Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng, mật độ ban đầu đến sinh trưởng của hai lòai tảo biển chaetoceros muelleri, tetraselmis suecica và thử nghiệm nuôi sinh khối trong điều kiện ánh sáng tự nhiên ở Thừa Thiên Huế

Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Nông nghiệp và Phát triển nông thôn; ISSN 2588–1191 Tập 126, Số 3D, 2017, Tr. 119–129; DOI: 10.26459/hueuni-jard.v126i3D.4300 * Liên hệ: tvphuong@hueuni.edu.vn Nhận bài: 07–06–2017; Hoàn thành phản biện: 10–07–2017; Ngày nhận đăng: 21–12–2017 ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG DINH DƯỠNG, MẬT ĐỘ BAN ĐẦU ĐẾN INH TRƯỞNG ỦA HAI I TẢ BI N Chaetoceros muelleri, Tetraselmis suecica V THỬ NGHIỆM NUÔI INH KHỐI TR NG ĐI U KIỆN NH NG T NHI N Ở THỪA THI N HUẾ T V 1, N V K anh1, T T N 1, T H 2, K T H 2, V Đ N 2 1 Viện công nghệ sinh học, Đại học Huế, Tỉnh Lộ 10, Phú Vang, Thừa Thiên Huế, Việt Nam 2 Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Huế, 102 Phùng Hưng, Huế, Việt Nam Tóm tắt: Nghiên c u nh m c nh nh hư ng c a môi rường inh ư ng, m ộ an u ến inh rư ng c a i Chaetoceros muelleri, Tetraselmis suecica h nghiệm nuôi inh h i r ng i u iện nh ng nhiên i c c i u iện nuôi c n nh . Kế qu nghiên c u ch h y ch ng Chaetoceros muelleri ph riển nh r ng môi rường F/2, ch ng Tetraselmis suecica ph riển nh r ng môi rường Walne. V i hể ích iếp gi ng an u chiếm 10 % ổng hể ích môi rường nuôi, ch ng Chaetoceros muelleri ph riển t t v i m ộ c c ại (5,55 ± 0,05)×105 tế /mL au 11 ng y nuôi c y, có pha cân ng ổn nh; ch ng Tetraselmis suecica ph riển hể ích iếp gi ng an u 15 % ổng hể ích môi rường nuôi v i (13,48 ± 0,09)×104 tế /mL ng y nuôi h 9 có pha cân ng ổn nh. Sinh h i Chaetoceros muelleri nuôi ng i nhiên au 8 ng y hể ích 50 L ạ m ộ c c ại (4,31 ± 0,08)×105 ế /mL hể ích 1000 L ạ m ộ c c ại (3,17 ± 0,10)×105 ế /mL. Sau 7 ng y nuôi c y ch ng, Tetraselmis suecica ạ m ộ c c ại (14,44 ± 0,14)×104 tế /mL thể ích 50 L ạt m ộ c c ại (9,23 ± 0,32)×104 ế /mL hi nuôi inh h i r ng ể c mp i e 1000 L au 6 ng y nuôi c y. Từ k ó : Chaetoceros muelleri, Tetraselmis suecica, m ộ an u, môi rường nuôi h nghiệm, i , th nghiệm nuôi inh h i 1 Đặt vấ đ Vi t l mắ ích u iên r ng chuỗi th c ăn ư i nư c, chúng l nguồn th c ăn ng hông hể thiếu r ng công nghệ s n xu t gi ng cũng như nuôi hư ng phẩm c a c c i ượng nuôi rồng th y s n. Đặc biệt, vi t l h c ăn ch t c c c giai ạn inh rư ng c a ộng v t hân m m hai m nh vỏ, c c giai ạn u rùng c a một s l i gi p c c [15]. Theo Persoone Claus, có 7 l i o t i ưu l m h c ăn ch ộng v hân m m hai m nh ỏ, gồm Isochrysis galbana, Isochrysis sp., Pavlova lutheri, Tetraselmis suecica, Pseudoisochrysis paradoxa, Chaetoceros p. Skeletonema costatum [12]. Trong s ó, Tetraselmis suecica v Chaetoceros p. l Trần Vinh Phương và CS. Tập 126, Số 3D, 2017 120 c c l i có gi r inh ư ng cao. Tetraselmis suecica có h m lượng cacbohydrat từ 15,6 ến 17,7 %; protein từ 34,4 ến 40,9 % lipi ổng s từ 11,1 ến 16,1 % [13]. Chaetoceros sp. ch a: 12–34 % protein; 1,04–3,01 % chl a; 4,7–6,0 % cacbohydrat 7,2–16 % lipid [6]. Đặc biệ , chúng ch a nguồn PUFAs (polyunsaturated fatty acids) c n thiế ch inh rư ng, ph riển h n hiện ch c năng c a u rùng [7]. Tuy nhiên, trong việc l a chọn l i i l m nguồn th c ăn ch n xu t gi ng, ng i yếu t v inh ư ng, chúng ph i có ích hư c phù hợp, dễ iêu hóa, c ộ ăng rư ng nhanh, phù hợp v i môi rường nuôi c n ổn nh v i s a ộng c a c c yếu t nhiệ ộ, nh ng, pH c a môi rường [6]. D ó, iệc ìm iếm l i i t p ng c c yêu c u ể l m h c ăn r ng qu rình n xu t gi ng th y h i s n l r t c n thiết. Trong b i n y, chúng ôi nghiên c u nh hư ng c a c c môi rường inh ư ng, m t ộ tiếp gi ng an u ến inh rư ng c a hai l i o biển Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica. Từ kết qu nghiên c u rên chúng ôi c nh môi rường inh ư ng, m ộ tiếp gi ng an u phù hợp ch ùng l i o từ ó l m c khoa học ể th nghiệm nuôi inh kh i t r ng i u kiện nh ng nhiên Thừa Thiên Huế h n hiện quy rình hu nhân nuôi inh h i r ng c c i u iện nuôi c y c n nh i m c ích l m h c ăn giai ạn u rùng c a ộng h y n r ng ó có u rùng nga u (Meretrix meretrix). 2 Vật liệu và p p áp u 2.1 Vật liệ u Ch ng Tetraselmis suecica thu n ch ng ược Công y r ch nhiệm hữu hạn T n Hưng, h nh ph Nha Trang nh p khẩu từ Th i Lan ch ng Chaetoceros muelleri ược phân l p từ bờ biển Thu n An Thừa Thiên Huế. C c ch ng ược lưu giữ bộ môn Công nghệ tế h c v t – Viện Công nghệ Sinh học – Đại học Huế. T o gi ng au hi ưa ra hỏi i u kiện phòng hí nghiệm ược nhân c c chai 500 mL v i nư c biển ược x lý chl rine nồng ộ 30 ppm môi rường F/2 [9], v i i u kiện s c hí 24/24h, nhiệ ộ phòng, ộ mặn pH t nhiên c a nư c biển môi rường ch ến khi c c ch ng hích nghi ổn nh v i s a ộng c a c c i u kiện t nhiên ẽ ược nhân nuôi ể tạ ra c c ình gi ng c p. 2.2 p áp u p áp p lập chủng Chaetoceros muelleri: Mẫu t ược phân l p b ng phư ng ph p ch ế n d ng ính hiển i, lam ính, pipe e Pa eur nuôi r ng môi rường F/2 i u kiện nhiệ ộ 22–24 °C cường ộ nh ng 1500–2000 lux. T í ghiệm 1: Ảnh hư ng c a môi rường nuôi ến s inh rư ng c a t o Chaetoceros muelleri Teraselmis suecica Jos.hueuni.edu.vn Tập 126, Số 3D, 2017 121 Hai mư i mili lí (mL) d ch t o gi ng giai ạn ph riển lũy hừa ược c y r ng 280 mL r ng c c môi rường h c nhau. Để có c khoa học cho việc l a chọn môi rường inh ư ng hích hợp nh ch inh rư ng c a từng ch ng loại t , chúng ôi iến h nh l a chọn 3 môi rường inh ư ng hường ùng r ng nghiên c u nuôi inh rư ng t o gồm CT1: Môi rường F/2 [9], CT2: Môi rường Walne [14], CT3: Môi rường TMRL [10]. C c công h c hí nghiệm ược b rí ngẫu nhiên h n n c c can nh a trong su t thể ích 5 L. Mỗi công th c hí nghiệm ược lặp lại 3 l n; tổng s can hí nghiệm l 9 can. Nuôi c y r ng cùng i u kiện: S c hí 24/24h, nhiệ ộ phòng (25–27 °C), ộ mặn (28–30 ‰), pH nhiên c a nư c biển (8–8,5), cường ộ chiếu ng 1.500–3.500 lux. M ộ tế nuôi an u th nghiệm l 5 % thể ích gi ng/thể ích môi rường nuôi (Vgiống/Vmt). T í ệm 2: Thí nghiệm nh hư ng c a m ộ an u ến s ph riển c a t o Tetraselmis suecica Chaetoceros muelleri Để c nh m ộ an u phù hợp r ng nghiên c u inh rư ng c a c c ch ng t o h c nhau chúng