Đặc điểm bệnh tích của cá mú gây nhiễm vi khuẩn Photobacterium damselae đột biến giảm độc lực

KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 84 !C I"M B*NH TÍCH C<A CÁ MÚ GÂY NHI?M VI KHU@N Photobacterium damselae GT BIN GIM GC LIC Lê Minh H6i1, Phm Th Tâm2, Tơ Long Thành3, M9n H@ng Ph#c4 TĨM TT Cá gây nhim v#i các dịng $)t bi<n T4.3K8.2 và T4.3U6 $ u th3 hi8n k<t qu6 gi6m $)c lFc $áng k3 so v#i ch"ng gi.ng g.c, tP l8 cá ch<t sau khi gây nhim tng bng là: 8% và 4%, cá ch<t sau gây nhim 2-5 ngày và khơng cĩ các bi3u hi8n c"a b8nh tK huy<t trùng. Tồn b) cá $%c gây nhim các ch"ng P. damselae T1.7 và T4.3 ch<t trong thUi gian 3-7 ngày sau gây nhim, cá ch<t cĩ bi3u hi8n $i3n hình c"a b8nh tK huy<t trùng. Các tpn thng $i th3 C cá $%c gây nhim bCi các ch"ng P. damselae T1.7 và T4.3 ch" y<u t;p trung C lách, gan, th;n và tim; 100% cá thí nghi8m cĩ các bi3u hi8n b8nh tích. TP l8 cá cĩ bi3u hi8n b8nh tích $i th3 C lơ gây nhim v#i dịng T4.3K8.2 là 4% và C lơ gây nhim dịng T4.3U6 khơng cĩ cá th3 nào cĩ bi3u hi8n b8nh tích k3 c6 các trUng h%p cá ch<t sau khi tiêm. Ch"ng vi khumn T4.3U6 an tồn $.i v#i cá thí nghi8m, cĩ th3 sL dKng $3 phát tri3n s6n xu5t v c-xin nh%c $)c phịng b8nh tK huy<t trùng C cá. TX khố: P. damselae, $)t bi<n, gi6m $)c lFc, mơ b8nh h2c, b8nh tích, cá mú. 1. T VN  3 B8nh tK huy<t trùng (Photobacteriosis hay Pasteurellosis) cịn $%c g2i là xu5t huy<t nhim trùng là cn b8nh gây ch<t t#i 50% qu^n th3 cá bi3n tF nhiên C My (Snieszko và c)ng sF, 1964). DFa trên nhi u $Bc tính v;t lý và sinh hĩa, ban $^u vi khumn này $%c tm thUi $Bt trong chi Pasteurella, tuy nhiên, Janssen và Surgalla (1968) $ã nghiên cbu v hình thái, sinh lý và huy<t thanh h2c và k<t lu;n rwng vi khumn là m)t lồi m#i và $ ngh tên Pasteurella piscicida. MBc dù v;y, các nhà phân loi vi khumn khơng th.ng nh5t cách phân loi này bCi lJ Pasteurella piscicida thi<u các $Bc $i3m c"a Pasteurella, nh: thi<u nitrat reductaza (men khL nitrat), kh6 nng chu pH ngồi gi#i hn bình thUng, nhi8t $) sinh trCng th5p nh5t. Loi vi khumn này khơng cĩ trong sách h#ng d9n sL dKng vi khumn cĩ h8 th.ng c"a Bergey (Mannheim, 1984) hoBc "Danh sách các tên vi khumn $ã $%c phê duy8t" (Skerman và c)ng sF, 1989). Tuy nhiên, tên $ã $%c sL dKng cho $<n nm 1995, lồi vi khumn này $%c chính thbc $pi tên thành Photobacterium damselae dFa trên chuŠi ARN ribosom 16S (Gauthier và c)ng sF, 1995). 1 Trường Đại học Vinh 2 Viện Đại học Mở Hà Nội 3 Trung tâm Chẩn đốn Thú y Quốc gia 4 Viện Cơng nghệ Sinh học MKc $ích c"a nghiên cbu này là xác $nh kh6 nng gây b8nh tích c"a các dịng vi khumn P. damselae $)t bi<n gi6m $)c lFc tX $ĩ cĩ c sC khoa h2c $3 lFa ch2n dịng vi khumn nh%c $)c $3 thFc hi8n các nghiên cbu phát tri3n vc-xin phịng b8nh. 2. I TNG VÀ PHNG PHÁP NGHIÊN CU 2.1. .i t%ng nghiên cbu Cá mú cĩ kích th#c 50-100 g $%c gây nhim bCi các ch"ng vi khumn P. damselae. 