinae):
Papilionanthe, Luisia…
Nhoùm ña thaân: ñaây laø nhoùm goàm nhöõng caây taêng tröôûng lieân tuïc. Caên cöù
vaøo caùch ra hoa nhoùm naøy chia thaønh 2 nhoùm phuï:
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 4
- Nhoùm ra hoa phía treân nhö: Cymbidium, Dendrobium, Oncidium…
- Nhoùm ra hoa ôû ñænh: Cattleya, Laelia, Epidendrum…
Ngoaøi ra coøn coù moät soá gioáng mang tính chaát trung gian nhö:
Centropetatum, Phachyphllum, Dichaea…
Hình 2.1: Caáu taïo cô quan sinh saûn.
a. Caáu taïo hoa chi tieát.
b. Quaû lan chín.
Hình 2.2: Moät soá gioáng hoa ñeïp cuûa hoï Orchidaceae.
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 5
II. Giôùi thieäu veà Dendrobium.
2.1 Nguoàn goác vaø söï phaân boá:
Gioáng lan naøy ñöôïc ñaët teân vaøo naêm 1799. Chöõ Dendrobium coù nguoàn goác cuûa
chöõ Hy Laïp. Dendro coù nghóa laø caây goã, caây lôùn; bio laø soáng, vì taát caû caùc loaøi cuûa
Dendrobium ñeàu laø phuï sinh soáng baùm treân caây goã [16].
Dendrobium raát phong phuù veà chuûng loaïi, nay lôùn thöù nhì cuûa hoï Lan vôùi
khoaûng 1.600 loaøi phaân boá treân caùc vuøng thuoäc chaâu AÙ nhieät ñôùi, taäp trung nhieàu
nhaát ôû Ñoâng Nam AÙ vaø UÙc chaâu [16].
Ñieàu kieän sinh thaùi cuûa Dendrobium cuõng raát ña daïng coù nhieàu loaøi chæ moïc vaø
ra hoa ôû vuøng laïnh, coù loaøi ôû vuøng noùng, coù loaøi ôû trung gian, vaø cuõng coù loaøi thích
nghi vôùi baát cöù ñieàu kieän khí haäu naøo [11].
2.2 Vò trí phaân loaïi:
Lan Dendrobium thuoäc:
- Ngaønh : Angiospermatophyta
- Lôùp : Liliopsida (Monocotyledones)
- Lôùp phuï : Liliidae
- Boä : Orchidales
- Hoï : Orchidaceae
- Gioáng : Dendrobium sp.
Hình 2.3: Toång quan veà lan Dendrobium.
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 6
2.3 Ñaëc ñieåm veà hình thaùi.
Dendrobium laø loaøi ña thaân vôùi nhieàu giaû haønh, caùc giaû haønh thöôøng mang moät
thaân vôùi nhieàu laù moïc xen keõ, treân thaân coù raát nhieàu maét nguû. Caên haønh vôùi khoaûng
caùch giöõa caùc maét ngaén hôn Cattleya. Hoa coù theå moïc töø thaân thaønh töøng chuøm hay
töøng hoa coâ ñoäc [11]. Hoa coù maøu traéng, vaøng ñeán tím. Thöôøng laù ñaøi sau naèm moät
mình, 2 laù ñaøi beân daøi ra dính laïi vôùi nhau ôû meùp döôùi vaø dính vaøo ñaùy cuûa truï taïo
thaønh moät phaàn döôùi chaân cuûa truï phía döôùi goïi laø caèm. Moâi gaén vaøo caèm, ñoâi khi
keùo daøi veà phía sau taïo thaønh cöïa, moùc hay tuùi. Moâi nguyeân hay coù thuøy, gai, soïc
coù loâng hay khoâng. 2 caùnh hoa beân gioáng nhö 2 laù ñaøi. Truï thaáp. Phaàn ñöïc cuûa ñænh
truï coù naép ñaäy, naép gaén vaøo truï nhôø 1 chæ ngaén veà phaùi sau. 4 khoái phaán nhoû dính
laïi vôùi nhau töøng caëp, khoâng vó, khoâng goùt.
Dendrobium ñöôïc chia ra laøm 2 nhoùm theo daïng thaân cuûa chuùng:
- Daïng thoøng hay Nobile laø daïng thaân meàm thöôøng ôû vuøng hôi laïnh nhö
Ñaø Laït.
- Daïng ñöùng hay Phalaenopsis laø daïng thaân cöùng thöôøng soáng ôû vuøng coù
khí haäu noùng hôn.
Caû Dendrobium nobile vaø Dendrobium phalaenopsis ñeàu coù chung ñaëc ñieåm
trong vieäc taïo laäp caùc giaû haønh môùi vaø trong söï bieät hoùa choài sô khôûi ôû naùch laù doïc
theo giaû haønh; nhöng chuùng laïi raát khaùc bieät trong vieäc trong vieäc taïo laäp choài hoa.
- Ôû Dendrobium nobile ra hoa töø choài sô khôûi cuûa giaû haønh ñaõ tröôûng
thaønh. Nhö Long tu, Giaû haïc chuùng chæ ra hoa vôùi giaû haønh ñaõ ruïng heát
laù.
- Ôû Dendrobium phalaenopsis thì hoa moïc ôû giaû haønh cuõ laãn giaû haønh môùi.
Ôû giaû haønh môùi, choài non nhaát ôû gaàn ngoïn laø choài ñaàu tieân phaùt trieån
thaønh voøi hoa.
Hình daïng cuûa Dendrobium cuõng raát bieán thieân:
- Nhoùm coù giaû haønh raát daøi vaø mang laù doïc theo chieàu daøi cuûa giaû haønh aáy,
thöôøng ruïng heát laù khi ra hoa nhö Long tu (Dendrobium primulinum), YÙ
thaûo (Dendrobium gratio sissimum)…
- Nhoùm giaû haønh to ngaén , taän cuøng thöôøng coù 2-3 laù dai, beàn, khoâng ruïng.
Phaùt hoa taäp trung ôû phaàn naøy taïo thaønh chuøm ñöùng hay thoøng nhö:
Thuûy tieân traéng (Dendrobium farmeri), Thuûy tieân vaøng (Dendrobium
thyrisflorum), Vaûy caù (Dendrobium lindleyi)…
- Nhoùm caù giaû haønh raát maûnh mai, daøi hay ngaén, coù laù doïc theo chieàu daøi
cuûa chuùng, dai beàn khoâng ruïng. Hoa thöôøng coâ ñoäc ôû naùch nhö Höông
duyeân (Dendrobium revolutum)…
Ngoaøi ra coøn coù moät soá loaøi Dendrobium khaùc cuõng thöôøng ñöôïc troàng:
- Kim ñieäp (Dendrobium chysotosum var delacuorii): Hoa vaøng töôi, moâi
vaøng döôùi trung taâm ñaäm.
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 7
- Nhaát ñieåm hoàng (Dendrobium dracoins): Hoa traéng boùng nhö saùp vôùi
moâi soïc ñoû ôû ñaùy.
- Thaïch hoäc (Dendrobium crumenatum): Hoa traéng, moâi coù bôùt vaøng, thôm
nhöng mau taøn, ít hoa nhöng nôû roä cuøng luùc.
- Giaû haïc (Dendrobium anosmum, Dendrobium superbum): Hoa maøu
höôøng, coù hai bôùt ñaäm maøu traéng hay tuyeàn. Raát thôm [16].
2.4 Caùc ñieàu kieän cô baûn ñeå nuoâi troàng lan Dendrobium sp.:
2.4.1 Nhieät ñoä.
Nhieät ñoä taùc ñoäng ôû caây lan qua con ñöôøng quang toång hôïp, cöôøng ñoä quang
hôïp gia taêng theo nhieät ñoä, thöôøng nhieät ñoä taêng 10% thì toác ñoä quang hôïp taêng leân
gaáp ñoâi. Nhieät ñoä coøn aûnh höôûng ñeán söï ra hoa ôû moät soá loaøi lan nhö lan Baïch caâu
Dendrobium crumenatum ñoøi hoûi giaûm nhieät ñoä khoaûng 5-60C trong vaøi giaây thì 9
ngaøy sau chuùng seõ nôû hoa ñoàng loaït. Ôû 18,50 Dendrobium nobile chæ taêng tröôûng maø
khoâng ra hoa nhöng chuùng seõ ra hoa khi nhieät ñoä haï xuoáng 130C hay thaáp hôn [16].
Caên cöù vaøo nhu caàu nhieät ñoä, coù theå taïm chia Dendrobium thaønh hai nhoùm
chính:
- Nhoùm öa laïnh sinh tröôûng vaø phaùt trieån toát ôû nhieät ñoä lyù töôûng laø 150C,
goàm caùc gioáng ñöôïc laáy töø caùc vuøng cao nguyeân ôû ñoä cao treân 1.000m.
caùc loaøi naøy neáu ñöôïc troàng ôû nhieät ñoä cao hôn hoaëc baèng 250C, thì caây
vaãn soáng, thì caây vaãn soáng nhöng hieám khi ra hoa.
- Nhoùm öa noùng, nhieät ñoä thích hôïp cho caùc loaøi cuûa nhoùm naøy laø 250C,
goàm ña soá caùc gioáng Dendrobium ôû vuøng nhieät ñôùi, vaø caùc loaøi cuûa gioáng
Dendrobium lai hieän ñang troàng taïi thaønh phoá Hoà Chí Minh vaø caùc tænh
phía Nam…
- Ngoaøi ra, coøn coù moät nhoùm Dendrobium trung gian coù theå soáng ôû caû
vuøng laïnh vaø vuøng noùng, nhöng ôû vuøng laïnh caây sinh tröôûng vaø ra hoa
nhieàu hôn nhö Dendrobium primulinum, Dendrobium farmeri nhieät ñoä lyù
töôûng cuûa caùc loaøi naøy laø 200C [11].