ôi iến h nh 4 công h c hí nghiệm v i m ộ tiếp gi ng an u l n lượt 5 %, 10 %, 15 % 20 % (Vgiống/Vmt), ư ng ng v i 20, 40, 60 80 mL d ch t o gi ng giai ạn ph riển lũy hừa 3,8 L; 3,6 L; 3,4 L; 3,2 L môi rường t i ưu ch ph riển c a từng ch ng t ược chọn ra từ hí nghiệm 1. Mỗi công h c hí nghiệm ược lặp lại 3 l n; tổng s can hí nghiệm l 12 can, mỗi can 5 L. Đi u kiện nuôi c y như hí nghiệm 1. T í ệm 3: Th nghiệm nhân nuôi c c ch ng t o Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica r ng i u iện nh ng nhiên Ứng d ng c c ết qu hu ược hí nghiệm 1 2 ể th nghiệm nhân nuôi inh h i vi t o Chaetoceros muelleri Teraselmis suecica trong hệ th ng nuôi ín ể c mp i e. C c lô hí nghiệm ược tiến h nh r ng c c úi nyl n có hể ích 50 L ể composite 1 m3. Nuôi c y r ng cùng i u kiện: S c hí 24/24h, nhiệ ộ phòng (25–27 °C), ộ mặn (28–30‰), pH nhiên c a nư c biển (8–8,5), nh ng nhiên. p áp xá đ á ỉ u Nhiệ ộ pH ược ng ú pH (Hanna HI98127) h ng ng y lúc 8 giờ ng. Cường ộ nh ng ược c nh b ng m y cường ộ nh ng Milwau ee SM700 (50.000 Lux). T n su 3 l n/ng y (10 giờ, 12 giờ 15 giờ). Để c nh t c ộ ăng rư ng c a t o theo từng ng y chúng ôi iến h nh hu mẫu 1 l n/ng y lúc 8–9 giờ ng mỗi ng y mỗi l n l y 5 mL. Mẫu t ược ng trong hộp ng mẫu ược c d nh b ng dung d ch Neu ral Lug l’ . M ộ tế ược c nh b ng buồng ếm Gridded Sedgewick Rafter 1 mm2 v i 1.000 ô c a hãng Wil life Supply Company, M . C thể, lắc u mẫu t , ùng pipe pa er hú 1 mL Trần Vinh Phương và CS. Tập 126, Số 3D, 2017 122 mẫu t o d n u b mặt buồng ếm ã ược y sẵn lamen, ể lắng mộ lúc rồi ưa th rường ính ể ếm, ếm v ính × 10, mỗi mẫu t ược ếm 5 l n. 2.3 p áp xử lý số liệu C c hí nghiệm ược b rí ngẫu nhiên ược lặp lại 3 l n. S liệu hí nghiệm hu ược x lý h ng ê ng ph n m m Excel 2007. 3 K t qu và o luận 3.1 Ả ởng củ ô ờ ô đ n sự s ởng của t o Chaetoceros muelleri và Teraselmis suecica Tr ng c c môi rường inh ư ng F/2, Walne TMRL ược th nghiệm, chúng ôi nh n th y tr ng cùng một ch ng t o yếu t pH hông có biến ộng l n giữa c c môi rường nuôi, Chaetoceros muelleri có pH a ộng trong kho ng 8,1–9,6, Teraselmis suecica có pH a ộng trong kho ng 8,0–9,8 gi r pH ăng n theo m ộ t o; nhiệ ộ hông hí a ộng trong kho ng 24–31 °C; cường ộ nh ng a ộng trong kho ng 1.600–3.300 lux. V i m ộ tiếp gi ng an u 5 % (Vgiống/Vmt), ường c ng inh rư ng c a c c ch ng r ng c c môi rường h c nhau có chênh lệch ng ể (Hình 1, Hình 2). Hì 1. Đường c ng inh rư ng c a ch ng Chaetoceros muelleri r ng c c môi rường nuôi h c nhau Hì 2. Đường c ng inh rư ng c a ch ng t o Tetraselmis suecica r ng c c môi rường nuôi h c nhau Ch ng Chaetoceros muelleri có pha hích nghi ngắn, bắ u inh rư ng au 2 ng y nuôi c y ạt c c ại ng y h 12 r ng môi rường TMRL, ng y th 13 i v i môi rường F/2 ng y h 14 i v i môi rường Walne. Môi rường Walne môi rường F/2 cho m ộ tế ca h n i môi rường TMRL. Tuy ch ng Chaetoceros muelleri có pha cân ng i h n r ng môi rường Walne, nhưng m ộ tế ng y inh rư ng c c ại chỉ ạt (4,38 ± Jos.hueuni.edu.vn Tập 126, Số 3D, 2017 123 0,06)×105 tế /mL, trong khi môi rường F/2 m ộ tế l (5,44 ± 