2.2. Phng pháp nghiên cbu 2.2.1. Phng pháp phân l;p vi khumn P. damselae $%c phân l;p trên các m9u gan, th;n, da, m t, vây cá thu nghi m c b8nh tK huy<t trùng. Nghi n m9u trong dung dch n#c mu.i 1,5% r@i tng sinh trong mơi trUng BHI vơ trùng. Nuơi l c C 28˚C, 150 vịng/phút trong vịng 24 giU. Canh khumn tng sinh $%c pha lỗng theo h8 s. 10 r@i c5y trên mơi trUng thch Marine, nuơi trong t" 5m $i u ki8n 28˚C trong 24 giU. Các khumn lc cĩ $Bc $i3m $i3n hình c"a vi khumn P. damselae trên mơi trUng thch Marine (khumn lc hình trịn, l@i, bĩng, cĩ màu h@ng hi nâu hoBc màu tr ng $Kc) $%c thu th;p $3 xác $nh lồi dFa trên $Bc $i3m hình thái vi khumn, $Bc $i3m sinh hĩa, $Bc $i3m phân tL. 2.2.2. Phng pháp nhân gi.ng vi khumn Các ch"ng vi khumn sL dKng trong nghiên cbu này $%c li8t kê trong b6ng 1. Vi khumn P. damselae KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 85 $%c tng sinh trong mơi trUng BHI C $i u ki8n nuơi l c C 28˚C, 150 vịng/phút trong vịng 20 giU. Canh khumn ti<p tKc tng sinh c5p 2 trong mơi trUng BHI bp sung 2% NaCl C $i u ki8n nuơi l c C 28˚C, 150 vịng/phút trong vịng 24 giU. Sinh kh.i vi khumn $%c sL dKng $3 gây nhim cho cá nhwm xác $nh b8nh. B6ng 1. Các ch"ng vi khumn P. damselae $%c sL dKng trong thí nghi8m Ch"ng Bc $i3m ch"ng Ngu@n g.c T4.3U6 Ch"ng $)t bi<n bwng UV Lê Minh H6i và cs, 2016 T4.3K8.2 Ch"ng $)t bi<n bwng kháng sinh rifamycin Lê Minh H6i và cs, 2016 T 4.3 Ch"ng tF nhiên Lê Minh H6i và cs, 2016 T1.7 Ch"ng tF nhiên Lê Minh H6i và cs, 2016 2.2.3. Phng pháp gây nhim $)ng v;t thí nghi8m - )ng v;t thí nghi8m: cá mú cĩ kh.i l%ng 50- 100 g, khe mnh $%c nuơi trong b3 nuơi phịng thí nghi8m trong 2 tu^n tr#c khi gây nhim. Thí nghi8m $%c b. trí nh sau: - 04 b3, mŠi b3 nuơi 50 con cá $%c gây nhim v#i 0,5 ml sinh kh.i các ch"ng T4.3K8.2 và T4.3U6, T4.3 và T1.7 cĩ m;t $) 106 CFU/ml. - 01 b3 nuơi cá $.i chbng, khơng $%c gây nhim. - ThUi gian theo dõi: sau mŠi 24 giU trong 30 ngày. 2.2.4. Phng pháp mơ b8nh h2c Các mơ bao g@m: gan, th;n, lách $%c thu th;p tX cá thí nghi8m sau khi gây nhim và sau khi cơng cUng $)c $%c c. $nh trong dung dch buffer fomanlin 10%, sau $ĩ $%c $úc parafin, c t mơ và nhu)m bwng thu.c nhu)m Mayer Hematoxyline và Eosin (HE) theo quy trình và phng pháp c"a Mumford et al. (2007). Các m9u mơ $%c phân tích C $) phĩng $i 15X10 và 15X40 l^n $3 phát hi8n và so sánh các bi<n $pi mơ h2c. 2.2.5. a $i3m và thUi gian nghiên cbu - ThUi gian: TX tháng 3/2017 - 5/2017. - a $i3m: Phịng Cơng ngh8 Vi sinh - Khoa Cơng ngh8 Sinh h2c - Vi8n i h2c MC Hà N)i. 3. KT QU NGHIÊN CU VÀ THO LU!N 3.1. Bi3u hi8n c"a cá thí nghi8m Quan sát các lơ cá thí nghi8m nh;n th5y, tồn b) cá gây