2.4.2 Aåm ñoä.
Caùc caây lan, nhaát laø phong lan, soáng baùm treân caùc caây cao, chuùng laáy nöôùc töø
caùc traän möa, töø hôi nöôùc trong khoâng khí. Chính aåm ñoä quyeát ñònh söï hieän dieän
cuûa caùc loaøi phong lan [16].
Thoâng thöôøng aåm ñoä töông ñoái toái thieåu 70% thích hôïp cho söï taêng tröôûng cuûa
nhieàu loaøi. Tuy nhieân aåm ñoä lyù töôûng vaãn laø aåm ñoä cuûa vuøng baûn xöù maø loaøi lan ñoù
ñöôïc tìm thaáy.
Dendrobium cuõng nhö ña soá caùc gioáng lan khaùc chæ phaùt trieån toát trong khoâng
khí aåm vaø thoaùng. Aåm ñoä töông ñoái caàn thieát laø 40-70%. Caáu taïo giaù theå quaù aåm vaø
uùng thì boä reã seõ bò thoái vaø bieåu hieän laø caây con keiki moïc ra töø phaàn ngoïn cuûa thaân
[11].
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 8
2.4.3 Aùnh saùng.
Aùnh saùng laø ñieàu kieän caàn thieát cho söï sinh tröôûng vaø phaùt trieån cuûa caây lan
thoâng qua quaù trình quang hôïp. Ñaây laø yeáu toá quyeát ñònh söï troå hoa cuûa lan [16].
Dendrobium laø gioáng öa saùng, coù theå troàng trong ñieàu kieän aùnh saùng tröïc tieáp
hay khueách taùn. Aùnh saùng höõu hieäu cho gioáng Dendrobium laø 70%.
Neáu thöøa aùnh saùng, caây seõ bò vaøng laù, giaû haønh bò teo laïi, caây xaáu ñi nhöng caây
seõ thích nghi daàn, vaãn ra hoa nhieàu vaø ñeïp. Neáu thieáu aùnh saùng, caây seõ bò thoaùi
hoùa roõ reät, caây eøo uoät vaø soá löôïng hoa seõ ít ñi [11].
2.4.4 Nhu caàu phaân boùn.
Dendrobium thaân ñöùng ñoøi hoûi dinh döôõng cao, chuùng caàn raát nhieàu phaân boùn
vaø coù theå duøng nhieàu daïng phaân boùn khaùc nhau. Coøn caùc loaïi Dendrobium thaân
thoøng haáp thu phaân chaäm neân phaûi duøng noàng ñoä thaät loaõng.
Caùc loaïi phaân höõu cô nhö: phaân heo, baùnh daàu khoâ, phaân toâm caù, phaân traâu boø
khoâ… coù theå duøng raát toát baèng caùch pha loaõng vôùi nöôùc roài töôùi, hoaëc voø chaët töøng
vieân ñaët treân beà maët giaù theå, reã lan seõ haáp thuï daàn daàn caùc döôõng chaát ñöôïc phoùng
thích qua quaù trình töôùi nöôùc.
Caùc loaïi phaân voâ cô ñöôïc duøng thöôøng coù coâng thöùc 30-10-10 duøng 3 laàn/tuaàn
vôùi noàng ñoä 1 muoãng caø pheâ/4lít. Trong suoát muøa taêng tröôûng, ta boùn phaân 10-20-
30 laøm 2 laàn/tuaàn ñeå taïo moät söùc chòu ñöïng cho caây tröôùc khi böôùc vaøo muøa nghæ.
Trong muøa taêng tröôûng neáu caây coù nuï hoa, ta thay phaân 30-10-10 baèng phaân 10-20-
20 vôùi chu kyø boùn nhö treân cho ñeán khi hoa taøn.
Trong muøa nghæ hoaøn toaøn khoâng boùn phaân cho Dendrobium, hay ñuùng hôn
giaûm vaø khoâng boùn phaân cho Dendrobium khi caây hoaøn taát thôøi kì taêng tröôûng haèng
naêm cuûa noù.
Khoâng neân duøng caùc loaïi phaân rieâng reõ, thöôøng phaân boùn ñöôïc duøng ôû daïng hoãn
hôïp vaø boå sung theâm caùc chaát phuï gia laø caùc sinh toá vaø caùc nguyeân toá vi löôïng.
2.4.5 Saâu beänh vaø caùc vaán ñeà khaùc.
Vì lan Dendrobium caàn ñöôïc boùn nhieàu loaïi phaân höõu cô khaùc nhau vaø moâi
tröôøng sô döøa seõ muïc naùt sau moät thôøi gian ngaén ñöôïc troàng. Ñaây laø 2 nguyeân nhaân
gaây ra nhieàu saâu beänh haïi.
Moät loaïi reäp dính maøu vaøng, kích thöôùc raát beù thöôøng xuaát hieän treân beà maët laù.
Loaïi naøy gaây taùc haïi treân caây qua vieäc huùt nhöïa.
Ñoái vôùi caùc loaøi coân truøng caén phaù Dendrobium thì loaïi tröø chuùng töông ñoái deã
daøng baèng Serpa, Bassa, noàng ñoä 1/500.
Maëc duø Dendrobium laø caây khaùng beänh raát maïnh, tuy nhieân caây vaãn bò naám vaø
virus taán coâng neáu ñieàu kieän veä sinh quaù keùm. Nguy hieåm nhaát laø beänh khoâ thaân
gaàn goác giaû haønh do moät loaøi virus thaâm nhaäp laøm cho caùc giaû haønh bò khoâ vaø cheát.
Coù theå ngöøa beänh baèng caùch nöûa thaùng xòt Topsil, Zineb, Benomyl vôùi noàng ñoä
1/400 [11].
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 9
Hình 2.4: Moät soá daïng hoa ñeïp cuûa gioáng Dendrobium.
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 10
III. Caùc phöông phaùp nhaân gioáng.
3.1 Nhaân gioáng ngoaøi thieân nhieân.
3.1.1 Nhaân gioáng voâ tính.
a. Taùch buïi: ñaây laø phöông phaùp ñaõ ñöôïc caùc ngheä nhaân söû duïng ñoái
vôùi caùc gioáng lan ña thaân nhö Cattleya, Dendrobium, Cymbidium,
Paphiopelium…ôû Cattleya, Dendrobium, vaø nhöõng gioáng töông töï: ôû
moãi goác cuûa giaû haønh thöôøng coù ít nhaát moät maét nguû neân coù theå taùch
moãi haønh giaû thaønh moät ñôn vò ñeå troàng.
b. Chieát caønh: ôû Dendrobium thöôøng taïo ra caây con treân giaû haønh
(Keiki) moät caùch töï nhieân. Khi caùc caây con naøy khaù maïnh, coù reã toát,
coù theå taùch ra khoûi giaû haønh ñeå troàng.
3.1.2 Nhaân gioáng höõu tính.
a. Söï thuï phaán: Trong thieân nhieân söï thuï phaán ôû lan do coân truøng thöïc
hieän. Caáu truùc cuûa hoa lan laø hoaøn toaøn ñeå thích öùng cho söï thuï phaán
aáy.
Coù hai phöông phaùp thuï phaán:
- Söï töï thuï phaán: Khi phaán hoa cuûa boâng hoa naøy ñöôïc rôi vaøo
nuoám cuûa chính hoa aáy. Ñieàu naøy hieám khi xaûy ra trong töï
nhieân ôû hoa lan vì caáu truùc cuûa boä phaän sinh duïc ñöïc vaø caùi ôû
hoa lan.
- Söï thuï phaán cheùo: Khi phaán hoa ôû hoa naøy ñöôïc ñeå vaøo nuoám
cuûa hoa khaùc cuûa cuøng caây hay cuøng loaøi (thöôøng xaûy ra trong
thieân nhieân do coân truøng thöïc hieän), hoaëc khaùc loaøi, khaùc gioáng
(thöôøng do con ngöôøi thöïc hieän).
b. Quaû lan: Neáu söï thuï phaán coù keát quaû, thì coù theå ngay trong ngaøy hay
sang ngaøy hoâm sau, caùc phieán hoa xuï laïi nhöng khoâng ruïng. Vaø ñeå
traønh söï thuï phaán khaùc do coân truøng ngöôøi ta duøng bao nilong truøm
hoa laïi, nhöng khoâng buoäc kín mieäng vì haàm hôi seõ laøm hö traùi.
Sau khi thuï phaán, baàu noaõn töø töø tröông phuø to ra thaønh traùi. Moãi traùi
coù theå chöùa haøng ngaøn hay ñeán caû trieäu hoät. Khi traí töø maøu xanh luïc
chuyeån sang maøu vaøng luïc thì neân haùi traùi.
c. Gieo haït:
Trong thieân nhieân muoán haït lan naåy maàm thì haït lan phaûi ñöôïc
nhieãm moät loaïi naám kí sinh. Ngöôøi ta ñaõ khaùm phaù ra moät soá loaøi
naám giuùp naåy maàm ôû haït lan, moãi loaøi chæ giuùp naåy maàm moät soá
gioáng lan maø thoâi.
- Rhizoctonia repens giuùp naûy maàm ôû Cattleya, Laelia,
Angraecum, Cypripedium (Paphiopedilum).
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 11
- Rhizoctonia mucoroides giuùp naåy maàm ôû Vanda, Phalaenopsis.
- Rhizoctonia lanugiosa giuùp cho hoät naåy maàm ôû Oncidium,
Odontoglossum vaø Miltonoa [16].