0,04)×105 tế /mL cao g p 27 l n m ộ tế gi ng an u. Ch ng Tetraselmis suecica có pha hích nghi é i r ng h ng 4 ng y, i h n i ch ng Chaetoceros muelleri ạt c c ại sau kho ng 13–14 ng y nuôi c y. Tr ng môi rường Walne F/2, Tetraselmis suecica cũng inh rư ng t h n i môi rường TMRL. Tuy nhiên, r i i Chaetoceros muelleri, r ng nghiên c u n y môi rường F/2, Tetraselmis suecica có m ộ c c ại th p h n môi rường Walne, v i (8,22 ± 0,10)×104 tế /mL có pha vong diễn ra nhanh mạnh h n. Ở môi rường Walne ch ng n y ạt m ộ c c ại cao v i (10,88 ± 0,15)×104 tế /mL, ca g p 21 l n m ộ tế b gi ng an u, ca g p 1,85 l n m ộ tế c c ại ch ng n y ạ ược r ng môi rường TMRL. S h c nhau n y có hể h nh ph n inh ư ng c c môi rường hông gi ng nhau mặc ù c a môi rường u ch a c c h nh ph n chính như ạm, lân. Tuy nhiên, trong môi rường TMRL, nguồn ạm l mu i KNO3; trong hai môi rường F/2 Walne, nguồn ạm u l mu i NaNO3; trong c a môi rường nguồn lân u l Na(H2PO4). Tuy nhiên, hi nh a môi rường inh ư ng hì môi rường F/2 có h m lượng ạm lân h p h n môi rường Walne TMRL. Tuy có h m lượng ạm lân ca h n môi rường F/2, nhưng môi rường TMRL ng i Fe3+ SiO32- ra hông có c c nguyên i lượng h c c c i amin c n thiết cho s inh rư ng ph riển c a vi t o. Đây có hể l lý khiến Tetraselmis suecica r ng môi rường Walne có m ộ h i ca h n i trong môi rường F/2 TMRL. Ng i ra, môi rường Walne r ng hí nghiệm n y hông có nguồn silic từ mu i Na2SiO3, r ng hi ó môi rường F/2 v i h m lượng Na2SiO3 l 0,03 mg/L. T ilic òi hỏi ph i có ilic ch c c giai ạn r ng qu rình phân như ổng hợp DNA, tổng hợp enzyme thymidylate ina e, DNA p lymera e, chl r phyll pr ein cũng như ham gia r ng c c ch c năng quan trọng c a qu rình ra ổi ch t [3]. Vì y, ây có hể l nguyên nhân ẫn ến môi rường Walne hông ổ sung mu i ilic hông ph i l môi rường t i ưu ch Chaetoceros muelleri. Kết qu phân ích rên ch h y môi rường F/2 hích hợp cho s ph riển c a Chaetoceros muelleri môi rường Walne hích hợp cho s ph riển c a Tetraselmis suecica. Kết qu n y phù hợp v i nghiên c u c a Nguyễn Th Thúy Nguyễn T n S rên ch ng Tetraselmis suecica hi nghiên c u rên a môi rường Walne, F/2 TH04 [4], v cũng phù hợp v i kết qu nghiên c u c a Nguyễn Thanh Mai c . rên ch ng Chaetoceros calcitrans r ng c c môi rường TT3, TMRL, F/2 [3]. Từ kết qu rên, chúng ôi chọn môi rường F/2 l m môi rường nuôi c y ch ng Chaetoceros muelleri môi rường Walne l m môi rường nuôi c y ch ng Tetraselmis suecica ể tiến h nh c c hí nghiệm tiếp theo. Trần Vinh Phương và CS. Tập 126, Số 3D, 2017 124 3.2 Ả ởng của mậ độ t bào b đ đ n sự s ởng của chủng Chaetoceros muelleri và Tetraselmis suecica M ộ an u l một trong những yếu t có liên quan m t thiế ến sinh kh i hời gian ạt m ộ c c ại c a vi t l n quan trọng ược những người s n xu t gi ng quan âm. Không ph i m ộ an u n cũng có hể ph riển t ược. M ộ ban u cũng h c nhau i v i từng l i . Có l i òi hỏi m ộ ban u cao như Nannochloropsis oculata (20 triệu tế /mL), nhưng cũng có l i c n m ộ an u th p như Isochrysis galbana (2 triệu tế /mL) [1]. X c nh m ộ an u hích hợp r có ý nghĩa trong