nhim các ch"ng P. damselae T1.7 và T4.3 ch<t trong thUi gian 3-7 ngày sau gây nhim, cá ch<t cĩ bi3u hi8n $i3n hình c"a b8nh tK huy<t trùng, bao g@m: xu5t huy<t tồn thân, loét da, loét mang, m t l@i $Kc, l#p c d#i da cĩ nhi u s c t. melanin màu $en và th3 hi8n d5u hi8u hoi tL, cĩ hi8n t%ng lC loét c"a l#p bi3u bì (hình 1). Các d5u hi8u này hồn tồn phù h%p v#i báo cáo c"a Hawke, 1996 trong thí nghi8m gây nhim cá h@ng v#i vi khumn Photobacterium damselae subsp. piscicida. B6ng 2. K<t qu6 theo dõi tri8u chbng lâm sàng c"a cá thí nghi8m Bi3u hi8n T1.7 T4.3 T4.3K8.2 T4.3U6 Lơ $.i chbng TP l8 ch<t (%) 100 100 8 4 2 Xu5t huy<t thân, mi8ng, mang, vây (%) 100 100 2 0 0 Hoi tL, lC loét trên thân (%) 100 100 0 0 0 M t $Kc (%) 100 100 16 0 0 Ph6n x b t m@i ch;m (%) 100 100 12 0 0 Thay $pi s c t. da (%) 100 100 12 0 0 Thay $pi t;p tính bi l)i (%) 100 100 8 4 2 Hình 1. Bi3u hi8n b8nh tích bên ngồi c"a cá gây nhim ch"ng P. damselae tF nhiên KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 86 Lơ cá gây nhim v#i các dịng $)t bi<n T4.3K8.2 và T4.3U6 $ u th3 hi8n k<t qu6 gi6m $)c lFc $áng k3 so v#i ch"ng gi.ng g.c, tP l8 cá ch<t sau khi gây nhim tng bng là: 8% và 4%, cá ch<t sau gây nhim 2-5 ngày và khơng cĩ các bi3u hi8n nh mơ t6 c"a Hawke, 1996. 3.2. Bi3u hi8n b8nh tích $i th3 Các tpn thng $i th3 C các lơ cá $%c gây nhim bCi các ch"ng Photobacter damselae tF nhiên T1.7 và T4.3 ch" y<u t;p trung C lách, gan, th;n và tim, 100% cá thí nghi8m cĩ các bi3u hi8n b8nh tích. Các c quan này cĩ bi3u hi8n sng to b5t thUng (g5p 4-10 l^n so v#i $.i chbng) và xu5t hi8n các ht màu tr ng (hình 2), tP l8 cá cĩ bi3u hi8n b8nh tích C gan chi<m 98% và 94%, lách chi<m 96% và 96%, th;n chi<m 94% và 96%, tim chi<m 32% và 30% tng bng v#i các lơ gây nhim ch"ng T1.7 và T4.3 (b6ng 3). B6ng 3. Bi3u hi8n b8nh tích do P. damselae trên cá thí nghi8m Ch"ng vi khumn thí nghi8m S. cá cĩ b8nh tích $i3n hình (n) TP l8 cá cĩ b8nh tích $i3n hình (%) C quan cĩ b8nh tích T^n su5t xu5t hi8n b8nh tích (%) Gan 98,00 Lách 96,00 Th;n 94,00 T1.7 50 100 Tim 32,00 Gan 94,00 Lách 96,00 Th;n 96,00 T4.3 50 100 Tim 30,00 Gan 4,00 Lách 4,00 Th;n 4,00 T4.3K8.2 2 4,00 Tim 2,00 Gan 0 Lách 0 Th;n 0 T4.3U6 0 0 Tim 0 Gan 0 Lách 0 Th;n 0 .i chbng 0 0 Tim 0 Hình 2. Bi3u hi8n b8nh tích C các c quan bên trong c th3 c"a cá gây nhim (A: Th;n sng to b5t thUng, xu5t huy<t, cĩ các u ht màu tr ng; B, C: Gan sng b5t thUng, cĩ các $i3m hoi tL; 1 và 2: Gan cá gây nhim ch"ng P. damselae tF nhiên; 3: Gan cá $.i chbng) .i v#i lơ cá $%c gây nhim bCi các dịng vi khumn gây $)t bi<n gi6m $)c lFc nh;n th5y: tP l8 cá cĩ bi3u hi8n b8nh tích C lơ gây nhim v#i dịng T4.3K8.2 là 4% và C lơ gây nhim dịng T4.3U6 khơng cĩ cá th3 nào cĩ bi3u hi8n b8nh tích k3 c6 các trUng h%p cá ch<t sau khi tiêm. K<t qu6 trong b6ng 2 và 3 cho th5y: các trUng h%p cá ch<t sau khi gây nhim dịng T4.3U6 cĩ th3 là do tác $)ng c h2c trong quá trình tiêm chb khơng liên quan $<n $)c lFc c"a vi khumn. 