3.2 Nhaân gioáng trong phoøng thí nghieäm.
Trong phoøng thí nghieäm lan Dendrobium ñöôïc chuùng toâi nhaân gioáng baèng
phöông phaùp gieo haït in-vitro. Trong thieân nhieân, vì hoät lan quaù nhoû, khoâng chöùa
chaát döï tröõ vaø chæ coù moät phoâi chöa phaân hoùa, neân khoâng theå phaùt trieån theo moät
phöông caùch bình thöôøng ñöôïc vaø vì vaäy maø vieäc cho hoät lan naåy maàm vaø phaùt
trieån thaønh caây lan tröôûng thaønh laø vaán ñeà khoù khaên. Ngöôøi troàng lan ñaõ tìm nhieàu
caùch gieo haït nhöng khoâng thaønh coâng. Naêm 1922, Knudson ôû Myõ, thaønh coâng
trong vieäc thay theá naám baèng ñöôøng ôû moâi tröôøng thaïch ñeå gieo haït [16]. Phöông
phaùp naøy coù nhieàu öu ñieåm nhö:
- Keát hôïp vôùi kyõ thuaät lai gioáng taïo ra nhieàu gioáng lan môùi
cung caáp cho thò tröôøng.
- Giuùp baûo toàn caùc loaøi lan quyù, vaø nhaân nhanh soá löôïng giuùp
cho coâng taùc baûo toàn.
IV. Sô löôïc veà kyõ thuaät nuoâi caáy moâ thöïc vaät.
Nhaân gioáng in vitro hay nuoâi caáy moâ ñeàu laø thuaät ngöõ moâ taû caùc phöông thöùc
nuoâi caáy caùc boä phaän thöïc vaät trong oáng nghieäm coù chöùa moâi tröôøng xaùc ñònh ôû
ñieàu kieän voâ truøng [5]. Kyõ thuaät in vitro döïa treân nguyeân lyù laø teá baøo thöïc vaät coù
tính toaøn theå, nghóa laø töø moät moâ, moät cô quan hoaëc moät teá baøo cuûa baát kyø boä phaän
naøo cuûa caây ñeàu coù theå phaùt trieån thaønh moät caây hoaøn chænh neáu ñöôïc nuoâi trong
moâi tröôøng thích hôïp [6].
4.1 Ñieàu kieän nuoâi caáy teá baøo thöïc vaät.
a. Yeâu caàu cô baûn nhaát cuûa phoøng nuoâi caáy moâ laø phaûi ñaûm baûo voâ
truøng. Khaùi nieäm voâ truøng naøy bao goàm voâ truøng moâi tröôøng nuoâi caáy
vaø caû söï baûo ñaûm sao cho maãu nuoâi caáy ñöôïc hoaøn toaøn voâ truøng.
b. Caùc yeâu caàu cô baûn cuûa kyõ thuaät nuoâi caáy moâ teá baøo thöïc vaät:
- Khi thieát laäp phoøng nuoâi caáy moâ thöïc vaät phaûi ñaûm baûo ñöôïc
tính lieân tuïc thuaän lôïi cho caùc thao taùc, caùc giai ñoaïn trong
suoát quaù trình nuoâi caáy moâ.
- Ñaûm baûo ñöôïc veä sinh (tính voâ truøng) cuûa saûn phaåm cuoái
cuøng.
- Chuaån bò moâi tröôøng ñuùng caùch, choïn ñuùng moâi tröôøng cho
töøng loaïi thöïc vaät vaø töøng giai ñoaïn nuoâi caáy.
- Choïn vaø xöû lyù moâ thích hôïp tröôùc khi caáy [7].
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 12
c. Caùc thaønh phaàn cô baûn cuûa moâi tröôøng nuoâi caáy bao goàm: nöôùc,
muoái khoaùng (ña löôïng vaø vi löôïng), nguoàn cacbon, vitamin, chaát
ñieàu hoøa sinh tröôûng, agar (ñoái vôùi moâi tröôøng raén) [14].
- Nöôùc: nöôùc duøng trong moâi tröôøng nuoâi caáy laø nöôùc caát, hoaëc
nöôùc khöû ion, toát nhaát laø nöôùc caát hai laàn töø caùc maùy caát nöôùc
hoaøn toaøn baèng thuûy tinh.
- Ñöôøng: taïo nguoàn cacbon giuùp moâ toång hôïp neân cacbohydrat
cho caây maø khoâng phaûi do quanh hôïp cuûa moâ caây taïo neân;
ñöôøng söû duïng phoå bieán laø saccarose (1-6%w/v), glucose (2%
w/v).
- Caùc muoái khoaùng ña löôïng: nuoâi caáy moâ thöïc vaät ñoøi hoûi moät
löôïng nhaát ñònh caùc nguyeân toá ña löôïng nhö N, P, K, Ca, Mg,
S, Fe, …
- Caùc muoái khoaùng vi löôïng coù vai troø quan troïng trong ñôøi
soáng thöïc vaät. Chuùng tham gia vaøo caùc quaù trình sinh hoùa
trong teá baøo, tham gia vaøo trung taâm hoaït tính cuûa enzyme vaø
vitamin, taêng tính choáng chòu cuûa thöïc vaät vôùi caùc ñieàu kieän
moâi tröôøng baát lôïi. Caùc vi löôïng thoâng duïng laø Mn, B, Zn, Cu,
Co, I, noàng ñoä söû duïng trong moâi tröôøng raát thaáp.
- Vitamins: chuû yeáu myo-inositol, acid nicotinic, puridoxin HCl
(B6), thiamin HCl (B1)…Caùc vitamin deã bò hoûng do nhieãm taïo
neân caàn giöõ ôû t0< 00C [9].
- Chaát ñieàu hoøa taêng tröôûng: tuøy theo töøng muïc ñích nuoâi caáy
coù theå choïn caùc noàng ñoä vaø toå hôïp caùc noàng ñoä vaø toå hôïp caùc
chaát ñieâu hoøa sinh tröôûng phuø hôïp. Caùc chaát ñieàu hoøa sinh
tröôûng thöôøng duøng laø IAA, NAA, 2,4D, Kinetin, BAP,
IBA…[14]
- Agar(ñoái vôùi moâi tröôøng ñaëc): laø moät polisacarit laøm töø rong
bieån. Agar tan ôû 1000C vaø khi nguoäi seõ ñoâng ñaëc laïi. Haøm
löôïng söû duïng töø 8-10g/l tuøy haõng cheá taïo[10].
d. Nhieät ñoä, aùnh saùng vaø pH aûnh höôûng ñeán quaù trình caáy:
- Nhieät ñoä: nhieät ñoä cuûa phoøng nuoâi caáy thöôøng ñöôïc ñieàu
chænh oån ñònh töø 22-250C. ôû moãi teá baøo thöïc vaät khaùc nhau thì
nhieät ñoä nuoâi caáy cuõng khaùc nhau [5].
- Aùnh saùng: coù aûnh höôûng ñeán quaù trình phaùt sinh hình thaùi caây
nuoâi caáy. Caùc yeáu toá aûnh höôûng bao goàm: cöôøng ñoä, chu kyø,
thaønh phaàn quang phoå aùnh saùng. Cöôøng ñoä aùnh saùng töø: 1000-
2500 lux ñöôïc duøng phoå bieán cho nuoâi caáy nhieàu loaïi moâ [5].
- pH: laø moät yeáu toá quan troïng. Söï oån ñònh pH moâi tröôøng laø
yeáu toá duy trì trao ñoåi caùc chaát trong teá baøo. Ñeå ñieàu chænh
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 13
pH moâi tröôøng coù theå duøng dung dòch 10% hoaëc 1N NaOH
hoaëc 1N HCl [14].
4.2 Kyõ thuaät gieo haït trong oáng nghieäm.
a. Ñaëc ñieåm cuûa haït lan.
Khoâng gioáng nhöõng loaïi haït khaùc, haït lan raát nhoû, nhö haït buïi vaø
khoâng chöùa nguoàn döï tröõ thöùc aên. Trong töï nhieân, haït coù theå naåy
maàm nhöng seõ khoâng phaùt trieån neáu khoâng coù söï taùc ñoäng cuûa naám
mycorrhizal [22]. Loaïi naám naøy tieâu hoùa caùc vaät chaát höõu cô treân caây
chuû hoaëc trong ñaát, chuyeån hoùa thaønh caùc ñöôøng ñôn giaûn giuùp haït
lan naåy maàm vaø giuùp phoâi phaùt trieån [23]. Khi haït lan ñaõ naåy maàm,
noù seõ taïo ra moät löôïng lôùn caùc teá baøo khoâng phaân hoùa ñöôïc goïi laø
protocorm. Neáu taát caû ñeàu toát, protocorm seõ tieáp tuïc trong vaøi tuaàn,
vaøi thaùng, thaäm chí caû naêm tuøy loaøi, cho ñeán khi ñuû lôùn ñeå taïo thaân
vaø reã. Ôû caùc loaøi lan ñaát, duy trì moái quan heä coäng sinh naøy raát quan
troïng trong suoát giai ñoaïn ñaàu tieân cuûa caây, vì protocorm naèm döôùi
ñaát neân khoâng theå töï toång hôïp thöùc aên. Ôû caùc loaøi lan phuï sinh,
protocorm thöôøng xanh, vaø vì theá noù coù theå töï toång hôïp ñöôïc moät ít
thöùc aên [22].
b. Khöû truøng traùi lan.
Vieäc khöû ruøng traùi lan coù theå thöïc hieän theo hai phöông phaùp:
- Quaû lan sau khi moå ra, haït thu ñöôïc tröôùc khi ñem gieo caàn
tuyeån choïn caùc haït chaéc, caùc haït leùp khoâng thuï tinh caàn phaûi
loaïi boû ñi baèng caùch ñem ly taâm trong nöôùc caát; caùc haït lan
toát seõ laéng phía döôùi oáng nghieäm, haït leùp noåi leân treân, ñöôïc
gaïn boû ñi. Caùc haït toát ñöôïc tieáp tuïc khöû truøng baèng
Hypochlorite de calcium 10%.
Sau ñaáy, cho haït lan vaø nöôùc khöû truøng vaøo oáng nghieäm, vöøa
ñuû phuû kín haït lan, laéc maïnh, ñeàu vaø ñeå yeân trong voøng 10
phuùt, sau ñoù ñoå nöôùc khöû truøng ra baèng oáng huùt, vaø tieáp tuïc
röûa haït lan 3 laàn baèng nöôùc caát voâ truøng. Cuoái cuøng haït lan ñaõ
khöû truøng seõ ñöôïc gieo vaøo caùc bình chöùa moâi tröôøng.