s n xu t, nếu m ộ an u cao sẽ lãng phí nguồn t o gi ng; còn nếu m ộ th p sẽ é i hời gian nuôi. Kết qu nh hư ng c a m ộ tế an u ến s inh rư ng c a ch ng Chaetoceros muelleri ch ng Tetraselmis suecica ược rình y Hình 3 Hình 4. Biến ộng c c yếu t môi rường ược c c lô hí nghiệm au 15 ng y he õi ch h y nhiệ ộ a ộng trong kho ng 24,0–31,0 °C, cường ộ nh ng a ộng trong kho ng 1.500–3.450 lux, pH c a ch ng Chaetoceros muelleri a ộng trong kho ng 8,0–9,4 Teraselmis suecica có pH a ộng trong kho ng 8,0–10,2. Hì 3. Đồ th ường c ng inh rư ng c a t o Chaetoceros muelleri r ng môi rường F/2 v i c c m ộ an u h c nhau Hì 4. Đồ th ường c ng inh rư ng c a t o Tetraselmis suecica tr ng môi rường Walne v i c c m ộ an u h c nhau Chúng ôi nh n th y khi m ộ an u h c nhau, c ộ ăng rư ng tế cũng h c nhau. Ch ng Chaetoceros muelleri v i m ộ an u l (0,67 ± 0,02)×105 tb/mL, (20 %, Vgiống/Vmt) au 8 ng y ạt m ộ c c ại (5,69 ± 0,05)×105 tb/mL, v i m ộ an u (0,54 ± 0,02)×105 (15 %, Vgiống/Vmt); (0,39 ± 0,03)×105 (10 %, Vgiống/Vmt); (0,23 ± 0,02)×105 tb/mL (5 %, Vgiống/Vmt), m ộ tế c c ại l n lượt (5,62 ± 0,07)×105; (5,55 ± 0,05)×105; (5,02 ± 0,09)×105 /mL au 10; 11 12 ng y nuôi c y. Ch ng Tetraselmis suecica v i m ộ an u (1,41 ± 0,01)×104 tb/mL (20 %, Jos.hueuni.edu.vn Tập 126, Số 3D, 2017 125 Vgiống/Vmt); (1,09 ± 0,05)×104 tb/mL (15 %, Vgiống/Vmt); (0,89 ± 0,03)×104 tb/mL (10 %, Vgiống/Vmt); (0,46 ± 0,03)×104 tb/mL (5 %, Vgiống/Vmt), m ộ tế c c ại l n lượ l (13,52 ± 0,14)×104; (13,48 ± 0,09)×104; (11,78 ± 0,15)×104 (10,06 ± 0,17)×104 tb/mL sau 8, 9, 11 13 ng y nuôi c y. C hai l i o Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica v i m ộ tiếp gi ng an u 20 % thể ích (Vgiống/Vmt) u ạt m ộ c c ại cao nh t (5,69 ± 0,05)×105 /mL i v i Chaetoceros muelleri (13,52 ± 0,14)×104 /mL i v i Tetraselmis suecica, nhưng qu rình n l i x y ra nhanh ột ngộ h n. Kết qu trên ch h y c c l i nói chung o Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica nói riêng u ph riển theo quy lu t: Khi m ộ nuôi c y an u cao, t c ộ sinh rư ng c a t o nhanh, sinh kh i ca hời gian ạt c c ại c ng ngắn. Tuy nhiên, cùng i s ăng nhanh s lượng tế , c c yếu t môi rường h c cũng nhanh chóng hay ổi theo: Lượng mu i inh ư ng gi m nhanh, pH ăng, h năng nh n nh ng c a từng tế gi m (s t che khu t) [4]. Do v y, m ộ c ng ca , c c yếu t n y nhanh chóng hạn chế ẫn ến ình rạng n l i nhanh, ột ngộ , hó iểm . D ó, iệc c nh m ộ an u hích hợp cho từng loại t o nh m rú ngắn thời gian t ạt sinh kh i c c ại l c n thiết, nhưng ên cạnh ó ph i uy rì lượng t nuôi iểm ược thời gian thu sinh kh i, nh n é n y cũng rùng hợp v i nh n é c a Lê Viễn Chí (1996) hi nghiên c u v t o Skeletonema costatum [2]. Tr ng 4 hí nghiệm v m ộ an u nói rên ch hai l i o Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica chúng ôi nh n th y, m ộ an u t t nh t cho s ph riển c a t o Chaetocceros muelleri l 10 % thể ích iếp gi ng an u Tetraselmis suecica l 10–15 % thể ích tiếp gi ng an u. Vì i m ộ an u n y, ph riển u ạt m t ộ c c ại ư ng i ca , qu rình n l i x y ra ch m. Từ kết qu