3.3. Bi3u hi8n b8nh tích vi th3 K<t qu6 ki3m tra các tiêu b6n mơ h2c c"a cá gây nhim các ch"ng P. damselae T1.7, T4.3, T4.3K8.2 và KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 87 T4.3U6 cho th5y: C các lơ cá gây nhim v#i các ch"ng tF nhiên T1.7, T4.3 các c quan gan, th;n và lách $ u cĩ bi3u hi8n b8nh tích vi th3, $.i v#i mơ tim, tP l8 cĩ b8nh tích tng bng là 34% và 32%. Trong mơ liên k<t gi?a các ti3u thùy gan cĩ nhi u t< bào $i thFc bào t;p trung thành p. Nh?ng p b8nh này C dng tng sinh lan ra mơ xung quanh hoBc liên k<t li thành các p to nh khác nhau. Trong m)t s. trUng h%p nh‰, các t< bào tng sinh nwm xen kJ lan tràn trong các h.c gan, chèn ép và phá h"y c5u trúc bình thUng c"a gan. – lách, các t< bào $i thFc bào thUng t;p trung xung quanh $)ng mch làm r.i lon tu^n hồn gây tK huy<t, xu5t huy<t và hoi tL (hình 3). B6ng 4. T^n su5t xu5t hi8n các tpn thng vi th3 trong các tp chbc c"a cá thí nghi8m (n v tính: %) Ch"ng vi khumn thí nghi8m Gan Lách Th;n Tim T1.7 100,00 100,00 100,00 34,00 T4.3 100,00 100,00 100,00 32,00 T4.3K8.2 24,00 22,00 18,00 12,00 T4.3U6 2,00 2,00 2,00 - .i chbng - - - - Hình 3. Bi3u hi8n b8nh tích C các c quan bên trong c th3 c"a cá gây nhim (A: Tpn thng hoi tL trong tp chbc gan cá gây nhim ch"ng T4.3; B) Tpn thng hoi tL C mơ th;n cá gây nhim ch"ng; T1.7 C) SF tng sinh c"a các $i thFc bào trong mơ lách C cá gây nhim ch"ng T4.3U6) .i v#i các lơ cá gây nhim v#i hai dịng vi khumn $)t bi<n gi6m $)c lFc T4.3K8.2 và T4.3U6, tP l8 cá cĩ b8nh tích gi6m rõ r8t. – lơ cá gây nhim dịng T4.3K8.2, tP l8 cĩ b8nh tích C mơ gan, th;n, lách, tim tng bng là 24%, 22%, 18%. – lơ cá gây nhim dịng T4.3U6, tP l8 b8nh tích C gan, lách, th;n là 2% và khơng cĩ b8nh tích C mơ tim, bi3u hi8n b8nh tích C các lơ cá này ch" y<u là sF tng sinh $i thFc bào trong các mơ lách; C gan, các t< bào tng sinh nwm xen kJ trong các h.c gan; C các mơ gan, th;n, lách, tim khơng cĩ bi3u hi8n tpn thng. TX các k<t qu6 thu $%c cĩ th3 th5y, dịng vi khumn T4.3U6 an tồn $.i v#i cá thí nghi8m, cĩ th3 sL dKng $3 phát tri3n s6n xu5t v c-xin nh%c $)c phịng b8nh tK huy<t trùng C cá. 3.4. Bc $i3m sinh hĩa c"a các dịng vi khumn sau khi gây nhim @ng thUi v#i vi8c ki3m tra b8nh tích $i th3, vi th3, m9u máu cá gây nhim $%c thu th;p, phân l;p li vi khumn và ki3m tra các $Bc $i3m sinh hĩa $3 xác $nh sF cĩ mBt c"a vi khumn P. damselae. K<t qu6 ki3m tra phân tích sinh hĩa tX m9u máu cá gây nhim cho th5y $ã phân l;p $%c các ch"ng vi khumn v#i các $Bc $i3m sinh hĩa gi.ng v#i ch"ng T1.7, T.4.3 và $Bc trng c"a P. damselae subsp. piscicida, bao