- Khi quaû lan ñaõ ñöôïc caét treân caây, mang vaøo phoøng thí nghieäm,
caàn ñeå nôi saïch seõ, thoaùng maùt. Neáu chöa gieo haït ngay thì coù
theå giöõ quaû trong tuû laïnh, trong voøng 3-4 ngaøy.
Khi gieo haït, tröôùc tieân quaû lan caàn caét boû caùc cuoáng daøi,
ñuoâi coøn soùt laïi caùc laù ñaøi, caùnh hoa…Duøng boâng goøn coù taåm
alcol 700 ñeå lau toaøn boä maët ngoaøi cuûa quaû.
Moät khi vaøo tuû caáy voâ truøng, quaû lan seõ ñöôïc:
- Nhuùng vaøo alcol 90-960, trong 1 phuùt, hô nhanh qua ngoïn löûa.
- Nhuùng vaøo Hypochlorite de calcium 10%, trong 10 phuùt, röûa
laïi 3 laàn baèng nöôùc caát voâ truøng.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 14
Sau ñaáy quaû lan seõ ñöôïc caét goït hai ñaàu, vaø duøng dao moå xeû doïc quaû
lan (moå hai ñöôøng ñoái dieän nhau), taùch laøm hai quaû lan, keá ñeán duøng
pince vaø dao moå ñeå giöõ laáy taát caû caùc haït coù trong hai nöûa quaû lan,
baèng caùch goõ nheï leân phaàn ngoaøi cuûa voû quaû. Neáu söï thuï tinh toát, taát
caû caùc haït seõ coù maøu vaøng vaø ñeàu rôi xuoáng moät ñóa petri duøng ñeå
höùng laáy haït. Sau ñoù ngöôøi ta seõ duøng muoãng hoaëc moät duïng cuï inox
duøng ñeå gieo haït vaøo caùc bình chöùa moâi tröôøng [8].
c. Kyõ thuaät gieo haït trong oáng nghieäm: haït seõ naåy maàm trong oáng
nghieäm baèng thuûy tinh hay baèng nhöïa treân moâi tröôøng raén coù chöùa
ñöôøng vaø caùc loaïi chaát khoaùng caàn thieát ñeå haït naåy maàm vaø phaùt
trieån. Ñoái vôùi lan coù hai kieåu naåy maàm cô baûn: naåy maàm caàn naám
coäng sinh vaø naåy maàm khoâng coäng sinh.
- Trong kieåu naåy maàm coäng sinh, haït ñöôïc gieo vôùi moät löôïng
nhoû naám mycorrhizal thích hôïp. Naám naøy seõ phaùt trieån treân
moâi tröôøng, bao phuû caùc haït naåy maàm vaø moái quan heä coäng
sinh xuaát hieän seõ duy trì söùc soáng cuûa protocorm cho ñeán khi
noù taïo ra laù vaø coù khaû naêng töï döôõng. Kyõ thuaät naøy ñöôïc söû
duïng roäng raõi ñeå nhaân gioáng caùc loaïi lan ñaát ôû vuøng oân ñôùi.
Kyõ thuaät naøy coù lôïi theá laø moâi tröôøng söû duïng raát ñôn giaûn
(moät trong nhöõng daïng phoå bieán chæ bao goàm boät yeán maïch
vaø moät ít dòch chieát naám men), vaø caây sinh ra thöôøng khoûe
hôn vaø coù khaû naêng ñeå khaùng vôùi caùc taùc ñoäng cuûa naám toát
hôn caây ñoái chöùng naåy maàm khoâng caàn naám. Kyõ thuaät naøy coù
moät nhöôïc ñieåm laø caàn phaûi coù moät chuûng naám mycorrhizal
thuaàn khieát, hoaëc quan heä coäng sinh khoâng phaùt trieån, hoaëc
trôû thaønh kyù sinh vaø haït gieo seõ cheát. Coù raát ít nghieân cöùu
thöïc hieän veà caùc loaøi naám mycorrhizal ôû caùc loaøi lan nhieät ñôùi,
neân kyõ thuaät naøy ít ñöôïc aùp duïng.
- Kieåu naåy maàm khoâng coäng sinh thöôøng ñöôïc söû duïng ñeå nhaân
gioáng caùc loaøi lan nhieät ñôùi. Moâi tröôøng söû duïng phöùc taïp
hôn bao goàm caùc muoái khoaùng, caùc chaát höõu cô vaø ñöôøng vôùi
moät löôïng thích hôïp ñeå haït lan naåy maàm maø khoâng caàn naám
[22].
d. Öùng duïng cuûa vieäc gieo haït.
- Gia taêng löôïng hoa lan treân thò tröôøng
- Nhaân gioáng caùc loaøi lan hieám nhaèn nhaân nhanh soá löôïng caû
trong töï nhieân vaø trong caùc chöông trình baûo toàn.
- Cung caáp caây con ñeå baùn, giuùp haïn cheá söï khai thaùc caây
hoang daïi, kích thích söï quan taâm cuûa coâng chuùng vaø taïo
nguoàn thu ngaân saùch.
- Keát hôïp vôùi kyõ thuaät lai gioáng taïo ra nhöõng caây lan khoûe
maïnh coù maøu saéc ñaëc bieät [22].
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp - 2005 Toång quan taøi lieäu
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 15
V. Caùc coâng trình ngieân cöùu gieo haït lan trong oáng nghieäm.
5.1 Trong nöôùc:
Döông Coâng Kieân vaø coäng söï nghieân cöùu lai taïo vaø gieo haït lan
Dendrobium trong oáng nghieäm [8].
5.2 Ngoaøi nöôùc:
Naêm 1844, Neumann, moät ngöôøi Phaùp laøm vöôøn, ñaõ laøm naåy maàm moät soá hoät
lan baèng caùch raûi ñaïi caùc hoät lan treân caùc cuïc ñaát ôû quanh goác cuûa caùc caây lan lôùn.
Naêm 1899, Noel Bernard, nhaø thöïc vaät ngöôøi Phaùp, ñaõ khaùm phaù ra bí maät cuûa
vieäc naåy maàm ôû hoät lan khi oâng khaûo saùt caùc hoät Neottia nidus-avis naåy maàm töï
nhieân trong röøng. Naêm 1904, oâng coäng taùc vôùi Burgeff ñeå ñöa ra phöông phaùp gieo
hoät lan coù nhieãm naám trong chai thaïch [16].
Naêm 1909, Hans Burgeff ñaõ laøm naåy maàm ñöôïc Laeliocattleya treân moâi tröôøng
dinh döôõng goàm 0,33% saccarose (ñöôøng mía).
Naêm 1922, Lewis Knudson ñaõ laøm naåy maàm Cattleya mossiae treân moâi tröôøng
Pfefferds 1% saccarose (ñöôøng mía) [11].
VI. Muïc ñích gieo haït lan Dendrobium trong oáng nghieäm.
Hình 2.5: Quaû lan Dendrobium.
Caùc nhaø troàng lan khoâng ngöøng tìm kieám caùc gioáng lan môùi ñeå thoõa maõn
söï hieáu kì cuûa mình hoaëc coù theå ñem baùn. Coù hai caùch ñeå coù ñöôïc gioáng
lan môùi. Moät laø, söu taäp nhöõng gioáng lan hoang daïi trong röøng ñem veà
thuaàn hoùa, taïo caùc ñieàu kieän nhaân taïo gioáng töï nhieân ñeå caây lan coù theå ra
hoùa. Phöông phaùp naøy gaëp nhieàu ruûi ro do ñieàu kieän moâi tröôøng khoâng
thuaän lôïi cho caây lan phaùt trieån. Hai laø, taïo ra nhöõng gioáng lan lai môùi,
caây lan lai seõ mang nhöõng ñaëc tính toát vöïôt troäi cuûa caû boá meï, coù theå
thoûa maõn ñöôïc nhu caàu cuûa ngöôøi thöôûng thöùc lan. Tuy nhieân khi hai caây
lan lai vôùi nhau ñaït keát quaû vaø taïo traùi caàn phaûi keát hôïp vôùi phöông phaùp
gieo haït trong oáng nghieäm ñeå haït lan coù theå naåy maàm deã daøng. Coù nhö
vaäy môùi coù theå kieåm tra keát quaû cuûa vieäc lai hai caây lan.
Ñoái vôùi moät soá gioáng lan quyù caàn phaûi baûo veä thì phöông phaùp gieo haït
trong oáng nghieäm giuùp baûo toàn gioáng, nhaân nhanh soá löôïng caây maø vaãn
ñaûm baûo ñöôïc tính oån ñònh di truyeàn.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 16
PHAÀN III: VAÄT LIEÄU – PHÖÔNG PHAÙP
I. Vaät lieäu vaø ñieàu kieän gieo haït trong oáng nghieäm.
1.1 Maãu quaû gieo haït.
Vaät lieäu laø quaû lan Dendrobium lai daøi töø 4-5 cm laáy töø caây ngoaøi thieân nhieân,
taïi vöôøn thaày Döông Coâng Kieân, quaän 12, thaønh phoá Hoà Chí Minh.
1.2 Moâi tröôøng nuoâi caáy.
Moâi tröôøng Knudson C (1946), boå sung theâm:
- Nöôùc döøa 15%.
- Than hoaït tính 0.5g/l, tuøy theo muïc ñích thí nghieäm.
- Ñöôøng 30g/l.
- Agar 8,5 g/l.
- pH = 5.7 – 6.
Moâi tröôøng MS (Murashige vaø Skoog, 1962), boå sung theâm:
- Nöôùc döøa 15%.
- Than hoaït tính 0.5g/l, tuøy theo muïc ñích thí nghieäm.
- Glycin 0.5g/l
- myo-Inositol 0.1mg/l
- Ñöôøng 30g/l.
- Agar 8,5 g/l.
- pH = 5.5 – 5.7.