rên, chúng ôi chọn m ộ an u 10 % (Vgiống/Vmt) i v i ch ng Chaetoceros muelleri 15 % (Vgiống/Vmt) i v i ch ng Tetraselmis suecica ể tiến h nh c c hí nghiệm tiếp theo v nhân nuôi inh h i. 3.3 Thử nghiệ ô á ủng t o Chaetoceros muelleri và Tetraselmis suecica o đ k ệ á sá ự Thí nghiệm ược b rí h n n ngẫu nhiên ng i rời v i hai nghiệm th c l hệ th ng nuôi ín ( úi nil n 50 L) v ể composite (1.000 L) r ng cùng i u kiện nh ng, nhiệ ộ, s c hí 24/24 h. Kết qu th nghiệm nhân nuôi i o Chaetoceros muelleri ược rình y Hình 5 Tetraselmis suecica ược rình y Hình 6. The õi hí nghiệm r ng 10 ng y nuôi c y, kết qu cho th y nhiệ ộ a ộng trong kho ng 25–35 °C; cường ộ nh ng ca h n r t nhi u so v i nuôi r ng i u kiện nhiệ ộ phòng, cường ộ nh ng v rí nuôi lúc 10 giờ a ộng trong kho ng 5.700–6.800 lu , lúc 12 giờ a ộng trong kho ng 14.000–16.000 lu , lúc 15 giờ a ộng trong kho ng 3.290–3.310 lux; pH c a ch ng Chaetoceros muelleri a ộng trong kho ng 7,8–9,0 Teraselmis suecica có pH a ộng trong kho ng 8,2–10,8. Trần Vinh Phương và CS. Tập 126, Số 3D, 2017 126 Hì 5. Đồ th ường c ng inh rư ng c a t o Chaetoceros muelleri r ng i u iện nh ng nhiên Hì 6. Đồ th ường c ng inh rư ng c a t o Tetraselmis suecica r ng i u iện nh ng nhiên Từ kết qu nghiên c u, chúng ôi nh n th y hi nuôi r ng úi nil n ín hể ích 50 L ch ng Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica u ph riển nhanh h n ch m ộ tế c c ại ca h n. M ộ c c ại c a Chaetoceros muelleri hi nuôi r ng úi nil n 50 L l (4,31 ± 0,08)×105 /mL au 8 ng y nuôi c y; bể c mp i e 1.000 L l (3,17 ± 0,10)×105 /mL au 8 ng y nuôi c y, m ộ c c ại c a Tetraselmis suecica hi nuôi r ng úi nil n 50L l (14,44 ± 0,14)×104 /mL au 7 ng y nuôi c y; bể c mp i e 1.000 L ạt (9,23 ± 0,32)×104 /mL au 6 ng y nuôi c y. Đ i v i hệ th ng nuôi ng i rời hì hí h u l yếu t quan trọng nh hó có hể kiểm nhiệ ộ, nh ng, che ph c a mây, mưa Ở cùng i u kiện ộ mặn, nguồn inh ư ng cung c p cho t ã ược kh ng chế nhưng hể ích nuôi h c nhau i m c nư c h c nhau có hể nh hư ng ến s h p thu nhiệ nư c h năng d ng năng lượng mặt trời ch qu rình quang hợp c a t o. Ở hí nghiệm c a chúng ôi, c c hệ th ng nuôi ược ược b rí c hí, ì y mặc ù hể ích nư c c c nghiệm th c a ộng l n (50 L 1000 L) nhưng ẫn có ồng u v inh ư ng, nhiệ ộ, c c ế hông lắng chìm u ng y [11]. Tuy nhiên, hi nuôi r ng úi nil n ín nư c nuôi ạch hông nhiễm tạp, còn o trong bể composite h nên ễ b nhiễm tạp r ng qu rình nuôi. Ng i ra, cường ộ nh ng cũng nh hư ng mạnh ến c c qu rình inh hóa t , ặc biệ l qu rình quang hợp. Vì y, cường ộ quang hợp c a t ca h n khu v c có nhi u nh ng mặt trời so v i c c hu c có í nh ng. D ó, hi nuôi r ng úi nil n r ng u t, kh năng i o nh n ược nh ng nhi u ồng u h n nên húc ẩy qu rình quang hợp c a t l m m ộ t ăng lên một c ch nhanh chóng h n i nuôi r ng ể composite hời gian ạt c c ại cũng ngắn h n so v i c c hí nghiệm in vitro. Jos.hueuni.edu.vn Tập 126, Số 3D, 2017 127 4 K l ậ Tr ng c c môi rường F/2, Walne TMRL ược h nghiệm, ch ng Chaetoceros muelleri ph riển nh r ng môi rường F/2, Tetraselmis suecica ph riển nh r ng