g@m: Gram âm, khơng cĩ tiên mao, khơng cĩ kh6 nng di $)ng, khơng cĩ hot tính c"a nitrat reductaza, lipaza, gelatinaza, esculinaza và ureaza; âm tính $.i v#i thL nghi8m s6n xu5t indol, H2S và sL dKng D-xyloza, maltoza, xelobioza, glutamat, axetat, pyruvat (b6ng 5). DFa trên các k<t qu6 thu $%c, $ã xác $nh các ch"ng phân l;p li cĩ $Bc tính sinh hĩa hồn tồn gi.ng v#i ch"ng vi khumn sL dKng $3 gây nhim và thu)c lồi P. damselae subsp. piscicida (Bakopoulos và c)ng sF, 1995). B6ng 5. Bc $i3m sinh hĩa c"a các ch"ng vi khumn phân l;p li tX cá gây nhim Các ch"ng vi khumn phân l;p li tX cá gây nhim v#i: Bc $i3m sinh hĩa T1.7 T4.3 T4.3K8.2 T4.3U6 .i chbng Gram - - - - - Kh6 nng di $)ng - - - - - Catalaza + + + + + Sinh B-Galactosidaza (OPNG) - - - - - Sinh acginin dihydrolaza + + + + + KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 88 Sinh lizin decacboxylaza - - - - - Sinh ornithin decacboxylaza - - - - - SL dKng xitrat (CIT) - - - - - Sinh H2S (H2S) - - - - - Sinh ureaza (URE) - - - - - Sinh tryptophan deaminaza - - - - - Sinh indol (IND) - - - - - Sinh gelatinaza (CEL) - - - - - Lên men glucoza (GLU) + + + + + Lên men manitol (MAN) - - - - - Lên men inositol (INO) - - - - - Lên men socbitol (SOR) - - - - - Lên men rhamnoza (RHA) - - - - - Lên men sucroza (SAC) - - - - - 4. KT LU!N Cá gây nhim các ch"ng P. damselae T1.7 và T4.3 ch<t trong thUi gian 3-7 ngày sau gây nhim, cá ch<t cĩ bi3u hi8n $i3n hình c"a b8nh tK huy<t trùng. Cá gây nhim v#i các dịng $)t bi<n T4.3K8.2 và T4.3U6 $ u th3 hi8n k<t qu6 gi6m $)c lFc $áng k3 so v#i ch"ng gi.ng g.c, tP l8 cá ch<t sau khi gây nhim tng bng là: 8% và 4%, cá ch<t sau gây nhim 2-5 ngày và khơng cĩ các bi3u hi8n $i3n hình c"a b8nh tK huy<t trùng. TP l8 cá cĩ bi3u hi8n b8nh tích khi gây nhim v#i ch"ng T1.7 và T4.3 là 100%, v#i ch"ng T4.3K8.2 là 4% và ch"ng T4.3U6 khơng cĩ cá th3 nào cĩ bi3u hi8n b8nh. Dịng vi khumn T4.3U6 an tồn $.i v#i cá thí nghi8m, cĩ th3 sL dKng $3 phát tri3n s6n xu5t v c-xin nh%c $)c phịng b8nh tK huy<t trùng C cá. TÀI LI#U THAM KHO 1. Lê Minh H6i, Phm Th Tâm, Tơ Long Thành, M9n H@ng Ph#c (2016). Phân l;p và xác $nh m)t s. $Bc $i3m sinh h2c c"a vi khumn Photobacterium damselae gây b8nh tK huy<t trùng trên cá bi3n. Tp chí NN và PTNT s. 20. 2. Lê Minh H6i, Phm Th Tâm, Tơ Long Thành (2017). Nghiên cbu to ch"ng vi khumn Photobacterium damselae $)t bi<n gi6m $)c lFc. Tp chí Thú y s. 1. 3. Bakopoulos, V., A. Adams, and R. H. Richards, 1995. Some biochemical properties and antibiotic sensitivities of Pasteurella piscicida isolated in Greece and comparison with strains from Japan, France and Italy. Journal of Fish Diseases 18:1-7. 