Söû duïng chai thuûy tinh 100 ml vaø 500 ml ñeå nuoâi caáy.
Taát caû moâi tröôøng ñöôïc haáp khöû truøng ôû 1atm, 1210C trong thôøi gian 20
phuùt.
1.3 Ñieàu kieän nuoâi caáy.
Thí nghieäm ñöôïc thöïc hieän töø ngaøy 20/01/2005 ñeán ngaøy 26/05/2005, taïi coâng
ty Vaên Thaønh Taøi, 114 Hoàng Haø, Quaän Taân Bình, Thaønh phoá Hoà Chí Minh, vôùi caùc
ñieàu kieän nuoâi caáy nhö sau:
- Nhieät ñoä phoøng nuoâi: 24-280C.
- Cöôøng ñoä chieáu saùng: 2000-3000 lux.
- Thôøi gian chieáu saùng: 8 giôø/ngaøy.
- AÅm ñoä trung bình: 60-70%.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 17
II. Höôùng ñi cuûa ñeà taøi.
Ñoái vôùi ñeà taøi, chuùng toâi höôùng muïc ñích nhaân gioáng lan Dendrobium lai baèng
phöông phaùp gieo haït in-vitro nhaèm:
- Cung caáp gioáng lan môùi cho caùc phoøng nuoâi caáy moâ.
- Taïo ra caây con khoûe, saïch beänh, ñeå troàng ra vöôøn öôm.
- Kieåm tra keát quaû lai.
Vôùi thôøi gian quaù ngaén, töø nguyeân lieäu ban ñaàu laø quaû lan, chuùng toâi chæ coù theå
thöïc hieän ñöôïc caùc giai ñoaïn:
- Khöû truøng quaû.
- Nhaân protocorm.
- Ra reã.
III. Boá trí thí nghieäm:
3.1 Thí nghieäm 1: Khöû truøng quaû
a. Muïc ñích thí nghieäm:
- Tìm phöông phaùp khöû truøng thích hôïp.
- Tìm noàng ñoä Hypochloride calcium Ca(OCl)2 vaø thôøi gian khöû
truøng thích hôïp ñoái vôùi quaû lan.
- Theo doõi bieåu hieän cuûa haït.
b. Phöông phaùp vaø hoùa chaát söû duïng:
- Phöông phaùp ñoát coàn.
- Phöông phaùp hoùa chaát: duøng Ca(OCl)2.
c. Boá trí thí nghieäm:
- Maãu laáy töø thieân nhieân.
- Röõa maãu döôùi nöôùc chaûy khoaûng 10 phuùt.
- Röûa maãu baèng xaø phoøng pha loaõng.
- Röûa laïi nhieàu laàn baèng nöôùc caát.
Chuyeån maãu vaøo tuû caáy voâ truøng.
- Röûa maãu baèng coàn 700 trong 1-2 phuùt.
- Röûa maãu laïi baèng nöôùc caát voâ truøng khoaûng 2-3 laàn.
- Ngaâm maãu trong Ca(OCl)2
vaø thöôøng xuyeân laéc maãu.
- Röûa laïi maãu nhieàu laàn
baèng nöôùc caát voâ truøng
khoaûng 3-4 laàn cho thaät
saïch.
- Nhuùng vaøo coàn 900 vaø hô nhanh
qua ngoïn löûa.
- Nhanh choùng ñaët quaû lan vaøo
ñóa petri vaøo ñaäy naép laïi.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 18
- Sau ñaáy quaû lan seõ ñöôïc caét goït 2 ñaàu, vaø duøng dao moå xeû doïc
quaû lan, taùch laøm 2.
- Duøng dao giöõ phaàn voû quaû, duøng keïp laáy heát hoät ra moät ñóa petri.
- Gieo haït vaøo moâi tröôøng.
- Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 2 laàn, moãi laàn moät quaû.
d. Chæ tieâu theo doõi.
Tyû leä haït soáng sau khi gieo.
Tình traïng haït gieo: Xanh.
Traéng.
Hoùa naâu.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 19
Hình 3.1: Quy trình khöû maãu.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 20
3.2 Thí nghieäm 2: Tìm moâi tröôøng thích hôïp ñeå gieo haït.
a. Muïc ñích thí nghieäm.
Tìm moâi tröôøng khoaùng thích hôïp ñeå gieo haït.
b. Moâi tröôøng gieo haït.
- Moâi tröôøng MS khoâng boå sung kích thích toá, kyù hieäu Mo.
- Moâi tröôøng MS boå sung 1ppm BA, kyù hieäu laø M1.
- Moâi tröôøng Knudson’C khoâng boå sung kích toá kyù hieäu Ko.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung 1ppm BA, kyù hieäu K1.
c. Boá trí thí nghieäm.
- Caùc quaû lan ñaõ ñöôïc khöû truøng töø thí nghieäm 1, seõ ñöôïc gieo
vaøo 4 loaïi moâi tröôøng thöû nghieäm.
- Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 2-4 tuaàn
- Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 2 laàn , moãi laàn 15 chai 100ml.
d. Chæ tieâu theo doõi.
- Thôøi gian haït naåy maàm.
- Moâi tröôøng thích hôïp gieo haït Dendrobium.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 21
3.3 Thí nghieäm 3: Taïo Protocorm
a. Muïc ñích thí nghieäm.
- So saùnh söï thaønh laäp protocorm treân hai moâi tröôøng khaùc nhau
vaø boå sung cuøng noàng ñoä kích thích toá.
- Tìm moâi tröôøng thích hôïp cho caùc thí nghieäm veà sau.
b. Moâi tröôøng nuoâi caáy.
- Moâi tröôøng MS khoâng boå sung kích thích toá, kyù hieäu Mo.
- Moâi tröôøng MS boå sung 2ppm BA, kyù hieäu laø M2.
- Moâi tröôøng Knudson’C khoâng boå sung kích toá kyù hieäu Ko.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung 2ppm BA, kyù hieäu K2.
c. Boá trí thí nghieäm.
- Nhöõng maãu haït ñaõ phình to ra, coù maøu xanh, khoâng nhieãm töø thí
nghieäm 2.
- Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 2-4 tuaàn nuoâi caáy.
- Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn, moãi laàn 8 chai 100ml.
d. Chæ tieâu theo doõi
- Thôøi gian taïo protocorm.
- Moâi tröôøng taïo protocorm toát nhaát.
- Tình traïng phaùt trieån cuûa prorocorm.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 22
3.4 Thí nghieäm 4: Nhaân protocorm
a. Muïc ñích thí nghieäm.
So saùnh söï nhaân protocorm treân cuøng moät loaïi moâi tröôøng vôùi noàng ñoä kích
thích toá thay ñoåi.
b. Moâi tröôøng nuoâi caáy.
- Moâi tröôøng Knudson’C ñoái chöùng khoâng boå sung kích thích toá
kyù hieäu K0.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung BA vôùi noàng ñoä
1ppm:2ppm:3ppm, kyù hieäu laø K1, K2, K3.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung 2ppm BA vaø IAA vôùi noàng ñoä
0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø K4, K5, K6.
c. Boá trí thí nghieäm.
- Söû duïng caùc protocorm ñöôïc taïo thaønh töø thí nghieäm 3.
- Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 2-4 tuaàn nuoâi caáy.
- Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn, moãi laàn 3 chai 500ml.
d. Chæ tieâu theo doõi.
- Nhaän xeùt moâi tröôøng nhaân nhanh protocorm baät choài toát nhaát:
thôøi gian ngaén nhaát cho caây coù chieàu cao 2-3 cm vaø coù 2-3 laù.
- Söï taïo thaønh caây giöõa caùc moâi tröôøng.
- Maøu saéc vaø chieàu daøi laù.
- Thôøi gian xuaát hieän reã ñaàu tieân.
Download»
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 23
3.5 Thí nghieäm 5: Ra reã
a. Muïc ñích thí nghieäm.
Khaûo saùt moâi tröôøng thích hôïp cho söï ra reã.
b. Moâi tröôøng nuoâi caáy.
- Moâi tröôøng Knudson’C ñoái chöùng khoâng boå sung kích thích toá
kyù hieäu K0.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung NAA vôùi noàng ñoä
0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø KN1, KN2, KN3.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung IAA vôùi noàng ñoä
0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø KI1, KI2, KI3.
- Moâi tröôøng Knudson’C boå sung IBA vôùi noàng ñoä
0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø KB1, KB2, KB3.
c. Boá trí thí nghieäm.
- Nhöõng caây con coù chieàu cao töø 2-3 cm vaø coù 2-3 laù ñöôïc taïo
thaønh töø thí nghieäm 4.
- Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 3-4 tuaàn nuoâi caáy.
- Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn, moãi laàn 3 chai 500 ml.
d. Chæ tieâu theo doõi
- Chieàu daøi reã.
- Söï taêng tröôûng chieàu cao caây.
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 30
PHAÀN IV: KEÁT QUAÛ – THAÛO LUAÄN
I. Thí nghieäm 1: Khöû truøng maãu.
Quaû lan sau khi ñöôïc khöû truøng, gieo haït vaøo moâi tröôøng nuoâi caáy, sau 1 tuaàn
keát quaû ghi nhaän ñöôïc nhö sau:
Baûng 1: Keát quaû khöû truøng maãu baèng Ca(OCl)2, sau 1 tuaàn.
Soáng vaø khoâng nhieãm Cheát vaø khoâng nhieãm Nhieãm NT Soá laàn ñoát
Soá löôïng Tyû leä
(%)
Soá löôïng Tyû leä
(%)
Soá löôïng Tyû leä
(%)
1 1 16 100 0 0 0 0
2 2 10 62,5 6 37,5 0 0
Baûng 2: Keát quaû khöû truøng maãu baèng phöông phaùp ñoát, sau 1 tuaàn.