môi rường Walne. M ộ an u hích hợp ch Chaetoceros muelleri ph riển l (0,39 ± 0,03)×105 tế /mL, ư ng ng i 10 % hể ích iếp gi ng an u, ch ng ạt m ộ c c ại (5,55 ± 0,05)×105 tế /mL au 11 ng y nuôi c y. M ộ an u thích hợp cho t o Tetraselmis suecica ph riển l (1,09 ± 0,05)×104 tế /mL ư ng ư ng i 15 % thể ích iếp gi ng an u, ch ng ạt m ộ c c ại (13,48 ± 0,09)×104 tế /mL ng y nuôi h 9. Hai ch ng t o Chaetoceros muelleri Tetraselmis suecica nuôi r ng hệ h ng ín ( úi nil n hể ích 50 L) ph riển nhanh h n ch m ộ ế c c ại ca h n hi nuôi r ng ể h (bể composite 1000 L). V i thể ích iếp gi ng an u 10 % (Vgiống/Vmt), au 8 ng y nuôi c y ch ng Chaetoceros muelleri ạt m ộ c c ại (4,31 ± 0,08)×105 /mL, ca h n 26 % m ộ c c ại c a ch ng n y hi ược nuôi r ng ể composite 1.000 L ((3,17 ± 0,10)×105 ế /mL). Ch ng Tetraselmis suecica v i m ộ tiếp gi ng an u 15 % (Vgiống/Vmt), au 7 ng y nuôi c y ạt m ộ c c ại (14,44 ± 0,14)×104 tế /mL, ca h n 36 % m ộ c c ại ch ng n y ạt ược hi nuôi r ng ể c mp i e 1000 L ((9,23 ± 0,32)×104 ế /mL). Tà l ệ k o 1. Đặng T Vân C m, Trình Trung Phi, Diêu Phạm H ng Vy, Lê Thanh Huân, Đặng Th Nguyên Nh n (2013), Ảnh hư ng c a m ộ ban u lên inh rư ng vi t o Nannochloropsis Isochrysis galbana nuôi r ng hệ th ng t m, Tạp chí nghề cá sông Cửu Long, (2). 2. Lê Viễn Chí (1996), Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học công nghệ nuôi tảo Silic Skeletonema costatum (Grevilei) Cleve làm thức ăn cho ấu trùng tôm biển, Lu n n PTS, Viện Nghiên c u H i s n H i Phòng, 140 r. 3. Nguyễn Thanh Mai, Tr nh H ng Kh i, Đ Văn Trí, Nguyễn Văn Hùng (2009), Nghiên c u phân l p, nuôi c y in vitro t ilic nư c mặn Chaetoceros calcitrans Paul en, 1905 ng d ng nuôi inh h i t l m h c ăn ch ôm he chân rắng (Litopenaeus vannamei), Tạp chí phát triển khoa học và công nghệ, 12 (13), 28–36. 4. Nguyễn Th Thúy, Nguyễn T n Sĩ (2015), L a chọn môi rường nuôi hích hợp cho s ph triển c a t o Tetraselmis suecica (kylin) butcher, 1959, Tạp chí Khoa học – Công nghệ Thủy Sản, (1), 63–67. 5. Brown M.R. (1991), The amino acid and sugar composition of 16 species of microalgae used in mariculture, Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, Elsevier, 145 (1), 79–99. 6. Brown M.R. (2002), Nutritional Value and Use of Microalgae in Aquaculture, Aquaculture, 60–78. Trần Vinh Phương và CS. Tập 126, Số 3D, 2017 128 7. Chiou S., Su Y.W.W., Su Y.C. (2001), Optimizing production of polyunsaturated fatty acids in Machantia polymorphacell suspension culture, Journal of Biotechnology, 85(3), 247–257. 8. Robert F. A. Jr., Christopher D. R, Andrew F. R, and Benjamin E. V (1984), Role of silicon in diatom metabolism, Journal of Plant Physiol, 76(3), 674-679. 9. Guillard R.R.L., Ryther J.H. (1962), Studies of marine planktonic diatoms I. Cyclotella Nana Hustedt and Detonula confervacea (Cleve) Gran, Canadian Journal of Microbiology, 8 (2), 229– 239. 10. Kungvankij P., Tiro L.B., Pudadera B.J., Potestas I.O., Corre K.G., Borlongan E., Talean G.A., Bustilo L.F., Tech E.T., Unggui A., Chua T.E., (1985), Shrimp hatchery design, operation and management, Training manual. 