4. Gauthier, G., B. LaFay, R. Ruimy, V. Breittmayer, J. L. Nicolas, M. Gauthier, and R. Christen, 1995. Small-subunit rRNA sequences and whole DNA relatedness concur for the reassignment of Pasteurella piscicida (Snieszko et al.) (Janssen and Surgalla) to the genus Photobacterium as Photobacterium damsela subsp. piscicida comb. nov. International Journal of Systematic Bacteriology 45(1):139-144. 5. Hawke, J. P., 1996. Importance of a siderophore in the pathogenesis and virulence of Photobacterium damsela subsp. piscicida in hybrid striped bass (Morone saxatilis x Morone chrysops). Ph.D. Dissertation, Louisiana State University, Baton Rouge, Louisiana. 6. Janssen, W. A., and M. J. Surgalla, 1968. Morphology, physiology, and serology of a Pasteurella species pathogenic for white perch (Roccus americanus). Journal of Bacteriology 96(5):1606-1610. 7. Mannheim, 1984; Mannheim, W. 1984; Pasteurellaceae Pohl, 1981a. Pages 550-552. in N. R. Krieg and J. G. Holt (ed.). Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Vol. 1. The Williams and Wilkins Co., Baltimore, MD. 8. Snieszko, S. F., G. L. Bullock, E. Hollis, and J. G. Boone, 1964. Pasteurella sp. from an epizootic of white perch (Roccus americanus) in Chesapeake Bay tidewater areas. Journal of Bacteriology 88:1814- 1815. KHOA HC CƠNG NGH N«ng nghiƯp vµ ph¸t triĨn n«ng th«n - KỲ 1 - TH¸NG 3/2018 89 9. Skerman và c)ng sF, 1989- Skerman, V. B. D., V. McGowan, and P. H. A. Sneath, 1989. Approved lists of bacterial names. Amended edition p. 72. American Society for Microbiology, Washington, D.C. THE HISTOPATHOLOGY ON GROUPERS INFECTED BY CLONES OF Photobacterium damselae MUANT Le Minh Hai1, Pham Thi Tam2, To Long Thanh3, Man Hong Phuoc4 1 Vinh University 2 Ha Noi Open University 3 National Centre for Veterinary Diagnostics 4 Instute of Biotechnology Summary Fish infected with T4.3K8.2 and T4.3U6 variants are also present of reducing significant toxcic level in comparition with the origine, the mortality rate after the occurrence of the disease are 8% and 4%, respectively. Fish died after 2-5 days infected and no disease symton. All infected fishes of P. damselae T1.7 and T4.3 died within 3-7 days after infected, dead fishes showing the presencetypicallyof blood clotting. Individuals infected with P. damselae T1.7 and T4.3 viruses are the major focus in the spleen, liver, kidneys and heart, and 100% of the fish are infected with lesions. The risk of a cell line of T4.3K8.2 with 4% and at the line of T4.3U6 does not have any other personalizing case after the vaccination. The complete T4.3U6 bacterial strain can be used to develop coronary artery disease in fish. Keywords: P. damselae, mutation, attenuation, histopathology, lesions, seafish. NgUi ph6n bi8n: TS. Hà Ký Ngày nh;n bài: 23/10/2017 Ngày thơng qua ph6n bi8n: 23/11/2017 Ngày duy8t $ng: 30/11/2017