Maãu haït lan ñöôïc gieo vaøo moâi tröôøng, sau 1 tuaàn khöû truøng, maãu baét
ñaàu coù nhöõng bieåu hieän khaùc nhau:
- Ñoái vôùi nhöõng maãu soáng vaø khoâng nhieãm, sau 1 tuaàn, haït daàn
daàn thích nghi vôùi moâi tröôøng, baét ñaàu chuyeån sang maøu naâu
vaøng maät ong.
- Coøn vôùi nhöõng maãu haït bò aûnh höôûng bôûi Ca(OCl)2, vaø nhieät ñoä
cao, haït chuyeån sang maøu traéng vaø naâu ñuïc, khoâng phaùt trieån.
Keát quaû ghi nhaän ñöôïc ôû baûng 1 cho thaáy:
- Noàng ñoä Ca(OCl)2 7%, thôøi gian khöû truøng laø 15 phuùt tyû leä haït
soáng vaø khoâng nhieãm laø 75%, maãu khoâng bò cheát nhöng tyû leä
Soáng vaø khoâng nhieãm Cheát vaø khoâng nhieãm Nhieãm N
T
Noàng ñoä
Ca(OCl)2
(%)
Thôøi
gian
(phuùt)
Soá löôïng Tyû leä
(%)
Soá löôïng Tyû leä
(%)
Soá löôïng Tyû leä
(%)
1 7 15 12 75 0 0 4 25
2 7 20 15 93,75 1 6,25 0 0
3 9 15 16 100 0 0 0 0
4 9 20 10 62,5 6 37,5 0 0
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 31
nhieãm cao (25%). Coøn vôùi thôøi gian khöû truøng 20 phuùt, tyû leä haït
soáng khaù cao (93,75%), maãu hoaøn toaøn khoâng bò nhieãm, nhöng
bò cheát (6,25%).
- Khi khöû truøng ôû noàng ñoä taêng thì tyû leä maãu bò cheát taêng theo vaø
soá maãu nhieãm giaûm daàn. Ôû noàng ñoä 9%, thôøi gian khöû truøng laø
15 phuùt, tyû leä haït soáng raát cao (100%), maãu haït gieo hoaøn toaøn
khoâng bò nhieãm, khoâng cheát. Khi keùo daøi thôøi gian khöû truøng 20
phuùt, thì tyû leä maãu cheát taêng cao (37,5%).
Khi ngaâm quaû lan trong dung dòch Ca(OCl)2, phaàn voû beân ngoaøi tieáp
xuùc tröïc tieáp vôùi dung dòch khöû truøng, coøn phaàn haït beân trong khoâng
bò aûnh höôûng. Khi gieo haït vaøo moâi tröôøng, haït coù khaû naêng phuïc hoài
nhanh vaø naåy maàm. Tuy nhieân, neáu taêng noàng ñoä vaø keùo daøi thôøi
gian khöû truøng, dung dòch seõ ngaám vaøo beân trong voû quaû, neân sau khi
gieo vaøo moâi tröôøng, haït phuïc hoài raát chaäm vaø coù theå seõ bò cheát (hoùa
traéng).
Nhö vaäy, vôùi caùc noàng ñoä Ca(OCl)2 ñaõ ñöôïc söû duïng trong loaït thí
nghieäm, thì noàng ñoä 9% trong thôøi gian 15 phuùt laø thích hôïp nhaát.
Keát quaû ghi nhaän ñöôïc ôû baûng 2 cho thaáy:
- Khöû truøng quaû lan baèng phöông phaùp ñoát coàn thì maãu haït gieo
hoaøn toaøn khoâng bò nhieãm. Nhöng neáu tieán haønh ñoát 2 laàn thì tyû
leä maãu cheát cao (37,5%), töông ñöông vôùi phöông phaùp khöû
truøng baèng Ca(OCl)2 9%, trong thôøi gian 20 phuùt.
- Khi ñoát moät laàn tyû leä maãu soáng laø 100%, töông öùng vôùi khi khöû
truøng baèng Ca(OCl)2 9% trong thôøi gian 15phuùt.
Khi nhuùng quaû lan vaøo coàn 900 vaø ñoát, thì phaàn voû quaû beân ngoaøi seõ
bò aûnh höôûng tröïc tieáp cuûa nhieät ñoä cao, ñoàng thôøi seõ loaïi boû hoaøn
toaøn caùc taùc nhaân gaây nhieãm beân ngoaøi voû. Nhöng neáu tieán haønh ñoát
2 laàn, nhieät ñoä cao cuøng vôùi thôøi gian keùo daøi seõ gaây aûnh höôûng ñeán
haït beân trong, neân khi gieo vaøo moâi tröôøng, maãu haït phuïc hoài raát
chaäm, hoaëc coù theå hoùa naâu, khoâng naûy maàm ñöôïc.
Nhö vaäy, khi khöû truøng quaû lan baèng Ca(OCl)2 9% trong thôøi gian 15
phuùt vaø ñoát coàn moät laàn, tyû leä soáng, khoâng nhieãm laø nhö nhau. Tuy nhieân,
duøng phöông phaùp ñoát coàn thì haït gieo phuïc hoài vaø naåy maàm nhanh hôn.
Ngoaøi ra, phöông phaùp naøy coøn tieát kieäm nhieàu thôøi gian khöû truøng maãu,
thao taùc ñôn giaûn hôn, kinh teá hôn.
Toùm laïi: maãu khöû truøng laø quaû lan Dendrobium coøn xanh. Vì maãu haït gieo naèm
beân trong, neân neáu tieán haønh röûa maãu kyõ vaø ñoát baèng coàn 1 laàn thì coù theå loaïi boû
hoaøn toaøn caùc taùc nhaân gaây nhieãm. Haït khoâng bò aûnh höôûng vaø khi gieo vaøo moâi
tröôøng seõ phuïc hoài raát nhanh.
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 32
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 33
II. Thí nghieäm 2:
Caùc quaû lan sau khi ñöôïc khöû truøng seõ ñöôïc gieo vaøo 4 loaïi moâi tröôøng khaùc
nhau, ñöôïc theo doõi sau 4 tuaàn nuoâi caáy:
Moâi tröôøng Kyù hieäu Noàng ñoä
BA
(ppm)
Soá maãu
hoùa naâu
(1 tuaàn)
%
Soá maãu
naûy maàm
(2 tuaàn)
%
Soá maãu
hoùa xanh
(4 tuaàn)
%
M0 0 100 83,33 93,33 MS
M1 1 100 90 100
K0 0 100 50 63,33 KC
K1 1 100 43,33 80
Baûng 3: Söï naûy maàm cuûa haït lan treân moâi tröôøng Knudson’C vaø MS boå sung 1
ppm BA.
- Moät tuaàn sau khi gieo vaøo moâi tröôøng, taát caû maãu haït lan ñeàu
hoùa naâu vaøng.
- Sau 2 tuaàn, maãu baét ñaàu coù hieän töôïng naåy maàm vaø coù söï khaùc
bieät roõ reät giöõa caùc loaïi moâi tröôøng khaùc nhau.
- Sau 4 tuaàn, nhöõng haït coù maøu hôi vaøng, daàn chuyeån sang xanh
do coù söï tieáp xuùc vôùi aùnh saùng, taïo ñöôïc dieäp luïc toá.
Döïa vaøo baûng keát quaû, chuùng toâi nhaän thaáy:
- Haït gieo trong moâi tröôøng MS coù tyû leä naåy maàm raát cao (80-
90%), haàu nhö taát caû caùc maãu haït ñeàu coù hieän töôïng phình leân
vaø chuyeån sang vaøng. Trong khi ñoù, maãu haït gieo trong moâi
tröôøng Knudson’C, tyû leä naåy maàm raát thaáp (40-50%). Trong thôøi
ñieåm naøy haàu nhö khoâng coù söï khaùc bieät giöõa loaïi moâi tröôøng coù
vaø khoâng coù kích thích toá. Coù theå trong thôøi ñieåm naøy, kích thích
toá khoâng coù aûnh höôûng gì maáy ñoái vôùi khaû naêng naåy maàm cuûa
haït.
- Sau 4 tuaàn, haït lan hoùa xanh. Trong moâi tröôøng MS coù boå sung
BA 1ppm, taát caû maãu haït ñeàu hoùa xanh. neáu khoâng coù kích thích
toá tyû leä naøy laø 93,33%. Trong moâi tröôøng KC, tyû leä maãu hoùa
xanh thaáp hôn, ôû ñaây coù söï khaùc bieät roõ reät giöõa moâi tröôøng coù
vaø khoâng coù kích thích toá. Moâi tröôøng KC coù BA tyû leä naåy maàm
cao hôn (80%) so vôùi khoâng coù BA (63,33%). Trong giai ñoaïn
naøy, vai troø cuûa kích thích toá ñaõ coù bieåu hieän roõ reät. Caùc maãu haït
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 34
gieo trong moâi tröôøng coù kích thích toá, coù maøu xanh ñaäm hôn,
haït phình to hôn
Töø caùc keát quaû ghi nhaän ñöôïc cho thaáy, ôû cuøng noàng ñoä kích thích toá,
nhöng treân moâi tröôøng MS coù noàng ñoä khoaùng cao hôn, thì haït lan naåy
maàm nhanh hôn so vôùi moâi tröôøng Knudson’C.
Vaäy, moâi tröôøng MS coù 1 ppm BA cho söï naåy maàm cuûa haït lan Dendrobium toát
hôn so vôùi moâi tröôøng Knudson’C.
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 35
III. Thí nghieäm 3:
Caùc maãu haït lan sau khi ñaõ hoùa xanh, ñöôïc caáy chuyeàn qua caùc moâi tröôøng khaùc
nhau ñeå taïo protocorm, ñöôïc theo doõi sau 4 tuaàn nuoâi caáy:
Tình traïng taïo protocorm Moâi tröôøng Kyù hieäu Noàng ñoä BA
(ppm)
Sau 2 tuaàn Sau 4 tuaàn
M0 0 0 + MS
M2 2 + +
K0 0 + ++ KC
K2 2 ++ +++
Baûng 4: Keát quaû taïo protocorm treân moâi tröôøng Knudson’C vaø MS boå sung 2
ppm BA.