95 pp. Project: FAO-FI--RAS/76/003. Project: FAO-FI-- NACA/TR/85/12. Establishment of Network of Aquaculture Centres in Asia. Microfiche no: 86X00888. 11. Oswald W.J. (1988), Large-scale algal culture systems (engineering aspects), In Borowitzka MA, Borowitzka LJ (eds), Microalgal Biotechnology, Cambridge University press, Cambridge, pp. 357–394. 12. Persoone G., Claus C. (1980), Mass culture of algae : a bottleneck in the nursery culturing of molluses, In: Algae Biomass, Shoeder G. S. C. J(ed.), Elsevier, Amsterdam, 265–285. 13. Susana A., Rivero A., Rodrisguez R., Beaumont C.L., Marya V. (2007), The effect of micralgal diets on growth, biochemical composition, and fatty acid profile of Crassostrea corteziensis (Hertlein) juveniles, Aquaculture, 263 (1), 199–210. 14. Walne P.R. (1970), Studies on the food value of nineteen genera of algae to juvenile bivalves of the genera Ostrea, Crassostrea, Mercenaria, and Mytilis, Fishery Investigations, London Series 2 (26),1– 62. 15. Wikfors G.H., Ohno M. (2001), Impact of algal research in aquaculture, Journal of Phycology, 37,968 – 974. Jos.hueuni.edu.vn Tập 126, Số 3D, 2017 129 EFFECT OF NUTRIENT MEDIUM, INITIAL DENSITY ON THE GROWTH OF MICROALGAE Chaetoceros muelleri, Tetraselmis suecica AND TRIAL BIOMASS DEVELOPMENT UNDER OUTDOOR CONDITIONS IN THUA THIEN HUE PROVINCE Tran Vinh Phuong1 *, Nguyen Van Khanh1, Le Thi Tuyet Nhan1, Pham Thi Hai Yen2, Kieu Thi Huyen2 Vo Đ N 2 1 HU – Institute of Biotechnology, Tinh Lo 10, Phu Vang, Thua Thien Hue, Viet Nam 2 HU – University of Agriculture and Forestry, 102 Phung Hung St., Hue, Vietnam Abstract: This paper aims at identifying the effect of the nutrient medium and initial density on the growth of microalgae Chaetoceros muelleri, Tetraselmis suecica and performing experiments on outdoor biomass breeding under the most basic conditions. The findings showed that the F/2 medium and the Walne’ medium were the most suitable for Chaetoceros muelleri and Tetraselmis suecica, respectively. After 11 days, Chaetoceros muelleri that represented 10 % in the total culture medium reached the maximum density at (5.55 ± 0.05)×105 cells/mL with a stable balanced phase. Tetraselmis suecica that represented 15 % in total culture medium reached the maximum density at (13.48 ± 0.09)×104 cells/mL with stable balanced phase on the ninth culture day. The results of mass culture showed that after 8 culture days, Biomass Chaetoceros muelleri cultured naturally in a 50 L container reached a maximum density at (4.31 ± 0.08)×105 cells/mL, while in a 1000 L container the biomass reached a maximum density at (3.17 ± 0.10)×105 cells/mL. Tetraselmis suecica biomass reached the highest density at (14.44 ± 0.14)×104 cells/mL in the volume of 50 liters after 7 culture days. Whereas, the biomass reached (9.23 ± 0.32)×104 cells/mL in the volume of 1000 liters after 6 culture days. Keywords: Chaetoceros muelleri, Tetraselmis suecica, initial density, microalgae, nutrient medium, trial biomass