Vôùi
0 : khoâng coù söï taïo protocorm.
+ : taïo thaønh protocorm raát ít.
++ : taïo thaønh protocorm nhieàu.
+++ : taïo thaønh protocorm raát nhieàu.
- Tuaàn ñaàu tieân treân caû 4 moâi tröôøng ñeàu khoâng taïo protocorm.
- Sau 2 tuaàn, haït gieo baét ñaàu bieán ñoåi taïo thaønh moät ñaùm teá baøo
coù maøu xanh.
- Soá löôïng protocorm ngaøy caøng taêng nhanh sau 3-4 tuaàn, phình
to leân, vaø coù laù maàm.
Döïa vaøo baûng keát quaû chuùng toâi nhaän thaáy:
- Hai tuaàn sau khi caáy, moâi tröôøng MS, haït lan khoâng coù söï bieán
ñoåi roõ reät, taïo thaønh raát ít protocorm. Sau boán tuaàn, soá löôïng
protocorm taïo thaønh nhieàu, ñöôøng kính nhoû, maøu xanh hôi traéng,
laù maàm daøi khoaûng 3-4 mm vaø raát ít .
- Trong khi ñoù ôû moâi tröôøng Knudson’C, sau hai tuaàn taát caû caùc
haït lan ñeàu bieán ñoåi roõ reät, ñöôøng kính protocorm khoaûng 2mm,
treân protocorm coù loâng huùt. Sau 4 tuaàn, soá löôïng protocorm
trong moâi tröôøng Knudson’C phaùt trieån nhanh, maøu xanh, laù
maàm daøi khoaûng 5-7 mm.
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 36
- Trong moâi tröôøng Knudson’C coù chöùa BA, maëc duø soáù löôïng
protocorm taïo ra töông ñöông vôùi moâi tröôøng khoâng chöùa BA.
Nhöng protocorm phaùt trieån töông ñoái nhanh hôn, söï taêng tröôûng
cuûa protocorm ñoàng ñeàu vôùi nhau, coù nhieàu laù maàm khoûe, maøu
xanh töôi. Trong moâi tröôøng coù chöùa kích thích toá BA, laø moät
cytokinin coù khaû naêng kích thích vaø ñieàu chænh söï phaân baøo,
taêng söï chuyeån hoùa chaát dinh döôõng [10].
Toùm laïi:
- Töø nhöõng keát quaû ghi nhaän ñöôïc veà thôøi gian vaø soá löôïng
protocorm taïo thaønh ta coù theå keát luaän raèng: söï taïo protocorm
trong moâi tröôøng Knudson’C coù boå sung kích thích toá BA laø toát
nhaát.
- Do söï taïo thaønh protocorm trong moâi tröôøng Knudson’C toát hôn,
neân taát caû caùc thí nghieäm veà sau, chuùng toâi chæ thöïc hieän treân
moâi tröôøng Knudson’C.
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 37
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 38
IV. Thí nghieäm 4:
Caùc protocorm ñöôïc taïo thaønh töø haït coù chaát löôïng nhö nhau ñöôïc ñöa vaøo caùc
thí nghieäm nhaân protocorm, sau 4 tuaàn theo doõi keát quaû ghi nhaän ñöôïc nhö sau:
Kích
thích toá
Noàng ñoä
(ppm)
Kyù
hieäu
Soá löôïng
choài môùi
Chieàu cao
choài (cm)
Chieàu daøi
laù (cm)
Ghi chuù
0 0 K0 0 0 0 Protocorm nhoû, ít.
1 K1 1-2 1,5-2 0,5-0,7 Protocorm môùi xanh,
nhöng ít.
2 K2 4-6 1,5-2,5 0,5-0,7 Protocorm nhieàu, to,
xanh, coù loâng huùt.
BA
3 K3 1-2 1,3-1,5 0,5-0,7 Protocorm nhieàu
nhöng nhoû.
0,1 K4 4-6 2-3,5 1,5-2 Protocorm xanh, to,
coù loâng huùt, nhöng ít
0,5 K5 5-7 3-4 2-3 Protocorm xanh,
nhöng ít
2ppm
BA +
IBA
1 K6 4-5 2-3 1,5-2,5 Protocorm nhoû, hôi
vaøng, ít
Baûng 5: Keát quaû nhaân protocorm treân moâi tröôøng Knudson’C vôùi kích thích toá
khaùc nhau.
- Sau 2 tuaàn, baét ñaàu xuaát hieän protocorm môùi, coù loâng huùt. Soá
löôïng vaø kích thöôùc thay ñoåi tuyø theo moâi tröôøng.
- Sau 3 tuaàn, coù moät soá protocorm baät choài môùi.
- Sau 4 tuaàn caùc choài môùi phaùt trieån maïnh, tuyø theo moâi tröôøng
maø soá löôïng vaø chieàu cao choài môùi khaùc nhau.
Döïa vaøo baûng keát quaû chuùng toâi nhaän thaáy:
- Sau 2 tuaàn, moâi tröôøng K1, khoâng thaáy söï xuaát hieän cuûa
protocorm môùi. Sang ñeán tuaàn thöù 3, môùi xuaát hieän protocorm
môùi. Soá löôïng protocorm môùi taïo thaønh raát ít, coù maøu xanh. Moät
soá protocorm baät choài vaøo giöõa tuaàn thöù 4, nhöng soá löôïng naøy
raát ít, chæ khoaûng 1-2 choài.
- Ôû moâi tröôøng K2, söï nhaân protocorm dieãn ra nhanh vaø maïnh.
Sau 2 tuaàn, ñaõ xuaát hieän nhieàu protocorm môùi. Sau 4 tuaàn, soá
löôïng protocorm môùi taïo thaønh raát nhieàu, caùc protocorm naøy
xanh möôùt, to, xung quanh coù nhieàu loâng tô traéng mòn. Vaøo giöõa
Download»
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 39
tuaàn thöù 3, coù moät soá protocorm môùi baät choài, tuy soá löôïng choài
nhieàu, nhöng chieàu cao choài raát thaáp.
- Soá löôïng protocorm môùi taïo thaønh nhieàu ôû moâi tröôøng K3, sau 2
tuaàn, ñaõ xuaát hieän nhöõng protocorm môùi. Sang ñeán tuaàn 4, soá
löôïng protocorm ñaõ raát nhieàu, tuy nhieân caùc protocorm naøy nhoû,
coù moät soá protocorm coù maøu traéng. Haàu heát caùc protocorm môùi
ñeàu khoâng baät choài.
¾ Trong caùc moâi tröôøng K1, K2, K3, döôùi taùc duïng cuûa kích thích toá BA,
caùc maãu caáy ñeàu taïo thaønh protocorm môùi. Caùc protocorm taïo thaønh
caøng nhieàu khi noàng ñoä kích thích toá taêng leân, nhöng chaát löôïng
protocorm thì ngöôïc laïi (protocorm nhoû vaø traéng). Nhö vaäy, vôùi noàng
ñoä kích thích toá thích hôïp seõ taùc ñoäng toát ñeán söï phaân chia teá baøo,
nhöng khi noàng ñoä khaù cao, thì cuõng coù theå gaây ñoäc.
- Sau 2 tuaàn, trong caùc moâi tröôøng K4, K5, K6, ñaõ thaáy xuaát hieän
protocorm môùi. Tuy nhieân, sau 4 tuaàn, soá löôïng protocorm naøy
haàu nhö khoâng ñoåi. Trong moâi tröôøng K5 vaø K6, caùc protocorm
coù maøu xanh möôùt, to, coù loâng huùt. Soá löôïng protocorm trong
moâi tröôøng K6, ít hôn, protocorm coù maøu xanh hôi vaøng, nhoû.
- Sang ñeán tuaàn thöù 3, caùc protocorm baät choài, sang ñeán tuaàn thöù
4 caùc protocorm phaùt trieån maïnh, giai ñoaïn naøy haàu heát caùc maãu
haïn cheá taïo protocorm maø chæ chuû yeáu taïo choài. So saùnh giöõa
cacù moâi tröôøng, thì moâi tröôøng K5 taïo theâm nhieàu choài môùi hôn,
caùc choài môùi coù maøu xanh möôùt, vaø khi baät choài thì choài xanh
toát vaø ñoàng loaït hôn hai moâi tröôøng coøn laïi, coù moät soá choài coù reã
nhoû, maøu traéng, daøi töø 0,1-0,3 cm.
¾ Coù söï khaùc bieät roõ reät veà soá löôïng choài môùi, chieàu cao choài vaø chieàu
daøi laù giöõa caùc moâi tröôøng chæ coù kích thích toá BA, vaø caùc moâi tröôøng
coù BA vaø IAA. Ôû caùc moâi tröôøng chæ coù BA, sang ñeán tuaàn thöù 4, caùc
protocorm môùi baät choài, nhöng soá löôïng raát ít, choài phaùt trieån chaäm,
vaø thaáp. Caùc moâi tröôøng naøy chæ chuû yeáu taïo theâm protocorm môùi, ít
taïo choài. Trong khi ñoù, caùc moâi tröôøng coù BA vaø IAA, caùc maãu caáy
chuû yeáu taïo choài, haïn cheá vieäc taïo thaønh protocorm. Nhö vaäy, chuùng
toâi nhaän thaáy, söï keát hôïp giöõa BA vaø IAA thì coù lôïi hôn cho vieâc taïo
choài môùi, phaùt trieån caây con ñeå söû duïng cho caùc thí nghieäm veà sau.
Toùm laïi:
- Ñoái vôùi thí nghieäm nhaân protocorm, thì söû duïng moâi tröôøng K2
vaø K5 ñeàu toát, nhöng neáu söû duïng moâi tröôøng K5, thì seõ taïo
thaønh nhieàu choài môùi hôn, coù chieàu cao, vaø thích hôïp cho thí
nghieäm ra reã sau ñoù.
- Neáu söû duïng moâi tröôøng K5 cho quaù trình nhaân gioáng thì heä soá
nhaân laø:
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 40
Cuïm choài ban ñaàu ñöôïc taùch laøm 3, caáy chuyeàn sang moâi
tröôøng K5. Sau 4 tuaàn, töø moät cuïm choài, thu ñöôïc 4 choài cao
3-4 cm. Nhö vaäy veà maët lyù thuyeát, ta tính ñöôïc heä soá nhaân
choài laø 3x412 choài/naêm.
Sau 6 tuaàn, caùc caây con coù chieàu cao 3-4 cm vaø coù 2-3 laù ñöôïc taùch ra ñeå ñöa
vaøo thí nghieäm taïo reã. Caùc choài thaáp cuõng ñöôïc taùch ra, tieáp tuïc ñöa vaøo moâi
tröôøng K5, ñeå phaùt trieån chieàu cao. Caùc protocorm coøn laïi cuõng ñöïôc taùch ra vaø
ñöa vaøo moâi tröôøng K2.
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 41
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 42
V. Thí nghieäm 5:
Nhöõng caây con trong thí nghieäm 4 coù chieàu cao töø 3-4 cm, coù töø 2-3 laù ñöôïc caáy
vaøo moâi tröôøng ra reã, sau 4 tuaàn theo doõi keát quaû ghi nhaän ñöôïc nhö sau:
Kích thích
toá
Noàng ñoä
(ppm)
Kyù hieäu Soá löôïng reã Chieàu daøi reã
(cm)
Tyû leä caây
ra reã(%)
Ghi chuù
0 K0 1-3 0,3-0,7 63,9 Phaùt trieån chieàu
cao.
0,1 KN1 2-4 0,7-2 83,33 Caây thaáp, phaùt
trieån khoâng ñeàu.
0,5 KN2 4-6 2-4 94,44 Laù daøi, xanh, phaùt
trieån toát vaø ñoàng
ñeàu.
NAA
1 KN3 3-4 1-5 90,22 Thaân oám, laù vaø reã
daøi.
0,1 KI1 1-3 0,5-1,2 62,5 Ít reã, laù ít vaø
ngaén.
0,5 KI2 2-3 1-4,5 69,44 Phaùt trieån toát,
nhöng khoâng ñeàu,
thaân thaáp, reã daøi.
IAA
1 KI3 1-3 1,5-3,5 66,67 Caây thaáp, reã ít, laù
daøi.
0,1 KB1 2-4 2-3 77,78 Ít laù, phaùt trieån
khoâng ñeàu.
0,5 KB2 1-3 1-2,5 91,67 Laù maøu xanh phaùt
trieån toát, ñoàng
ñeàu.
IBA
1 KB3 1-3 1-5 72,22 Nhieàu laù, thaân
ngaén, reã daøi.
Baûng 6: Keát quaû thí nghieäm taïo reã treân moâi tröôøng Knudson’C, boå sung NAA,
IAA, IBA vôùi caùc noàng ñoä khaùc nhau (sau 4 tuaàn).
- Hai tuaàn sau khi caáy vaøo moâi tröôøng ra reã, caây baét ñaàu taêng
chieàu cao vaø reã xuaát hieän.
- Sau 4 tuaàn, reã phaùt trieån maïnh, nhöng tuøy theo töøng loaïi moâi
tröôøng maø reã, laù vaø phaùt trieån khaùc nhau.
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 43
Döïa vaøo baûng keát quaû chuùng toâi nhaän thaáy:
- Trong moâi tröôøng ñoái chöùng K0 , sau 4 tuaàn, choài ra reã chaäm, chæ
coù 1-3 reã vaø chieàu daøi töø 0,3-0,7 cm.
Trong moâi tröôøng coù boå sung kích thích toá, kích thöôùc caây vaø reã coù söï
bieán ñoåi roõ reät tuøy theo tuøy loaïi kích thích toá vaø noàng ñoä.
- Trong moâi tröôøng boå sung kích thích toá IAA, haàu nhö khoâng coù
söï cheânh leäch tyû leä caây ra reã, tyû leä thaáp chæ treân 60% . Soá löôïng
reã khoaûng 1-3, nhöng maäp vaø daøi. Caây con thaáp, soá löôïng laù ít,
2-3 laù, laù coù maøu xanh ñaäm.
- Caùc moâi tröôøng KB1, KB2, KB3, tyû leä caây ra reã khaù cao, vaø coù söï
cheânh leäch roõ raøng. Moâi tröôøng KB2 coù tyû leä caây ra reã cao hôn,
nhöng reã ngaén hôn vaø coù ít laù hôn so vôùi moâi tröôøng KB3.
- Trong moâitröôøng KN1, KN2, KN3, coù tyû leä caây ra reã cao. Caùc
caây con coù nhieàu laù, laù daøi, coù maøu xanh möôùt. Caây con cao,
khoeû coù nhieàu reã, vaø daøi. Trong moâi tröôøng KN2, tyû leä caây ra reã
cao nhaát (94,44%), reã daøi, maäp, coù maøu xanh. Caây con coù nhieàu
laù, khoeû maïnh seõ phaùt trieån raát toát khi chuyeån sang giai ñoaïn
chuyeån tieáp tröôùc khi ra vöôøn öôm.
¾ Nhìn chung, döôùi taùc duïng cuûa caùc kích thích toá NAA, IAA, IBA laø
caùc auxin, seõ gaây ra söï giaûm ñoä pH trong thaønh teá baøo neân hoaït hoaù
caùc enzym phaân huyû caùc polysaccharide laø pectinmetylesteraza lieân
keát giöõa caùc sôïi cellulose laøm chuùng loûng leûo. Vaùch teá baøo meàm ra,
trôû neân loûng leûo hôn laøm teá baøo keùo daøi ra. Do ñoù vôùi haøm löôïng
auxin taêng daàn thì soá löôïng vaø chieàu daøi reã cuõng taêng theo. Trong
caùc auxin thì NAA, IBA ñöôïc söû duïng nhieàu hôn trong moâi tröôøng
nuoâi caáy moâ. IAA ít ñöôïc söû duïng vì ít beàn khi haáp khöû truøng moâi
tröôøng [10].
Toùm laïi moâi tröôøng toát nhaát cho söï taïo reã lan Dendrobium laø moâi tröôøng
Knudson’C boå sung 0,5ppm NAA. Trong moâi tröôøng naøy caây coù theå gia
taêng chieàu cao, soá löôïng reã vaø cöùng caùp hôn. sau khi caây taïo ñöôïc boä reã
cöùng caùp, caây khoeû maïnh thì coù theå ñöa caây vaøo giai ñoaïn chuyeån tieáp
tröôùc khi ñem ra troàng ngoaøi vöôøn.
Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 44
Hình 4.5: Caây ra reã treân moâi tröôøng Knudson’C vôùi caùc noàng ñoä vaø kích toá khaùc
nhau, sau 4 tuaàn.
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Keát luaän – Ñeà nghò
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 36
PHAÀN V: KEÁT LUAÄN – ÑEÀ NGHÒ
I. Keát luaän
Töø nhöõng keát quaû ñaït ñöôïc, chuùng toâi ñöa ra moät soá keát luaän sau:
¾ Maãu khöû truøng laø quaû lan Dendrobium coøn xanh. Vì maãu haït gieo naèm beân
trong, neân neáu tieán haønh röûa maãu kyõ vaø ñoát baèng coàn 1 laàn thì coù theå loaïi boû
hoaøn toaøn caùc taùc nhaân gaây nhieãm. Haït khoâng bò aûnh höôûng vaø khi gieo vaøo
moâi tröôøng seõ phuïc hoài raát nhanh.
¾ Moâi tröôøng MS coù 1 ppm BA cho söï naåy maàm cuûa haït lan Dendrobium toát
hôn so vôùi moâi tröôøng Knudson’C.
¾ Söï taïo protocorm trong moâi tröôøng Knudson’C coù boå sung kích thích toá BA
laø toát nhaát.
¾ Ñoái vôùi thí nghieäm nhaân protocorm söû duïng moâi tröôøng Knudson’C boå sung
2ppm BA vaø 0,5 ppm IAA, thì seõ taïo thaønh nhieàu choài môùi hôn, coù chieàu
cao, vaø thích hôïp cho thí nghieäm ra reã sau ñoù. Vôùi heä soá nhaân choài laø 3x412
choài/naêm.
¾ Moâi tröôøng toát nhaát cho söï taïo reã lan Dendrobium laø moâi tröôøng Knudson’C
boå sung 0,5ppm NAA.
Töø keát quaû nghieân cöùu treân chuùng toâi ñöa ra quy trình nhaân gioáng lan
Dendrobium baèng phöông phaùp gieo haït in-vitro nhö sau:
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Keát luaän – Ñeà nghò
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 37
Hình 5.1: Quy trình nhaân gioáng lan Dendrobium baèng phöông phaùp gieo haït in-vitro.
Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Keát luaän – Ñeà nghò
SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân Trang 38
II. Ñeà nghò:
Do thôøi gian thöïc hieän ñeà taøi coù haïn neân chuùng toâi chæ môùi hoaøn thaønh ñöôïc giai
ñoaïn gieo haït vaø nhaân gioáng in-vitro. Trong thôøi gian tôùi, neáu coù ñieàu kieän chuùng
toâi seõ tieán haønh giai ñoaïn ñöa caây con ra vöôøn öôm vaø tieáp tuïc nghieân cöùu caùc thí
nghieäm khaùc nhö:
- Khaûo saùt aûnh höôûng ñoä chín cuûa quaû ñeán söï naûy maàm cuûa haït.
- So saùnh khaû naêng nhaân choài môùi so vôùi caùc phöông phaùp nhaân gioáng
lan Dendrobium khaùc.
- Keát hôïp vôùi kyõ thuaät lai gioáng höõu tính nhaèm ñöa ra nhöõng gioáng lan
môùi.
Các file đính kèm theo tài liệu này:
- Unlock-a4.PDF